Geri Dön

Procion brown MX5-BR and procion green H-4G bağlı pHEMA sorbentlerinin lizozim enziminin saflaştırılmasında kullanımı ve saflık derecesinin YBSK'da tayini

The Use of procion brown MX5-BR and procion green H-4G immobilized pHEMA sorbents in the purification of the lysozyme enzyme and determination of purity degree of the lysozyme by HPLC

PDF İndir

  1. Tez No: 136272
  2. Yazar: MELTEM YILMAZ
  3. Danışmanlar: PROF.DR. YAKUP ARICA
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Dye-ligand, Egg white, pHEMA, Membrane, Lysozyme
  7. Yıl: 2003
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Kırıkkale Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 101

Özet

Bu çalışmada, yumurta beyazından doğrudan lizozim enziminin saflaştırılması için, yeni bir boya ligand afinite kromatografisi yöntemi geliştirildi. Destek materyali olarak, pHEMA membranlan kullanıldı. pHEMA destek materyali, y 2-hidroksietilmetakrilat (HEMA) monomerinden, a-a -azoizobütironitril (AIBN) başlatıcısı varlığında, azot ortamında, UV ışığmda fotopolimerizasyon yöntemi ile hazırlandı. Boya ligand olarak, reaktif triazin grubu bir boya olan Procion Brown MX-5BR (Reactive Brown 10) ve Procion Green H-4G (Reactive Green 5) reaktif boyaları, alkali ortamda nükleofilik yer değiştirme reaksiyonuyla, pHEMA üzerine kovalent olarak bağlandı ve afinite sorbent olarak, lizozim enziminin saflaştırılmasında kullamldı. Kesikli sistemde bu afinite adsorbentleri üzerine farklı pH'larda farkb miktarda lizozim içeren sulu ortamdan lizozim adsorpsiyonudavranışı incelendi. Lizozimin afinite adsorbentlerine adsorpsiyonu için optimal pH değeri, 4,0-8,5 değerleri arasında araştırıldı. Sıcaklık ve iyonik şiddetin, adsorbentlerin, adsorpsiyon kapasiteleri üzerindeki etkisi belirlendi. Reactive Brown 10 ve Reactive Green 5 bağlı pHEMA membranlarının lizozimi adsorpsiyon kapasitesi, sırasıyla 60,56 ve 80,21 mg/ml olarak belirlendi. pHEMA membranınuı lizozim adsorpsiyon kapasitesi 1,87 mg/ml olarak bulundu. Reactive Brown 10 ve Reactive Green 5 boya ligandı immobilize edilmiş pHEMA membranlarının lizozim adsorpsiyonunun, pHEMA membranlarından, sırasıyla, yaklaşık 32,4 ve 42,9 kat fazla olduğu görüldü. Lizozim adsorpsiyonu için optimum pH değerinin 7,0 olduğu gözlendi. Yumurta beyazından doğrudan lizozim enziminin saflaştırılması sonuçları YBSK ile tayin edildi. Procion Brown 10 ve Reactive Green 5 ligandı bağlı membranlann, lizozim enziminin yumurta akından saflaştırılmasında kullanılmasından sonra, lizozim erızirninin 0,5 M NaCl ile elüsyonları yapıldı. Lizozimin yumurta akından saflaştırma oranı, Reactive Brown 10 bağlı sorbentler için %63,4 ve Reactive Green 5 bağlı sorbentler için %77,2 olarak bulundu. Anahtar Kelimeler : Boya-ligand, Yumurta beyazı, pHEMA, Membran, Lizozim

Özet (Çeviri)

