Geri Dön

Preeklamptik gebeliklerde plasenta ve kandan elde edilen mezenkimal kök hücrelerde transkriptom analizi

Transcriptome analysis on mesenchymal stem cells derived from placenta and blood in preeclamptic pregnancies

PDF İndir

  1. Tez No: 659873
  2. Yazar: ZEYNEP KUMRAL
  3. Danışmanlar: PROF. DR. TUBA GÜNEL
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Genetik, Genetics
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2021
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: İstanbul Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 108

Özet

Hipertansif gebelik bozuklukları dünya genelinde gebeliklerin %10'unu etkiler. Maternal, perinatal morbidite ve mortalitenin önemli bir nedenini oluşturur. Hipertansif bir gebelik hastalığı olan preeklampsi (PE), gebeliğin 20. haftasından sonra yapılan tekrarlı ölçümler neticesinde sistolik kan basıncının 140 mmHg veya üstü olması, diastolik kan basıncının ise 90 mmHg veya üstü olması durumudur. Hipertansiyona ek olarak proteinüri ve maternal organ disfonksiyonu da görülebilmektedir. Preeklampsi gelişen gebelerde implantasyon ile birlikte plasenta gelişimi de eksik ve yetersiz kalmaktadır. Plasenta oluşumu sırasında yaşanan spiral arter yeniden modellemesindeki bozukluklar dokunun oksijenden yoksun kalmasına neden olur ve hipoksi oluşumunu tetikler. Oksidatif stres ile de antianjiyogenik faktörlerin maternal salınımı gerçekleşir. Anjiyogenik ve antianjiyogenik faktörler arasındaki dengesizlik anjiyogenez ve plasental vaskülarite de aksamalar yaşanmasına sebep olur. Mezenkimal kök hücreler (MKH) kendi kendini yenileyebilen ve özel hücre hatlarına farklılaşabilme potansiyeline sahip hücrelerdir. MKH'lerin, plasentasyon sırasında maternal-fetal arayüzün proanjiyogenik, immünomodülatör ve antienflamatuar ortamının düzenlenmesinde rol oynadığı düşünülmektedir. Plasentanın farklı kısımlarından izole edilen MKH araştırmaları bulunmaktadır. Plasentanın vasküler bir organ olması bu dokudan izole edilen MKH'lerde daha baskın bir anjiyogenik profil olabileceğini düşündürmektedir. Erişilebilirlik ve yüksek farklılaşma potansiyeli, tıbbi uygulamalar için umut verici bir kaynak olarak kandan türetilen kök hücreler de bir alternatif olmuştur. Periferal kan kökenli MKH'lere ait çalışmalar bulunmaktadır ancak izolasyon sonrasında MKH miktarının yetersiz olması bir kısıtlayıcı faktör olarak çalışmalara yansımaktadır. Bu tez, PE ve sağlıklı gebelere ait desidua ve periferal kan kökenli MKH'lerin mRNA anlatım analizini kapsamakta ve olası biyobelirteçlerin araştırılması için bir ön çalışma niteliği taşımaktadır. Tez kapsamında yedi preeklapmsi gebeye ve yedi kontrol grubunu oluşturan sağlıklı gebeye ait plasenta dokusu ve periferal kandan toplam 28 örnekten MKH'lerin izolasyonu yapılarak gen anlatım analizi çalışılmıştır. MKH'lerin izolasyonu ve kültürü, hücre yoğunluğu istenilen şekilde arttırıldıktan sonra uygun hücre yüzey belirteçleri aracılığı ile akım sitometrisi yöntemi kullanılarak hücre ayrımı (“cell sorting”) yapılmıştır. MKH'lerden total RNA izolasyonu yapılmış ve cDNA'ya çevrilmiştir. Gen anlatım analizi için“Vasküler Endotelyal Büyüme Faktörü A”(VEGF(A)),“Metallopeptidaz İnhibitör 1”(TIMP-1),“Efrin A3”(EFNA3),“Trombospondin Tip 1 7A”(THSD7A) ve normalizasyon için“Gliseraldehit-3-fosfat dehidrojenaz”(GAPDH) kullanıldı. Gen anlatım analizi damlacıklı dijital polimeraz zincir reaksiyonu (ddPZR) yöntemi ile gerçekleştirildi. Verilerin istatistiksel sonuçları için“Graphpad Prism Version 8.3.0”programı kullanıldı. Sonuçların anlamlılık olarak değerlendirilmesi parametrik olmayan“Mann Whitney Test”ile yapıldı. Özgüllük ve duyarlılık için“Reciever Operating Characteristic”(ROC) analizi yapıldı. Analizlerin sonucunda, TIMP-1, EFNA3 ve THSD7A hem desidua hemde periferal kan MKH'lerinde mRNA anlatım seviyesinde kat değişimleri olmasına rağmen istatistiksel olarak anlamlı değerlendirilmemişlerdir. VEGF(A) desiuda MKH'lerinde mRNA anlatım seviyesinde kat değişimi olmasına rağmen istatistiksel olarak p

Özet (Çeviri)

