Mezenkimal kök hücrelerden pankreas adacık beta hücrelerine benzer insülin salgılayan hücrelerin rekombinant DNA teknolojisi ile eldesi
The production of pancreatic islet beta like insulin producing cells from mesenchymal stem cells by recombinant DNA technology
- Tez No: 389745
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. GÖKHAN DURUKSU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2014
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Kocaeli Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kök Hücre Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Kök Hücre ve Doku Yenilenmesi Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 116
Özet
Sunulan tez çalışmasında mezenkimal kök hücreler kullanılarak gen aktarımı sonrası kimyasal uyarılma ile tip 1 diyabetin hücresel tedavisi için insülin üretebilen beta benzeri hücre elde etme potansiyelinin gözlenmesi amaçlanmıştır. Çalışmada sıçan pankreatik adacıklarından izole edilen mezenkimal kök hücreler (sPA-MKH) kullanılmıştır. İzole edilen pankreatik adacıklardan spesifik primerler kullanılarak Ngn3 (Neurogenin3), Pax4 (paired box gene 4), MafA (musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A) ve Gck (Glucokinase) transkripsiyon faktörleri çoğaltılmış ve bu genlerden toplam dokuz grup oluşturularak sPA-MKH'lere elektroporasyon ile aktarılmıştır. Aktarılan genlerin birbirleriyle olan etkileşimleri ve gruplar arasındaki fark anlaşılmaya çalışılmıştır. Gen aktarımı sonrası hücreler kimyasal ajanlar ile endokrin yönde uyarılmış ve hücrelerin farklılaşma potansiyelleri morfolojik olarak ve beta hücre belirteçleri açısından gen ekspresyon profilleri karşılaştırılmıştır. Hücre içi proteinlerin sentezi arasındaki farkı belirleyebilmek için Western Blot Hibridizasyon yapılmıştır. Sonuç olarak gen aktarımı sonrası elde edilen gruplar arasında belirgin farklar olduğu ve yalnızca beta benzeri hücre değil diğer adacık hücrelerinin karakterini taşıyan hücrelerin de elde edildiği gözlenmiştir. Endokrin yönde kimyasal uyarılma sonucunda ise bazı gruplarda adacık benzeri hücre topluluklarının oluşmasını sağladığı görülürken, yalnızca Ngn3-Pax4-MafA genlerinin bir arada aktarıldığı grup hücreler üzerinde önemli bir etki yaratarak insülin granüllerine benzer yapı elde edildiği immünfloresan tekniklerle gösterilmiştir.
Özet (Çeviri)
In the presented thesis, the detection of the differentiation potential of the mesenchymal stem cells into insulin producing beta like cells by chemical induction following the gene transfer was aimed for the cellular therapy of type 1 diabetes. In the study, rat pancreatic islet derived mesenchymal stem cells (rPI-MSC) were used. Ngn3 (Neurogenin3), Pax4 (paired box gene 4), MafA (musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A) and Gck (Glucokinase) transcription factors were isolated from rat pancreatic islets and transfected into rPI-MSC by electroporation in different combination forming nine experimental groups. The interactions of these genes and the differences between the groups were tried to be understood. Cells following gene transfection were induced to differentiate into endocrine cell lineage with chemical agents, and the diffentitaion potential of these cell groups were compared morphologically and by gene expression profiling. Western Blot Hybridization analyses used to determine the cellular protein differences between cell groups. As a result, the cell groups that transfected with genes showed significant differences, and not only the beta cells but also the other types of cells in pancreatic islets were obtained. While some group of cells forms cell clusters like islets after the chemical induction, only the Group 9 cells, which were co-transfected with Ngn3, Pax4, MafA, was shown to form insulin granules that showed by immunofluorescence staining after the chemical induction.
Benzer Tezler
- Engineering beta-cell organoids for the treatment of type 1 diabetes
Tip 1 diyabet tedavisi için beta hücrelerinden oluşan organoitlerin geliştirilmesi
YASEMİN İNCEOĞLU
Yüksek Lisans
İngilizce
2019
BiyomühendislikKoç ÜniversitesiKimya ve Biyoloji Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. SEDA KIZILEL
- Endokrin pankreas organoid yaşlanma modelinde mitokondri hasarının incelenmesi
Investigation of mitochondrial damage in endocrine pancreatic organoid aging model
DEREN ASLAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
BiyolojiKocaeli ÜniversitesiKök Hücre ve (Rejeneratif) Yenileyici Tıp Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. GÖKHAN DURUKSU
- Tip 1 diabetes mellitus modelinde langerhans adacık ve mezenkimal kök hücre tabakalarının makrokapsülasyon yoluyla konak savunma sisteminden korunarak fonksiyonunun devamlılığının sağlanması
Ensuring continuity of function by using macroencapsulation technique langerhans islet and mesenchymal stem cell sheets protection from host immune system in type 1 diabetes mellitus model
BÜŞRA ÖNCEL DUMAN
- Kemik iliği kaynaklı mezenkimal kök hücre tabakası ile birlikte 3-boyutlu adacık dokusunun subkutan naklinin diyabetik sıçan modelinde etkinliğinin araştırılması
Studying the efficiency of subcutaneous transplantation of bone marrow-derived mesenchymal stem cell sheet with 3-D islet tissue in diabetic rat model
BÜŞRA ÖNCEL DUMAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2014
BiyomühendislikKocaeli ÜniversitesiKök Hücre Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. AYLA EKER SARIBOYACI
- Pankreas adacık kaynaklı MAFA+/PAX4+ kök hücrelerin kullanılmasıyla desellülerize karaciğer doku iskelesinin insülin salgılayan doku parçasına dönüştürülmesi
Development of decellularized liver scaffold into insulin secreting tissue BY MAFA+/PAX4+ pancreatic islet derived stem cells
AHMET ÖZTÜRK
Yüksek Lisans
Türkçe
2016
BiyolojiKocaeli ÜniversitesiKök Hücre Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. GÖKHAN DURUKSU