Geri Dön

Deneysel karaciğer intoksikasyonunda DNA hasarının belirlenmesi ve N asetil sisteinin rolü

Determination of DNA damage in experimental liver intoxication and role of N acetyl cysteine

PDF İndir

  1. Tez No: 274627
  2. Yazar: HASAN AKŞİT
  3. Danışmanlar: PROF. DR. AYŞEGÜL BİLDİK
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2011
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Adnan Menderes Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 115

Özet

Çalışmamızda HAT ve HDAC enzim aktiviteleri tayin edilerek, bu enzimlerin aktiviteleri üzerine (dolaylı olarak tanskripsiyon üzerine) oksidatif stresin olası etkisini, gen transkripsiyonu ile kontrol edilen apoptosis ile histon asetilasyonu arasında bir ilişkinin olup olmadığını, N Asetil Sisteinin deneysel karaciğer intoksikasyonunda DNA hasarı üzerine koruyucu rolünün olup olmadığını araştırmayı amaçladık.Çalışmaya 6 grupta toplam 60 adet rat alındı. Karaciğer toksisitesi oluşturmak amacıyla CCl4, periton içi 2 ml/kg 1/1 oranında zeytinyağındaki çözeltisi şeklinde tek doz enjekte edildi. NAS uygulamasına (periton içi 50 mg/kg/gün) CCl4 enjeksiyonundan 3 gün önce başlandı ve deney süresince devam edildi. Kontrol gruplarına zeytinyağı ve N Asetil Sistein uygulaması yapıldı. CCl4 enjeksiyonundan 6 ve 72 saat sonra eter anestezisi altında kan ve karaciğer dokusu alındı. Karaciğer dokusundan nükleer ekstrakt hazırlandı.Serum AST, ALT, MDA düzeylerinin, CCl4 verilen grupta 6. saatte kontrol gruplarına göre arttığı, 72. saatte artışın olduğu fakat altıncı saate göre azaldığı belirlenmiştir. CCl4+NAS verilen grupta ise 6. ve 72. saatte kontrol gruplarıyla karşılaştırıldığında artışın olduğu fakat CCl4 gruplarına göre düzeyinin azaldığı belirlenmiştir. CCl4 uygulamasının deneysel karaciğer intoksikasyonu ve lipit peroksidasyonuna neden olduğu, NAS uygulamasına ve zamana bağlı olarak düzeyinin azaldığı tespit edilmiştir.Serum TAK analizinde, CCl4 verilen grupta 6. saatte kontrol gruplarına göre düzeyinin azaldığı, 72. saatte de azalmanın olduğu fakat altıncı saate göre arttığı görülmüştür. CCl4+NAS verilen grupta ise 6. ve 72. saatte kontrol gruplarıyla karşılaştırıldığında azalmanın olduğu fakat CCl4 gruplarına göre düzeyinin arttığı belirlenmiştirdi. TOK analizinde, CCl4 verilen grupta 6. saatte kontrol gruplarına göre düzeyinin arttığı, 72. saatte ise gruplar arasında fark olmadığı; CCl4+NAS verilen grupta 6. saatte kontrol gruplarıyla karşılaştırıldığında artışın olduğu fakat CCl4 gruplarına göre düzeyinin azaldığı, 72. saatte ise fark olmadığı belirlenmiştir.Nükleer ekstraklarda yapılan 8-hidroksi 2-deoksiguanozin ve Histon Asetil Transferaz analizinde, CCl4 verilen grupta 6. saatte kontrol gruplarına göre düzeyinin arttığı, 72. saatte de artışın olduğu fakat altıncı saate göre düzeyinin azaldığı belirlenmiştir. CCl4+NAS verilen grupta ise 6. ve 72. saatte kontrol gruplarıyla karşılaştırıldığında artışın olduğu fakat CCl4 gruplarına göre düzeyinin azaldığı saptanmıştır. Histon deasetilaz düzeyinin, CCl4 verilen grupta 6. saatte kontrol gruplarına göre azaldığı, 72. saatte de azalmanın olduğu fakat altıncı saate göre arttığı görülmüştür. CCl4+NAS verilen grupta ise 6. ve 72. saatte kontrol gruplarıyla karşılaştırıldığında azalmanın olduğu fakat CCl4 gruplarına göre düzeyinin arttığı belirlenmiştir.Apoptotik DNA fragmentasyonu analizinde ise, 6. saatte CCl4 grubunda kontrol grubuna göre düzeyinin arttığı, 72 saatte de artışın olduğu fakat altıncı saate göre düzeyinin azaldığı tespit edildi. CCl4+NAS verilen grupta ise 6. ve 72. saatte kontrol gruplarıyla karşılaştırıldığında artışın olduğu fakat CCl4 gruplarına göre düzeyinin azaldığı tespit edilmiştir. Apoptozis ayrıca karaciğer dokusunda TUNEL yöntemi ile değerlendirilmiş ve 6. saatte, CCl4 verilen grupta kontrol gruplarına göre apoptotik hücrelerin arttığı, NAS ilave edilen grupta CCl4 grubuna göre azaldığı, 72 saatte kontrol grubuna göre bir artışın olduğu fakat 6. saate göre düzeyinin azaldığı görülmüştür.Karaciğerde serbest radikal oluşturmak için CCl4 toksisite modeli uygulanmıştır. Oksidatif stres oluştuğu ve buna bağlı olarak DNA'da hasar ve DNA kırılmalarının şekillenip, histon asetilasyonunun arttığı, deasetilasyonunun ise azaldığı ve hücrelerin apoptozise yöneldiği belirlenmiştir. Aynı zamanda, N Asetil Sisteinin DNA'daki hasar üzerine koruyucu rolünün olduğu, oksidatif stres ve apoptozisi azalttığı tespit edilmiştir.Anahtar Kelimeler; Karbon tetraklorür, N asetil sistein, oksidatif DNA hasarı, histon asetilasyonu, serbest radikaller, apoptozis