In this study, for direct purification of lysozyme enzyme from egg white, a new dye ligand affinity chromatography method was developed. pHEMA membranes were used as support material. It was prepared from 2-hydroxyethyl methacrylate (HEMA) via UV initiated photo-polymerization, in the presence of an initiator a-a'-azoisobutyronitrile (AIBN) in the nitrogen atmosphere. Procion Brown MX-5BR (Reactive Brown 10) and Procion Green H-4G (Reactive Green 5) which are reactive triazine dyes, were covalently attached onto pHEMA membrane by nucleophilic substitution reaction in the base medium and were used in the purification of lysozyme enzyme as affinity sorbents. Behaviour of lysozyme adsorption onto these affinity adsorbents, from aqueous solutions containing mdifferent amounts of lysozyme at different pH, was investigated in a batch system. The optimal pH values for adsorption of lysozyme on the affinity adsorbents, were investigated in the pH range of 4,0-8,5. The effects of temperature and ionic strength, on the adsorption capacities of the adsorbents, were determined. The lysozme adsorpsion capacities of the Reactive Brown 10 and Reactive Green 5 immobilized pHEMA membranes, were found as 60,56 and 80,21 mg/ml, respectively. The adsorpstion of the lysozyme on the plain pHEMA membrane, was found as 1,87 mg/ml. Lysozyme adsorptions of Reactive Brown 10 and Reactive Green 5 dye ligands immobilized pHEMA membranes, were greater than the lysozyme adsorption of plain pHEMA membranes about 32,4 and 42,9 times, respectively. The optimum pH value of the lysozyme adsorption, was observed as pH 7,0. The results of direct lysozyme enzyme purification from egg white were determined by HPLC. After usage of Reactive Brown 10 and Reactive Green 5 immobilized membranes in the purification of the lysozyme enzyme from the egg white, lysozyme enzyme was eluted by 0,5 M NaCl solution. The removal ratios for the Reactive Brown 10 and Reactive Green 5 immobilized sorbents, were 63,4% and 77,2%, respectively.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    127423

    Metal-şelat kromatografide kullanılmak üzere pHEMA/KİTOSAN afinite sorbentlerinin hazırlanması ve lizozim adsorpsiyonuna uygulanması

    The Application of pHEMA/CHITOSAN affinity sorbents to lysozyme adsorption for use in metal chelate chromatography

    BÜLENT KAYA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2002

    BiyolojiKırıkkale Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. M. YAKUP ARICA

    YRD. DOÇ. DR. GÜLAY BAYRAMOĞLU

  2. Tez No

    154929

    Procion yellow bağlı pHEMA/Kitosan membranlarının hazırlanması ve lizozim adsorpsiyonunda kullanılması

    Procion yellow immobilized membrane composed of pHEMA/Chitosan: preparation and it application to adsorption of lysozyme

    MERİH ŞİMŞEK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2004

    BiyolojiKırıkkale Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. GÜLAY BAYRAMOĞLU

    PROF.DR. YAKUP ARICA

  3. Tez No

    761892

    Procion blue H-EXL boyar maddesinin ileri oksidasyon prosesleri ile ön arıtımı sonrası mikroalgler ile arıtımının araştırılması

    Investigation of pretreatment of procion blue H-EXL dye byadvanced oxidation process and treatmen by mi̇croalgae after pretreatment

    BETÜL ÜNLÜ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Çevre MühendisliğiBursa Uludağ Üniversitesi

    Çevre Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AYŞE ELMACI

    DR. ÜLKER DİLER KERİŞ ŞEN

  4. Tez No

    515769

    Procion yellow H-EXL tekstil boyar maddesinin sulu çözeltilerden demir elektrotlar kullanılarak elektrokoagülasyon ile giderilmesi

    Removal of Procion yellow H-EXL textile dye from aqueous solutions by electrocoagulation using iron electrodes

    SEDA SABUNCU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Kimya MühendisliğiMersin Üniversitesi

    Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. BAHADIR KÜRŞAD KÖRBAHTİ

  5. Tez No

    441834

    Procion Deep Red boyar maddesinin mısır koçanına tutuklanmıç Saccharomyces cerevisiae kullanılarak sulu ortamdan gideriminde kapasite artırım çalışması

    The study of capacity increase for the removal of Procion Deep Red dye from aqueous solution using Saccharomyces cerevisiae immobilized on the corncob

    GİZEM COŞKUN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    BiyokimyaGazi Üniversitesi

    Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. AYŞE TOSUN

Geri Dön