Cu-IDA bağlı manyetik nanoparçacıkların hazırlanması ve benzaldehit liyaz (BAL) enziminin saflaştırılmasında kullanılması
Investigation of benzaldehyde lyase (BAL, EC 4.1.2.38) immobilization and reactions on magnetic nanoparticles
- Tez No: 299995
- Danışmanlar: DOÇ. DR. BİLSEN TURAL
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2011
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Dicle Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 63
Özet
Metal afinite ligand immobilize edilmiş silika kaplı manyetik nanoparçacıklar hazırlanmış ve bu parçacıklar Benzaldehid Liyaz (BAL, EC 4.1.2.38) enziminin immobilizasyonu için kullanılmıştır. Öncelikle manyetik nanoparçacıklar birlikte çökme yöntemi ile bazik ortamda Fe+2 ve Fe+3'ün çöktürülmesiyle sentezlenmiştir. Daha sonra Fe3O4-SiO2 nanoparçacıklar elde etmek için sol-jel metodu kullanılarak Fe3O4 nanoparçacıklarının üzerine silika kaplanmıştır. Fe3O4-SiO2 yüzeyine 3-glycidyloxypropyl trimethoxysilane (GPTMS) ve iminodiacetic acid (IDA) sırasıyla immobilize edilmiş ve ardından BAL adsorpsiyonu için Cu+2 yüklenmiştir. Fe3O4-SiO2 manyetik nanoparçacıkları karakterize etmek için X-Işını Difraksiyonu (XRD), Geçirimli Elektron Mikroskobu (TEM), Taramalı Elektron Mikroskobu (SEM) ve IDA-Fe3O4 parçacıklarının karakterizasyonu için de Fourier dönüşümlü kızılötesi (FT-IR) spektrosskopisi kullanılmıştır. Silika-kaplı manyetik nanoparçacıkların boyutları Scherrer denkleminden 11,8 nm olarak hesaplanmıştır. TEM görüntüsünden parçacıkların ortalama 10-11 nm boyutunda homojen bir dağılımda ve Scherrer denkleminden elde edilen sonuçla uyum içinde olduğu tespit edilmiştir. FT-IR sonuçları manyetik nanoparçacıkların yüzeyine IDA gruplarının başarılı bir şekilde tutturulduğunu göstermiştir.Metal afinite ligand immobilize edilmiş silika kaplı manyetik nanoparçacıklar Benzaldehid Liyaz (BAL, EC 4.1.2.38) enziminin immobilizasyon yoluyla saflaştırılması için kullanılmıştır. Bu yöntemle manyetik nanoparçacıkların E.coli BL21(DE3)pLysS/BALHIS ham özütünden 6XHis kuyruklu BAL'ı seçici olarak yüksek kapasite (40 mg/g) ayırdığı Sodyum dodesil sülfat-poliakrilamid jel elektroforez (SDS-PAGE) ile kanıtlanmıştır. Bu türde yüzeyi fonksiyonlandırılmış manyetik parçacıkların histidin kuyruklu rekombinant proteinlerin saflaştırılması için için kullanılabileceği gösterilmiştir.
Özet (Çeviri)
Superparamagnetic silica-coated magnetite (Fe3O4) nanoparticles with immobilized metal affinity ligands were prepared for benzaldehyde lyase enzyme (BAL, EC 4.1.2.38) immobilization. First, magnetite nanoparticles were synthesized by co-precipitating Fe2+ and Fe3+ in an ammonia solution. Then silica was coated on the Fe3O4 nanoparticles using a sol?gel method to obtain magnetic silica nanoparticles. The condensation product of 3-Glycidoxypropyltrimethoxysilane (GPTMS) and iminodiacetic acid (IDA) was immobilized on them and after charged with Cu2+, the magnetic silica nanoparticles with immobilized Cu2+ were applied for the adsorption of BAL. X-ray diffraction (XRD), transmission electron microscopy (TEM), and Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) methods were used to characterize the epoxy-functionalized Fe3O4@SiO2 core?shell magnetic nanoparticles. XRD (Scherer?s equation) and TEM results indicate that the primary particle size of magnetite was around 11 nm.According to sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) results, these magnetic nanoparticles specifically captures 6XHis tagged BAL from crude extract of E.coli BL21(DE3)pLysS/BALHIS. This study shows that the silica-coated magnetite (Fe3O4) nanoparticles with immobilized metal affinity ligands are eligible for immobilized metal-ion affinity adsorption for histidine tagged recombinant proteins with its high capacity (40 mg/g) and selectivity.
Benzer Tezler
- Demir eksikliği anemisi bulunan çocuklarda tedavi öncesi ve sonrası eritrosit içi GSH-Px, Cu, ZnSOD değerleri
Başlık çevirisi yok
UĞUR SELÇUK GÜNEŞLİ
- Hareketli sulama makinalarında kullanılan sulama elamanlarının su dağılım yeknesaklığı üzerine bir araştırma
Başlık çevirisi yok
HÜSEYİN YÜRDEM
- Selüloz bazlı afinite membranların üretimi ve kullanım potansiyelinin araştırılması
Production of cellulose-based affinity membranes and investigation of their application potentials
BERNA EREN
Yüksek Lisans
Türkçe
2000
Kimya MühendisliğiHacettepe ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MENEMŞE GÜMÜŞDERELİOĞLU
- Discrete location models for content distribution
İçerik dağıtımı için ayrık yer seçimi modelleri
TOLGA BEKTAŞ
Doktora
İngilizce
2005
Endüstri ve Endüstri Mühendisliğiİhsan Doğramacı Bilkent ÜniversitesiEndüstri Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. OSMAN OĞUZ
- Sığır serum albuminin immobilize metal afinite membranları kullanılarak sulu ortamdan adsorpsiyonu
The adsorption of bovine serum albumin by using immobilized metal affinity membranes
SAFİYE DENİZ ALTUNER
Yüksek Lisans
Türkçe
2006
BiyokimyaKırıkkale ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. GÜLAY BAYRAMOĞLU
PROF.DR. YAKUP ARICA