Özet (Çeviri)

We were assigned to HAT and HDAC enzymes, We aimed to investigate whether on the activities of these enzymes (on tanskripsiyon indirectly) the possible effect of oxidative stress, apoptosis and gene transcription is controlled by whether or not a relationship between histone acetylation, N acetyl cysteine on the protective role of DNA damage in experimental liver intoxication.In this study, totaly 60 rats were used in 6 groups. Liver toxicity of CCl4 in order to create, intraperitoneally 2 ml / kg, 1 / 1 ratio as a single dose of olive oil solution was injected. N Acetyl Cysteine application (intraperitoneal 50 mg / kg / day) was started 3 days before CCl4 injection and was continued during the experimental period. Control groups were performed in olive oil and N Acetyl Cysteine. 6. and 72. hours after CCl4 injection, blood and liver tissue were taken under ether anesthesia. Nuclear extracts were prepared from liver.Serum AST and ALT levels increased in the group CCl4 6. hour than the control groups, 72. hour there was an increased but were decreased compared to 6. hour. In the group with CCl4+NAC 6. and 72. hours there were an increased level compared with control groups but levels were reduced compared to the CCl4 group. MDA analysis, CCl4 in the group 6. hour increase than the control groups, 72. hour there was an increased but were decreased compared to 6. hour. In the group with CCl4+NAC 6. and 72. hour there was an increased level compared with control groups, but levels were decreased compared to the CCl4 groups. CCl4 intoxication and lipid peroxidation in the liver caused by experimental application, the level, depending on the NAS application and time were reduced.Serum analysis of TAS, the levels decreased in the group CCl4 6. hour compared to the control groups, 72. hour there was an decreased but were increased compared to 6. hour. In the group with CCl4+NAC 6. and 72. hours there were an decreased level compared with control groups but levels were increased compared to the CCl4 group. Analysis of the TOS, the levels increased CCl4 in the group 6. hour compared to control groups, 72. hour difference between the groups was not identified. CCl4+NAC treated group compared with the control group 6 hours, there was an increased, but the level decreased compared to CCl4 group, the difference was not identified in 72. hour.The 8-hydroxy-2-deoxyguanosine and Histone Acetyl Transferase analysis in nuclear extract, the CCl4 treated group, the level was increased compared to control groups the in 6 hours, 72. hour, but also there was an increased level compared to 6. hour were reduced. CCl4+NAC treated group, the level was increased compared with control groups in the 6. and 72. hours, but decreased levels were determined according to CCl4 group. The level of histone deacetylase, CCl4 treated group 6. hour level was decreased than the control groups, 72. hour there was an decreased but were increased compared to 6. hour. CCl4+NAC treated group was decreased compared with control groups in the 6. and 72. hours, but increased levels were determined according to CCl4 group.In the analysis of apoptotic DNA fragmentation, the levels increased in the group CCl4 6. hour than the control groups, 72. hour there was an increased but were decreased compared to 6. hour. In the group with CCl4+NAC 6. and 72. hour there was an increased level compared with control groups, but levels were decreased compared to the CCl4 groups. Apoptosis also was evaluated by TUNEL assay in liver tissue, and 6. hour, apoptotic cells increased in CCl4 treated group than the control groups, the NAS was added to the group decreased compared to the CCl4 group, 72. hour is an increase compared with the control groups but decreased levels were determined compared with 6. hour.Toxicity model of CCl4 in the liver was performed to generate free radicals. Oxidative stress, DNA damage and DNA breakage occurred and formed and consequently, increased histone acetylation, decreased histone deacetylation and increased apoptosis were determined. At the same time, that the protective role of N acetyl cysteine on DNA damage and reduced oxidative stress and apoptosis were determined.Key Words; Carbon tetrachloride, N acetyl cysteine, oxidative DNA damage, histone acetylation, free radicals, apoptosis

