Spermatogenik tutulum gösteren infertil erkeklerde dna çift zincir kırık tamir mekanizmalarının araştırılması
Investigation of dna double-strand break repair mechanisms in infertile men with spermatogenic arrest
- Tez No: 1023893
- Danışmanlar: PROF. DR. SAFFET ÖZTÜRK
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
- Anahtar Kelimeler: erkek infertilitesi, spermatogenik tutulum, DNA çift zincir kırığı, DNA çift zincir kırık tamiri, male infertility, spermatogenic arrest, DNA double-strand break, DNA double-strand break repair
- Yıl: 2026
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Akdeniz Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Amaç: Bu çalışmada, DNA çift zincir kırığı (DSB) düzeyi yüksek olan, hipospermatogenez, yuvarlak spermatit tutulum ve primer spermatosit tutulum gösteren hastalarda DSB tamirinde görev alan genlerin mRNA ve protein düzeyindeki ekspresyonel değişimlerinin belirlenmesi amaçlandı. Yöntem: Hipospermatogenez (n=12), yuvarlak spermatit tutulum (n=9) ve primer spermatosit tutulum (n=12) gösteren hastalardan elde edilen TESE örnekleri incelendi. Hematoksilen-eozin boyaması ile histopatolojik analiz ve hücre sayımı yapıldı. γH2AX immünohistokimya boyaması ile DSB seviyeleri (γH2AX immün boyaması ile), TUNEL yöntemi ile apopitoz düzeyleri değerlendirildi. NBS1, RAD51, RPA70, BRCA1, BRCA2, DMC1, KU70 ve KU80 genlerinin mRNA ekspresyon düzeyleri qRT-PCR ile, ilgili proteinlerin ekspresyon düzeyleri ise immünohistokimyasal boyamalarla analiz edildi. Veriler tek yönlü ANOVA ve Tukey post-hoc testiyle değerlendirildi. Bulgular: γH2AX düzeynin, primer spermatosit ve yuvarlak spermatit tutulum gösteren gruplarda hipospermatogenez grubuna göre anlamlı derecede yüksek olduğu belirlendi (P<0.05). Hipospermatogenez grubu ile kıyaslandığında, primer spermatosit ve yuvarlak spermatit tutulum gruplarında NBS1, KU70, KU80, RAD51, BRCA1, BRCA2, DMC1 ve RPA70 protein ekspresyon düzeylerinde anlamlı bir azalma tespit edildi (P<0.05). mRNA düzeyinde ise NBS1, RAD51, BRCA1, KU70 ve DMC1 ekspresyonları anlamlı olarak azalırken (P<0.05); RPA70, KU80 ve BRCA2 ekspresyonlarındaki azalma anlamlı bulunmadı (P>0.05). Apopitotik hücre düzeylerinin de yuvarlak spermatit tutulum ve primer spermatosit tutulum gruplarında anlamlı derecede arttığı görüldü (P<0.05). Sonuç: Primer spermatosit ve yuvarlak spermatit tutulum gösteren hastalarda artmış DSB ve apopitoz düzeyleri ile DSB tamirinde görevli protein ekspresyonlarındaki belirgin azalma, DNA hasar onarım mekanizmalarının bozulduğunu göstermektedir. DSB onarım sürecindeki bu değişimlerin, spermatogenez sürecini durdurarak erkek infertilitesinin gelişiminde moleküler düzeyde rol oynadığını düşündürmektedir.
Özet (Çeviri)
Objective: This study investigate DNA double-strand break (DSB) mechanisms in patients with high DSB levels sho *İngilizce özet wing primary spermatocyte and round spermatid arrest, and determine the expressional changes of genes and proteins involved in DSB repair. Methods: TESE samples obtained from patients with hypospermatogenesis (n=12), round spermatid arrest (n=9) and primary spermatocyte arrest (n=12) were examined. Histopathological analysis and cell counting were performed using hematoxylin-eosin staining. DSB levels were evaluated by γH2AX immunohistochemistry, and apoptosis was assessed using the TUNEL method. The NBS1, RAD51, RPA70, BRCA1, BRCA2, DMC1, KU70, and KU80 mRNA levels were analyzed by qRT-PCR, while the expression levels of the corresponding proteins were evaluated immunohistochemically. Data were analyzed using one-way ANOVA and Tukey's post-hoc test. Results: γH2AX levels were significantly higher in the primary spermatocyte arrest and round spermatid arrest groups compared with the hypospermatogenesis group (P<0.05). Compared with the hypospermatogenesis group, the protein expression levels of NBS1, KU70, KU80, RAD51, BRCA1, BRCA2, DMC1, and RPA70 were significantly reduced in the primary spermatocyte and round spermatid arrest groups (P<0.05). At the mRNA level, NBS1, RAD51, BRCA1, KU70 and DMC1 expression levels were significantly reduced (P<0.05), whereas changes in RPA70, KU80 and BRCA2 expression levels were not statistically significant (P>0.05). Apoptotic cell levels were also found to be significantly increased in the round spermatid arrest and primary spermatocyte arrest groups (P<0.05). Conclusion: The increased levels of DSBs and apoptosis, together with the marked reduction in the expression of proteins involved in DSB repair, observed in patients with primary spermatocyte and round spermatid arrest indicate impairment of DNA damage repair mechanisms. These alterations in the DSB repair pathway may contribute to the molecular pathogenesis of male infertility by disrupting spermatogenesis and leading to germ cell developmental arrest.
Benzer Tezler
- Homolog antijenler ve komplet freund adjuvantinin etkisi altında geliştirilmiş allerjik orşit
Başlık çevirisi yok
GÜLŞEN GÜÇKAN
- Dışarıdan verilen estrogeninin sıçan testis morfolojisi üzerine etkisi
Başlık çevirisi yok
ENGİN YENİLMEZ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1989
Morfolojiİstanbul ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TÜRKAN ERBENGİ
- 54 erkek hypogonadizm vakasının klinik ve laboratuar incelenmesi
Başlık çevirisi yok
İSMAİL HALİL
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1989
Endokrinoloji ve Metabolizma Hastalıklarıİstanbul Üniversitesiİç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. H. HÜSREV HATEMİ
- Varikosel öncesi ve sonrası testis ince yapısı
Başlık çevirisi yok
HÜLYA ÖZGÜR
Doktora
Türkçe
1990
ÜrolojiÇukurova ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET KAYA