Yenidoğan ratlarda oluşturulan astrosit hücre kültüründe bilirübin nörotoksisitesine rekombinant eritropoetinin etkisi
The effect of recombinant erythropoietin on bilirubin neurotoxicity in astrocyte cell culture of neonatal rats
- Tez No: 366218
- Danışmanlar: PROF. DR. HACER ERGİN
- Tez Türü: Tıpta Yan Dal Uzmanlık
- Konular: Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları, Child Health and Diseases
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2014
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Pamukkale Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Neonatoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 96
Özet
Yenidoğanlarda halen önemli bir problem olan bilirübin nörotoksisitesinin hücresel ve moleküler mekanizmaları tam olarak bilinmemektedir. Fizyolojik düzeylerde indirekt bilirübin oksidatif strese karşı koruyucu iken; orta-ağır hiperbilirübinemi oksidatif ve nitrözatif stres, lipid peroksidasyonu, proinflamatuar sitokinlerin salınımı ve ekstraselüler glutamat birikimini tetikleyerek sinir hücresinde nekroz veya apopitozise, klinik olarak akut bilirübin ensefalopatisi veya kernikterusa yol açabilmektedir. Eritropoetin (Epo), antiapopitotik, antiinflamatuar, antioksidan, antinitrozatif, anjiojenik ve nörotrofik mekanizmalarla nöronları sitotoksisiteden korumaktadır. Ancak hiperbilirübinemiye bağlı nörotoksisiteye Epo'nun etkisi henüz bilinmemektedir. Bu çalışmada primer astrosit hücre kültürü oluşturulan yenidoğan ratlarda bilirübin nörotoksisitesine Epo'nun etkisi araştırıldı. Çalışmamızda bir günlük Wistar albino ratlardan modifiye Cole ve De Vellis yöntemi ile elde edilen astrosit hücre kültürü kullanıldı. Astrosit hücrelerinin %50'sine toksik etkili olan indirekt bilirübin konsantrasyonu (TC50) 50 ?M, hücre canlılığını %100 arttıran Epo konsantrasyonu 2.5 IU/ml olarak saptandı. Bilirübin toksisitesine bağlı görülen apopitozis TUNEL boyama yöntemiyle değerlendirildi. İndirekt bilirübinden dört saat önce ve sonra Epo uygulanan astrosit hücre kültüründe 24 saat sonra apopitozis, katalaz, süperoksit dismutaz (SOD), glutatyon peroksidaz (GPx), laktat dehidrojenaz (LDH) aktivitesi, glutatyon, malondialdehid (MDA), total nitrat/nitrit, intelökin (IL)-1ß, IL-6 ve TNF-? düzeyi, 72 saat sonra hücre canlılığı değerlendirildi. Bilirübin grubunda, apopitozis oranının kontrol grubundan 50 kat fazla arttığı; hücre canlılığının %75 azaldığı saptandı. Profilaktik ve tedavi edici Epo uygulaması, bilirübinin indüklediği apopitozisi, total nitrat/nitrit, IL-6, TNF-? düzeyini azaltırken; hücre canlılığı, katalaz, GPx aktivitesi ve glutatyon, IL-1ß düzeyini arttırdı. Profilaktik Epo, LDH aktivitesini arttırırken; tedavi edici Epo LDH aktivitesini azalttı. Gruplar arasında SOD ve MDA düzeyleri bakımından anlamlı bir farklılık yoktu. Bu çalışmada, ilk kez profilaktik ve tedavi edici olarak uygulanan Epo'nun, antiapopitotik, antioksidan, antiinflamatuar ve antinitrozatif özellikleri ile bilirübin nörotoksisitesine karşı koruyucu etkisinin olduğu gösterildi.
