Bazı bacillus izolatlarında L-asparajinaz aktivitesinin incelenmesi, enzimin kısmi saflaştırılması ve karakterizasyonu
Evaluation of the L-asparaginase activity in some isolates of bacillus, partial purification and characterization of enzyme
- Tez No: 252635
- Danışmanlar: PROF. DR. RENGİN ELTEM
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyomühendislik, Mikrobiyoloji, Biyoteknoloji, Bioengineering, Microbiology, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Bacillus, Biyolojik üretim, Biyoproses teknikleri, Biyoteknoloji, Biyoteknolojik prosesler, Enzim aktivitesi, Enzim saflaştırması, Enzim üretimi, Enzimler, Bacillus, Biological production, Bioprocess techniques, Biotechnology, Biotechnological process, Enzyme activity, Enzyme purification, Enzyme production, Enzymes
- Yıl: 2009
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Çalışmamızda çeşitli kaynaklardan yapılan izolasyon çalışmaları sonunda oluşturulan ?Biyomühendislik Bölümü Kültür Koleksiyonunda? yer alan 250 adet mezofilik Bacillus izolatında, 60 adet endospor içeren termofilik bakteri izolatında ve B.licheniformis NRRL-1001, B.circulans NRRL B-381, B.circulans NRRL B-378, Geobacillus stearothermophilus NRRL-1102 türlerinde L-Asparajinaz EC-3.5.1.1 enzimi taranması katı besiyerinde renk değişimi temelli olarak yapılmıştır. Daha sonra, substrat olarak L-Asparajin içeren sıvı kültür ortamında 300C'de 48 saat inkübasyonun ardından aktivite tayini 370C'de gerçekleştirilmiştir. Buna göre, petri plağında taranan 253 adet mezofilik suş ve izolatın % 41'inde L-Asparajinaz aktivitesi belirlenmiş, 61 adet termofilik suş ve izolatın hiçbirisinde L-Asparajinaz aktivitesi saptanamamıştır. Bu veriler ışığında suşlardan en yüksek aktivite veren mezofilik Bacillus Ege. B.1.d.6 izolatından ölçek büyütülerek derin kültür fermentasyon yöntemiyle üretilen L-Asparajinazın; santrifügasyon, amonyum sülfat ile çöktürme, diyaliz, ultrafiltrasyon, jel filtrasyon kromatografi yöntemleri ile kısmi saflaştırması yapılmış ve her adımda enzim aktivitesi, total aktivite, protein miktarı, spesifik aktivite ve verim hesaplanmıştır. Moleküler ağırlığı SDS-PAGE ile gösterilmiştir. Ardından, L-Asparajinaz enziminin farklı inkübasyon sürelerindeki stabilite değişimi ile farklı pH ve sıcaklık aralıklarındaki aktivitesi ölçülerek kısmi karakterizasyonu yapılmıştır.
Özet (Çeviri)
In our study, in 250 mesophilic and 60 endospor containing thermophilic isolates contained by the“Bio-engineering Program Culture Collection”and in B.licheniformis NRRL-1001, B.circulans NRRL B-381, B.circulans NRRL B-378, Geobacillus stearothermophilus NRRL-1102 type cultures, L-Asparaginase enzyme EC-3.5.1.1 was scanned in solid growth environment on the basis of color change. Later, in the liquid culture environment containing L-Asparagin as substrate, after 48 hours of incubation at 30ºC, activity was determined at 37ºC. Accordingly, 41% of the 253 mesophilic strains and isolates scanned in the petri plate were found to have L-Asparaginase activity. None of the 61 thermophilic strains and isolates showed an L-Asparaginase activity. On the basis of these data, L-Asparaginase, produced by deep culture fermentation method by means of scale growing from mesophilic Bacillus Ege. B.1.d.6 isolate which is the highest activity strain, was partially purified using centrifugation, ammonium sulfate settlement, dialysis, ultrafiltration, gel filtration chromatography and at each step, enzyme activity, total activity, protein content, specific activity and yield were calculated. The molecular weight was shown using SDS-PAGE. Later, with the stability change of the L-Asparaginase enzyme at different incubation times, its activity at different pH and temperature ranges was measured for a partial characterization.
Benzer Tezler
- Bazı esterlerin kinetik incelenmesi ve termodinamik parametrelerin belirlenmesi
Kinetic study and detesmination of thermodnamic parameters of some esters
İBRAHİM TAŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
1986
Kimya MühendisliğiUludağ ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MUSTAFA CEBE
- İzmir'de bazı yolların kapatılarak yaya bölgeleri oluşturma da kent peyzajını geliştirme açısından yeniden planlanması üzerinde araştırmalar
Başlık çevirisi yok
BAHAR TÜRKYILMAZ
Yüksek Lisans
Türkçe
1985
Şehircilik ve Bölge PlanlamaEge ÜniversitesiŞehir ve Bölge Planlama Ana Bilim Dalı
- Bazı sert çekirdekli meyve türlerinde döllenme biyolojisi üzerinde yöntem çalışmaları
Başlık çevirisi yok
ATBİMOĞLU ADALET
- Ağızlık açma mekanizmalarının tasarımı
Başlık çevirisi yok
RECEP EREN
Yüksek Lisans
Türkçe
1987
Tekstil ve Tekstil MühendisliğiUludağ ÜniversitesiTekstil Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HALİL R. ALPAY
- Bazı yer ve sırık fasulye çeşitlerinde optimal melezleme şartlarının tespiti üzerine bir araştırma
Başlık çevirisi yok
TÜRKAN KOÇLU
- Adolesan intihar girişimlerinin psiko-sosyal nedenleriyle ilgili araştırma
Başlık çevirisi yok
NAZMİYE YÜKSEL