Fibronektin saflaştırılması için kriyojel monolitik kolonların hazırlanması
Preparation of cryogel monolithic columns for fibronectin purification
- Tez No: 321404
- Danışmanlar: PROF. DR. ADİL DENİZLİ, PROF. DR. EROL AKSÖZ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biyoloji, Biochemistry, Biology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2012
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 95
Özet
Fibronektin, birçok hücrenin yüzeyinde ve plazma dahil hücrelerarası sıvılarda bulunan yüksek molekül ağırlıklı bir glikoproteindir. Fibronektin, embriyonik gelişim, yara iyileşmesi ve hemostaz gibi birçok önemli fizyolojik süreçte rol alır. Bu nedenle fibronektinin saflaştırılması hem tedavide kullanılması açısından hem de biyolojik açıdan önemlidir. Bu çalışmada fibronektinin afinite kromatografisi yöntemi ile saflaştırılması amaçlanmıştır. Yeni nesil polimerik sistemlerden biri olan poli(hidroksietilmetakrilat) (PHEMA) kriyojel polimer destek olarak hazırlanmış ve ligand olarak fibronektine yüksek afinite gösteren jelatin seçilmiştir. PHEMA kriyojel şişme testleri, infrared spektroskopisi, taramalı elektron mikroskobu (SEM) ve yüzey alanı ölçümü ile karakterize edilmiştir. PHEMA kriyojelin kan uyuşabilirliği pıhtılaşma testleri ile araştırılmıştır. Jelatin immobilize PHEMA kriyojele fibronektin adsorbsiyonu sıcaklık, başlangıç fibronektin derişimi, ligand yükleme miktarı, iyonik şiddet, akış hızı ve zaman parametreleri açısından incelenmiştir. Elde edilen verilere adsorbsiyon modelleri ve kinetikleri uygulanmıştır. Jelatin immobilize PHEMA kriyojelin fibronektini ayırmadaki etkinliği albumin, lizozim ve IgG ile karşılaştırılarak FPLC sisteminde gösterilmiştir. Jelatin immobilize PHEMA kriyojel kullanılarak insan plazmasından %64 verimle fibronektin elde edilmiştir. Son olarak, desorbe fibronektindeki konformasyonel değişim florimetre ile araştırılmış, saflığı SDSPAGE ile kontrol edilmiştir.
Özet (Çeviri)
Fibronectin is a high molecular weight glycoprotein found on the surface of many cells and in extracellular fluids including plasma. It plays a major role in many important physiological processes such as embryogenesis, wound healing and hemostasis. Fibronectin purification is, therefore, important from both a therapeutic and a biological point of view. Purification of fibronectin with affinity chromatography was aimed in this study. Poly(hydroxyethyl methacrylate) (PHEMA) cryogel which is one of the new generation polymeric systems was prepared as the polymer support and gelatin which has a high affinity for fibronectin was chosen as the ligand. PHEMA cryogel characterized by means of swelling tests, infrared spectroscopy, scanning electron microscope (SEM) and surface area measurement. Blood compatibility of PHEMA cryogel was investigated by coagulation tests. Fibronectin adsorption on gelatin immobilized PHEMA cryogel was investigated in terms of temperature, initial fibronectin concentration, ligand loading, ionic strength, flow rate and time parameters. Adsorption models and kinetics were applied to obtained data. Efficieny of gelatin immobilized PHEMA cryogel in fibronectin separation was showed in FPLC system comparing with albumin, lysozyme and IgG. Fibronectin was obtained from human plasma with a yield of 64% by using the gelatin immobilized PHEMA cryogel. Finally, conformational changes in desorbed fibronectin was investigated by fluorometer and purity of it was checked with SDSPAGE.
Benzer Tezler
- Production of recombinant amylopullulanase enzyme from Thermoanaerobium brockii brockii
Thermoanaerobium brockii brockii kaynaklı amilopullulanaz enziminin rekombinant üretimi
HANDE MUMCU
Yüksek Lisans
İngilizce
2018
Biyoteknolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NEVİN GÜL-KARAGÜLER
- Pankreatik adenokarsinom hastalarına özgü kolajen/hiyalüronik asit/fibronektin temelli filmlerin sentez ve karakterizasyonu
Fabrication and characterization of collagen/hyaluronic acid/fibronectin-based films specific to pancreatic adenocarcinoma patients
ELİF AYŞE KAÇAR
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
BiyomühendislikSağlık Bilimleri ÜniversitesiDoku Mühendisliği Anabilim Dalı
DOÇ. DR. SEVDE ALTUNTAŞ
- Obezite ve metabolik sendrom tanılı çocuklarda irisin düzeylerinin, non-alkolik yağlı karaciğer hastalığı, glukoz ve lipit metabolizması ile ilişkisi
The relationship of irisin levels in children with obesity and metabolic syndrome, non-alcoholic fatty liver disease, glucose and lipid metabolism
DAMLA BAYSAL BAKIR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2018
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıSağlık Bilimleri ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ÇİĞDEM ÖMÜR ECEVİT
- Servikovajinal fibronektin ve servikal uzunluk ölçümünün erken doğum eylemi prognozuna etkileri
Başlık çevirisi yok
ZEKİ SALAR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2005
Kadın Hastalıkları ve DoğumAkdeniz ÜniversitesiKadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. MÜNİRE ERMAN AKAR