Mlh1 geni susturulmuş kolon kanseri hücrelerinde 5-florourasil tedavisinin hücre sinyal yolakları ve apoptoz üzerinde etkilerinin incelenmesi
Investigation of the effect of 5-fluorouracil treatment on cell signaling pathways and apoptosis in mlh1 gene- silencing colon cancer cells
- Tez No: 1023851
- Danışmanlar: PROF. DR. ADEM KARA
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyoloji, Genetik, Biology, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Antikanser, Moleküler biyoloji, Moleküler genetik, Anticancer, Molecular biology, Molecular genetic
- Yıl: 2026
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Erzurum Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Kolon kanseri, dünya genelinde kanserle ilişkili ölüm oranlarının önde gelen nedenlerinden biridir. DNA uyumsuzluk onarım sisteminin temel bileşenlerinden biri olan MLH1 genindeki kayıp veya baskılanma, mikrosatellit instabilitesi ile ilişkilidir. Bu durum, tümör biyolojisini ve tedavi yanıtını önemli ölçüde etkileyebilir. Bu çalışmanın amacı, MLH1 susturulmasının kolon kanser hücrelerinde hücresel sinyal yolakları, apoptoz mekanizmaları ve 5-Florourasil duyarlılığı üzerindeki etkilerini moleküler düzeyde incelemektir. Çalışmada MLH1 geninin ifadesi siRNA yöntemi ile baskılanmış ve hücresel yanıtlar değerlendirilmiştir. Elde edilen bulgular, MLH1 kaybının PI3K/AKT ve MAPK sinyal yolaklarında anlamlı değişikliklere yol açtığını göstermiştir. Özellikle fosforile AKT (p-AKT) düzeylerindeki değişim, bu düzenlemenin total protein miktarından ziyade yolak aktivasyonu düzeyinde gerçekleştiğini ortaya koymuştur. Ayrıca MLH1 baskılanmasının MDR1 ekspresyonunu azaltarak hücre içi ilaç birikimini artırdığı belirlenmiştir. Apoptoz belirteçleri incelendiğinde, MLH1 susturulması ile birlikte p53 ve kaspaz-3 düzeylerinde artış, anti-apoptotik Bcl-2 düzeyinde ise azalma saptanmıştır. Bununla birlikte, CDK2, CDK4 ve CDK6 ekspresyonundaki azalma hücre döngüsü duraklamasını desteklemiştir. Tüm bu moleküler değişiklikler sonucunda hücre canlılığında azalma ve 5-Florourasil'e karşı artmış kemoduyarlılık gözlenmiştir. Sonuç olarak, MLH1 eksikliğinin kolon kanser hücrelerinde proliferasyon ve sinyal yolaklarını baskıladığı, apoptozu artırdığı ve 5-Florourasil tedavisine duyarlılığı güçlendirdiği gösterilmiştir. Bu bulgular, MLH1'in yalnızca bir DNA tamir proteini olmadığını, aynı zamanda onkojenik sinyal ağlarının düzenlenmesinde ve tedavi yanıtının belirlenmesinde önemli bir rol oynayabileceğini düşündürmektedir.
Özet (Çeviri)
Colon cancer is one of the leading causes of cancer-related mortality worldwide. Loss or suppression of the MLH1 gene, a key component of the DNA mismatch repair system, is associated with microsatellite instability. This situation may significantly influence tumor biology and therapeutic response. The aim of this study was to investigate the molecular effects of MLH1 gene silencing on cellular signaling pathways, apoptotic mechanisms, and sensitivity to 5-Fluorouracil in colon cancer cells. In this study, MLH1 expression was suppressed using siRNA, and subsequent cellular responses were analyzed. Our findings demonstrated that MLH1 loss led to significant alterations in the PI3K/AKT and MAPK signaling pathways. Notably, changes in phosphorylated AKT (p-AKT) levels indicated that this regulation occurred primarily at the level of pathway activation rather than total protein expression. Furthermore, MLH1 suppression reduced MDR1 expression, thereby increasing intracellular drug accumulation. Analysis of apoptotic markers revealed increased expression of p53 and caspase-3, along with decreased levels of the anti-apoptotic protein Bcl-2, following MLH1 silencing. In addition, reduced expression of CDK2, CDK4, and CDK6 supported the induction of cell cycle arrest. Collectively, these molecular alterations were associated with decreased cell viability and enhanced chemosensitivity to 5-Fluorouracil. In conclusion, MLH1 loss suppresses proliferation and signaling pathways while promoting apoptosis and increasing sensitivity to 5-Fluorouracil in colon cancer cells. These findings suggest that MLH1 functions not only as a DNA repair protein but also as a critical regulator of oncogenic signaling networks and therapeutic response.
Benzer Tezler
- Modification of catalytic subunit of dna polymerase gamma by CRISPR/CAS9 genome editing technology
Dna polimeraz gama katalitik alt ünitesi gen bölgesinin CRISPR/CAS9 genom düzenleme teknolojisi ile modifikasyonu
AYŞEGÜL EKMEKÇİOĞLU
Yüksek Lisans
İngilizce
2018
GenetikAcıbadem Mehmet Ali Aydınlar ÜniversitesiPROF. DR. MELTEM MÜFTÜOĞLU
DR. ÖĞR. ÜYESİ EMRE DENİZ
- Testis biyopsisinde matürasyon arresti saptanan olgularda MLH1 varyantlarının araştırılması
The investigation of MLH1 variants in cases with maturation arrest in their testicular biopsy
YASEMİN ÜLGER
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2022
ÜrolojiAnkara ÜniversitesiTıbbi Genetik Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ TİMUR TUNCALI
- Kolon kanserli hastalarda tümörün immünohistokimyasal olarak CDX2, MLH1, MSH2, MSH6, PMS2 PMS2 boyanma paterninin ve morfolojik özelliklerinin sağkalım ile ilişkisinin belirlenmesi
Başlık çevirisi yok
BAHAR SARI
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2017
PatolojiSağlık Bilimleri ÜniversitesiTıbbi Patoloji Ana Bilim Dalı
UZMAN ÇAĞLAR ÇAKIR
- Nf1 mutation analysis in a patient homozygous for a truncating hmlh1 mutation
Mlh1 mutasyonu için homozigot olan bir çocukta nf1 mutasyon analizi
HANİ ALOTAİBİ
Yüksek Lisans
İngilizce
1999
Genetikİhsan Doğramacı Bilkent ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. MARİE RİCCİARDONE
- Development and investigation of etoposide resistance in MCF-7 breast cancer cell line
MCF-7 meme kanseri hücre hattında etoposit direncinin geliştirilmesi ve incelenmesi
ESRA KAPLAN