Özet (Çeviri)
Cellular and molecular mechanism of bilirubin neurotoxicity, which is still an important problem of newborns, is not exactly known. While indirect bilirubin in physiological level is against oxidative stress; moderate-severe hyperbilirubinemia can cause necrosis or apoptosis in neurons, and cause clinically acute bilirubin encephalopathy or kernicterus, by inducing oxidative stress, lipid peroxidation, proinflammatory cytokine releasing and extracellular glutamate deposition. Erythropoietin (Epo) can protect the neuron cells from cytotoxicity by antiapoptotic, anti-inflammatory, antioxidant, antinitrosative, angiogenic and neurotrophic mechanisms. However, the effect of Epo on neurotoxicity caused by hyperbilirubinemia has not been known yet. In this study, the effect of Epo on bilirubin neurotoxicity in newborn rats' primer astrocytes cell culture is investigated. In our study, astrocyte cell cultures of one-day-old Wistar albino rats were used, which were obtained from modified Cole and De Vellis method. The indirect bilirubin concentration that has toxic effect on 50% of astrocyte cells (TC50) was detected as 50 ?M and Epo concentration that increase cell viability as 100% was found 2.5 IU/ml. Apoptosis due to bilirubin toxicity was evaluated by TUNEL staining technique. After and before four hours bilirubin incubation Epo treatment was administered. In astrocyte cell cultures, apoptosis, catalase, superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx), lactate dehydrogenase (LDH) activities, glutathione, malondialdehyde (MDA), total nitrate/nitrite, interleukin (IL)-1ß, IL-6 and TNF-? levels were investigated after 24 hours of bilirubin incubation and also cell viability after 72 hours was evaluated. In bilirubin group, it was detected that cell viability decreased in 75% and that apoptosis rate increased in fifty times more than the control group. Although prophylactic and therapeutic Epo application decreased apoptosis, total nitrate/nitrite, IL-6, and TNF-? levels induced by bilirubin, it increased cell viability, catalase and GPx activities, glutathione and IL-1ß levels. While prophylactic Epo increased LDH activity; therapeutic Epo decreased it. There was not any significantly difference in between the groups in terms of SOD and MDA levels. In this study, it was the first time shown that prophylactic and therapeutic Epo had protective effects on bilirubin neurotoxicity because of antiapoptotic, antioxidant, antiinflammatory and antinitrosative properties.
Benzer Tezler
- Yenidoğan rat astrositlerinde deneysel olarak oluşturulan bilirübin toksisitesine kafeinin etkisi
The effect of caffeine on experimental bilirübin toxicity in newborn rat
MEHMET DELİKTAŞ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2015
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıPamukkale ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HACER ERGİN
- Dokosaheksaenoik asidin bilirubin nörotoksisitesini önlemede proflaktik etkisi
The protective effect of docosahexaenoic acid on the bilirubin neurotoxicity
CEM BECERİR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2011
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıPamukkale ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. ÖZMERT MA. ÖZDEMİR
- Bilirubin sitotoksisitesi oluşturulan yenidoğan rat astrosit hücre kültüründe ginkgo bilobanın etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of ginkgo biloba on newborn rat astrocyte cell cultures with bilirubin cytotoxicity
ÖZLEM ŞAHİN
Tıpta Yan Dal Uzmanlık
Türkçe
2012
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıPamukkale ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. HACER ERGİN
- Ratlarda rifampisin molekülünün hipoksik santral sinir sistemi hasarına etkisinin değerlendirilmesi
Erci̇yes University Faculty of Medicine, child HEALTH and diseases, evaluation of the effect of rifampisin molecule on hipoxic central nervous system damage
MEHMET ALÇI
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2022
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıErciyes ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KAZIM ÜZÜM
PROF. DR. HÜSEYİN PER
- Hiperoksik akciğer hasarı oluşturulan yenidoğan ratlarda bosentanın akciğerdeki histopatolojik ve biyokimyasal etkileri
Histopathological and biochemical effects of bosentan on hyperoxia-induced lung injury in neonatal rats
ÖZGÜN TABAN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2018
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıPamukkale ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ÖZMERT MUHAMMET ALİ ÖZDEMİR