Akasya ağacı toprağından izole edilen Bacillus Sp. tarafından üretilen endüstriyel enzimlerin araştırılması
Investigating of industrial enzymes from Bacillus Sp isolated from Acacia cyanophylla Lindley
- Tez No: 341354
- Danışmanlar: PROF. DR. DİLEK KAZAN
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyoloji, Biyomühendislik, Biyoteknoloji, Biology, Bioengineering, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2013
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 163
Özet
Maltooligosakkarit üreticisi olan yeni bir ?-amilaz üreticisi Akasya ağacı (Acacia cyanophylla Lindley ) toprağıdan izole edilmiştir. Fiziksel karakteristiğine ve 16S rRNA gen sekansı bakıldığında izolatın Bacillus genusuna ait olduğu belirlenmiş ve Bacillus subtilis SDP1 olarak adlandırılmıştır. En yüksek enzim üretimine çözülebilir nişatanın karbon kaynağı, maya özütünün de azot kaynağı olduğu besiyerinde ulaşılmıştır. SDP1 ?-amilaz enzimi yaklaşık 61kDa?luk bir moleküler ağırlığa sahiptir. Enzimin optimum pH?sı 7.0 olmakla birlikte pH 5.0 ile pH 9.0 arasında oldukça aktiftir. Bununla birlikte pH 6.0 ile pH 8.0 arasında da çok kararlı bir enzimdir. Ham enzimin optimum sıcaklığı 60°C olup 50°C?de 1 ve 2 saatlik inkübasyonlar sonucunda başlangıç aktivitesinin sırasıyla %83 ve %74?ünü korumaktadır. SDP1 ?-amilaz enzimi DEAE-selüloz iyon değiştirme kromatografisi kullanılarak saflaştırılmıştır. Saflaştırma sonucunda ham fermentasyon sıvısı yaklaşık % 26 verim ile 9,9 kat saflaştırılmıştır. Saflaştırılmış enzimin spesifik aktivitesi 191.8 U mg-1 olarak hesaplanmıştır. Manyetik alginat mikrokürelerine immobilize edilen SDP1 ?-amilaz enziminin 70°C?deki termal kararlılığı yaklaşı 7 kat artmaktadır. Hem çözülebilir hem de buğday nişastanın SDP1 ?-amilazı ile hidrolizi sonucunda ana ürün olarak maltoz, maltotrioz ve maltotetraoz oluştuğu ince tabaka kromatografisi ile belirlenmiştir. Bu da SDP1 ?-amilaz enziminin maltooligosakkarit üreten bir enzim olduğunu göstermektedir. Aktivite ve stabilitesi için kalsiyuma ihtiyaç duymaması ve yeterli miktarda küçük maltotrioz ve maltotetraoz gibi küçük maltooligosakkaritler üretebilmesi SDP1 ?-amilazını özellikle gıda ve fırıncılık sektörü için potensiyel bir aday yapmaktadır. Bu tez çalışması Marmara Üniversitesi, Bilimsel Araştırma Projeleri Birimi tarafından FEN-C-DRP-171108-0267 numaralı proje ile desteklenmiştir.
Özet (Çeviri)
A maltooligosacharide-forming ?-amylase producer was isolated from the rhizosphere of Acacia cyanophylla Lindley from Çukurova region of Turkey. According to physiological characteristics and 16S rRNA gene sequence, this strain belonged to the genus Bacillus hence it was designated as Bacillus subtilis SDP1. Highest enzyme production was achieved with soluble starch as the carbon and yeast extract as the nitrogen source and at pH 7.0 and 37 °C. The ?-amylase had an apperent molecular weight of 61 kD. The optimum pH of the enzyme was 7.0 and it was highly active at pH ranging from 5.0 to 9.0. It was also stable at pH ranging from 6.0 to 8.0. The optimum temperature of the crude enzyme was 60°C and it retained 83% and 74% of its initial activity after 1h and 2h incubation periods at 50°C. SDP1 ?-amylase purified to homogenity with single step ion-exchange chromatography. The purity of the enzyme was about 9.9-fold greater than that of the crude supernatant liquid. The yield of the purified enzyme preparation was about 26% with respect to the culture supernatant. The specific activity of the purified enzyme was about 191.8 U mg?1. Immobilization of SDP1 ?-amylase stability with magnetic alginate beads enhanced the enzyme stability ~7 fold at 70°C. The unique features of calcium independence and efficient production of small maltooligosaccharides such as maltotetraose and maltotriose make SDP1 amylase potentially useful in food industries. This thesis has been supported by Marmara University, Scientific Research Project Unit with a project number FEN-C-DRP-171108-0267.
Benzer Tezler
- Investigtion of the kinetic parameters of extracellular alpha-amylase from Bacillus subtilis SDP1 immobilized on alginate beads
Alginat küreler üzerine immobilize edilmiş, Bacillus subtilis SDP1'den elde edilen alpha-amilazın kinetik parametrelerinin araştırılması
EDA BAL
Yüksek Lisans
İngilizce
2015
BiyoteknolojiMarmara ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. DİLEK KAZAN
- Yonca silajına farklı seviyelerde ilave edilen kurutulmuş akasya ağacı (Robinia pseudoacacia) yaprakları ve melasın silaj kalitesi, in vitro rumen fermantasyonu, metan üretimi ve ham besin madde sindirilebilirliği üzerine etkileri
Effects of different levels of acacia (Robinia pseudoacacia) tree leaves and molasses on alfalfa silage quality, in vitro rumen fermentation, methane production and nutrient digestibility
MAHMOOD UL HASSAN MAHMOOD UL HASSAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2023
Veteriner HekimliğiAtatürk ÜniversitesiHayvan Besleme ve Beslenme Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET GÜL
- Aktif karbon kullanılarak sulu çözeltilerden boyar madde uzaklaştırılması
Dyestuffs removal from aqueous solutions using activated carbon
İLYAS GENEL
- Bazı baklagil ağaç yapraklarının anti metanojenik potansiyellerinin belirlenmesi
Determination of anti methanogenic potentials of some leguma tree leaves
ATİLLA BAŞER
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
ZiraatKahramanmaraş Sütçü İmam ÜniversitesiZootekni Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ADEM KAMALAK
- Sanayi bölgelerinde yetişen bazı hiperakümülatör bitkilerin metal içerikleri ile histidin düzeyleri arasındaki ilişkinin incelenmesi
Investigation of correlation between histidine levels and metal concentrations of some hyperaccummulator plants grown around industrial area
ŞÜKRAN AKKUŞ ÖZEN