Hypertensive pregnancy disorders affect 10% of pregnancies worldwide. It is an important cause of maternal, perinatal morbidity and mortality. Preeclampsia (PE), which is a hypertensive pregnancy disease, is a condition where systolic blood pressure is 140 mmHg or above, and diastolic blood pressure is 90 mmHg or above as a result of repeated measurements made after the 20th week of pregnancy. In addition to hypertension, proteinuria and maternal organ dysfunction can also be seen. Placental development is incomplete and insufficient as well as implantation in pregnant women with preeclampsia. Disturbances in spiral artery remodeling experienced during placenta formation cause tissue to be deprived of oxygen and trigger hypoxia. Maternal release of anti-angiogenic factors occurs with oxidative stress. Imbalance between angiogenic and anti-angiogenic factors causes disruptions in angiogenesis and placental vascularity. Mesenchymal stem cells (MSCs) are self-renewable cells with the potential to differentiate into special cell lines. MSCs are thought to play a role in regulating the proangiogenic, immunomodulatory and anti-inflammatory environment of the maternal-fetal interface during placentation. Placenta is widely studied as a source of MSC. There are MSC studies isolated from different parts of the placenta. The fact that the placenta is a vascular organ suggests that there may be a more dominant angiogenic profile in MSCs isolated from this tissue. Accessibility and high potential for differentiation have also been an alternative to blood-derived stem cells as a promising resource for medical applications. There are studies of MSCs derived from peripheral blood, but insufficient amount of MSC after isolation is reflected in studies as a limiting factor. This thesis covers the mRNA expression analysis of decidua and peripheral blood-derived MSCs from PE and healthy pregnant women and is a preliminary study to investigate possible biomarkers.Within the scope of the thesis, gene expression analysis was studied by isolating MSCs from a total of 28 samples from placental tissue and peripheral blood belonging to seven pregnant women with preeclapsia and seven healthy pregnant women. After isolation and culture of MSCs, cell sorting was performed by using flow cytometry method by means of appropriate cell surface markers after increasing cell density as desired. Total RNA was isolated from MSCs and translated into cDNA. For gene expression analysis,“Vascular Endothelial Growth Factor A”(VEGF (A)),“Metallopeptidase Inhibitor 1”(TIMP-1),“Ephrin A3”(EFNA3),“Thrombospondin Type 1 7A”(THSD7A) and for normalization Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) was used. Gene expression analysis was performed by droplet digital polymerase chain reaction (ddPZR) method.“Graphpad Prism Version 8.3.0”program was used for the statistical results of the data. The significance of the results was evaluated using the nonparametric“Mann Whitney Test”.“Reciever Operating Characteristic”(ROC) analysis was performed for specificity and sensitivity. As a result of the analyzes, TIMP-1, EFNA3 and THSD7A were not evaluated statistically significant although there were fold changes in the level of mRNA expression in both decidua and peripheral blood MSCs. Although there was a fold change in the mRNA expression level in VEGF (A) decidua MSCs, it was not considered statistically significant because it did not meet the condition of p

Benzer Tezler

  1. Tez No

    141779

    Riskli gebeliklerin belirlenmesinde 2. trimester uterin arter doppler ultrasonografi ve insülin benzeri büyüme faktörü-1 ( IGF-1, somatomedin-C) seviyelerinin ölçümü ve gebelik sonucu ile ilişkisi

    Perfoming 2nd trimester uterine artery doppler ultrasound and measuring insulin like growth factor 1(IGF-1, somatomedin-C) levels in order to determine high risk pregnancies and in order to define their relation with the outcome of pregnancy

    AYTUN AKTAN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2004

    Kadın Hastalıkları ve DoğumAnkara Üniversitesi

    Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. LÜGEN CENGİZ

  2. Tez No

    388707

    Erken ve geç başlangıçlı preeklampside fetal ve maternal sonuçların karşılaştırılması

    Comparision of fetal and maternal outcomes in early onset and late onset preeclampsia

    ÖZLEM ALDEMİR BUKAĞIKIRAN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    Kadın Hastalıkları ve DoğumMarmara Üniversitesi

    Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MEHMET VURAL

  3. Tez No

    326533

    24-28. gebelik haftalarında doppler akım değişiklişkleri ile maternal kanda fetal DNA değerleri arasındaki ilşki

    Doppler velocimetry between 24-28 gestational weeks and its association between fetal dna in maternal blood

    İÇTEN KIVANÇLI

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    Kadın Hastalıkları ve DoğumAnkara Üniversitesi

    Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ACAR KOÇ

  4. Tez No

    243382

    Preeklampsili olguların term plasentalarındaki demir birikimlerinin histolojik ve immünohistokimyasal olarak incelenmesi

    Examination of iron accumulations in the term placentas of pre-eclamptic events by histologicaly and immunohistochemicaly

    YASEMİN NASIR

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2009

    Histoloji ve EmbriyolojiDicle Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. YUSUF NERGİZ

  5. Tez No

    817992

    Preeklampsi hastalarında, desidual mezenkimal stromal hücrelerde farklı şekilde anlatılan mRNA'ların validasyonu

    Validation of differentially expressed mRNAs in decidual mesenchymal stromal cells on preeclampsia patients

    MÜRÜVVET AKBUDAK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Biyolojiİstanbul Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. TUBA GÜNEL

Geri Dön