Benzer Tezler

  1. Tez No

    435720

    Deneysel karaciğer intoksikasyonunda apoptosis oranlarının tespiti ve galektin-3'ün ekspresyonunun araştırılması

    Detection of apoptosis rate in experimental liver intoxication and the inves-tigation of galectin-3 expression

    ZELİHA GÖÇER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    BiyokimyaBalıkesir Üniversitesi

    Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. KAMİL SEYREK

  2. Tez No

    388728

    Deneysel karaciğer intoksikasyonunda N asetil sisteinin karaciğerdeki bazı lektinlerin ekspresyonu ve lokalizasyonu üzerine etkileri

    Effects of N acetylcysteine on expression and localization of some lectins in the liver of experimental hepatic intoxication

    DUA DANJOLLİ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyokimyaBalıkesir Üniversitesi

    Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. HASAN AKŞİT

  3. Tez No

    259461

    Karbontetraklorür ile oluşturulan karaciğer intoksikasyonunda Royal Jelly'nin antioksidan enzimler ve mineral madde düzeyleri üzerine etkisi

    Effect of Royal Jelly on antioxidant enzymes and element status in carbon tetrachloride intoxication

    FATMA YILMAZ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    BiyokimyaAfyon Kocatepe Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MUSTAFA CEMEK

    PROF. DR. MEHMET EMİN BÜYÜKOKUROĞLU

  4. Tez No

    282026

    Ratlarda oluşturulan asetaminofen hepatotoksitesi üzerine flumazenilin antioksidan aktivitesinin araştırılması ve histopatolojik incelenmesi

    Investigation of the antioxidant activity of flumazenil and histopathologic examination on acetaminophene induced hepatotoxicity in rats

    ZEYNEP ORHAN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    Anestezi ve ReanimasyonErciyes Üniversitesi

    Anesteziyoloji ve Reanimasyon Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HALİT MADENOĞLU

  5. Tez No

    360131

    Ratlarda deneysel civa intoksikasyonunda eritrosit reolojisi üzerine propolisin muhtemel koruyucu etkisi

    Potential protective effect of propolis in erythrocyte rheology in experimental mercury intoxication of rats

    KADRİYE ERCİŞ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    FizyolojiErciyes Üniversitesi

    Fizyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SAMİ AYDOĞAN

Geri Dön