Monoklonal antibadi saflaştırılması için eşboyutlu manyetik partiküllerin hazırlanması
Preparation of monosize magnetic particles for monoclonal antibody purification
- Tez No: 284690
- Danışmanlar: PROF. DR. ADİL DENİZLİ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2010
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 134
Özet
Sunulan tez çalışmasında insan plazmasından etkin bir şekilde immunoglobulin G saflaştırılması amacıyla yeni bir yaklaşım geliştirilmiştir. Pseudospesifik ligand N-metakroil-L-histidin metil ester (MAH), metakroil klorür ve histidin kullanılarak sentezlenmiştir. Polimerik yapıya manyetik özellik kazandırmak için Fe3O4 kullanılmış ve manyetik poli(EGDMA-MAH) partiküller dispersiyon polimerizasyonu ile (5 µm çapında) elde edilmiştir. Manyetik poli(EGDMA-MAH) partiküller, monomer faz olan EGDMA ve MAH yanında ortama farklı oranlarda manyetit (Fe3O4) eklenerek sentezlenmiştir. Manyetik ve manyetik olmayan poli(EGDMA-MAH) partiküller Fourier Transform İnfrared spektroskopisi (FTIR), taramalı elektron mikroskobu (SEM), elementel analiz, elektron spin rezonans (ESR), titreşimli örnek manyetometresi (VSM), temas açısı ölçümleri ve şişme deneyleri ile karakterize edilmiştir. Manyetik poli(EGDMA-MAH) partiküller için g faktörü 2.3 olarak bulunmuştur. Şişme oranı %65.0 olan ve 55.3 µmol MAH/g oranında MAH içeren manyetik poli(EGDMA-MAH) partiküller, hem kesikli hem de manyetik olarak akışkanlaştırılmış yatak sisteminde (MSFB) sulu çözeltilerden ve insan plazmasından IgG adsorpsiyon çalışmalarında kullanılmıştır. IgG adsorpsiyonunun kullanılan tampon sistemine bağlı olduğu gözlenmiştir. Maksimum adsorpsiyon pH 7.4'de gözlenmiştir. MSFB deneylerinde de sulu çözeltilerde aynı tamponlar kullanılarak çalışmalar gerçekleştirilmiştir. Maksimum adsorpsiyon kapasitesi 34.6 mg/g`dır. Kesikli ve MSFB sisteminde, insan plazmasından çok daha yüksek oranlarda IgG adsorpsiyonu gözlenmiştir (34.6 mg/g ve 1679.7 mg/g). Geliştirilen bu afinite partikülleri insan plazmasından IgG'nin tek adımda ayrılmasını sağlamıştır. Adsorpsiyon kapasitesinde önemli bir azalma olmaksızın manyetik partiküllerin tekrar tekrar kullanılabileceği gözlenmiştir.
Özet (Çeviri)
In the present thesis, a novel and new approach was developed to obtain an efficient separation of IgG from human plasma. N-methacryloyl-L-histidine methyl ester (MAH) was chosen as a ligand and synthesized by using methacryloylchloride and histidine. Spherical particles with an average size of 5 µm were obtained by the radical dispersion polymerization of MAH and EGDMA conducted in an aqueous dispersion medium in the presence of Fe3O4. Magnetic poly(EGDMA-MAH) particles were synthesized by addition of magnetite particles, Fe3O4, into monomer phase consisting of monomers, EGDMA and MAH. Magnetic and nonmagnetic poly(EGDMA-MAH) particles were characterized by Fourier transform infrared (FTIR), scanning electron microscopy (SEM), elemental analysis, vibrating sample magnetometer (VSM), contact angle measurements and swelling studies. The presence of magnetite particles in the polymeric structure was confirmed by electron spin resonance (ESR). g factor was found as 2.3 for magnetic poly (EGDMA-MAH) structure. These magnetic poly(EGDMA-MAH) particles with a swelling ratio of 65%, and containing 55.3 MAH/g were used in the adsorption/desorption of IgG from aqueous solutions and human plasma in batch and magnetically stabilized fluidized bed system (MSFB). IgG adsorption onto magnetic poly(EGDMA-MAH) particles seemed to depend on the buffer system used Maximum adsorption capacities are observed at pH 7.4 for PBS (34.6 mg/g) in aqueous solutions. Much higher amounts of IgG were adsorbed from human plasma in batch and MSFB systems (up to 34.6 mg/g, and 1679.7 mg/g, respectively). The affinity particles allowed the one-step separation of IgG from human plasma. It was observed that IgG could be repeatedly adsorbed and desorbed with magnetic poly(EGDMA-MAH) particles without significant loss in the adsorption capacity.
Benzer Tezler
- İnsan spermindeki adezyon moleküllerinden beta 1 alfa 6 integrin molekülünün sperm sayı ve morfolojisine göre dağılımının immünohistokimyasal olarak değerlendirilmesi
Expression of adhesion molecules; beta 1 alpha 6 integrins according to concentration and morphology of human spermatozoa
SEVİNÇ EGE
Doktora
Türkçe
2000
MorfolojiGazi ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. DENİZ ERDOĞAN
- Kanser hücrelerinin aptamer ve antibadi taşıyan manyetik nanopartiküller ile hedeflenmesi
Targeting of cancer cells with aptamer and antibody immobilized magnetic nanoparticles
LÜTFİYE TUTKUN
Doktora
Türkçe
2014
BiyomühendislikHacettepe ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TÜLİN KUTSAL
DOÇ. DR. MUSTAFA TÜRK
- İmmünolojik tanı kitlerinin geliştirilmesi
Başlık çevirisi yok
SELMA ÖZTÜRK
Doktora
Türkçe
1997
Tıbbi BiyolojiMarmara ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BEYAZIT ÇIRAKOĞLU
- Monoklonal ELİSA ile dışkıda antijen arama yönteminin amoebiosis tanısındaki değerinin araştırılması
Başlık çevirisi yok
TONAY İNCEBOZ
- Development of chromatographic and electrochemical methods for trastuzumab determination
Trastuzumab tayini için kromatografik ve elektrokimyasal yöntem geliştirilmesi
ESRA ENGİN
Doktora
İngilizce
2019
BiyokimyaEge ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HASAN ERTAŞ
PROF. DR. ERCÜMENT KARASULU