Geri Dön

Fibronektin saflaştırılması için kriyojel monolitik kolonların hazırlanması

Preparation of cryogel monolithic columns for fibronectin purification

PDF İndir

  1. Tez No: 321404
  2. Yazar: IŞIK PERÇİN DEMİRÇELİK
  3. Danışmanlar: PROF. DR. ADİL DENİZLİ, PROF. DR. EROL AKSÖZ
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyokimya, Biyoloji, Biochemistry, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2012
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 95

Özet

Fibronektin, birçok hücrenin yüzeyinde ve plazma dahil hücrelerarası sıvılarda bulunan yüksek molekül ağırlıklı bir glikoproteindir. Fibronektin, embriyonik gelişim, yara iyileşmesi ve hemostaz gibi birçok önemli fizyolojik süreçte rol alır. Bu nedenle fibronektinin saflaştırılması hem tedavide kullanılması açısından hem de biyolojik açıdan önemlidir. Bu çalışmada fibronektinin afinite kromatografisi yöntemi ile saflaştırılması amaçlanmıştır. Yeni nesil polimerik sistemlerden biri olan poli(hidroksietilmetakrilat) (PHEMA) kriyojel polimer destek olarak hazırlanmış ve ligand olarak fibronektine yüksek afinite gösteren jelatin seçilmiştir. PHEMA kriyojel şişme testleri, infrared spektroskopisi, taramalı elektron mikroskobu (SEM) ve yüzey alanı ölçümü ile karakterize edilmiştir. PHEMA kriyojelin kan uyuşabilirliği pıhtılaşma testleri ile araştırılmıştır. Jelatin immobilize PHEMA kriyojele fibronektin adsorbsiyonu sıcaklık, başlangıç fibronektin derişimi, ligand yükleme miktarı, iyonik şiddet, akış hızı ve zaman parametreleri açısından incelenmiştir. Elde edilen verilere adsorbsiyon modelleri ve kinetikleri uygulanmıştır. Jelatin immobilize PHEMA kriyojelin fibronektini ayırmadaki etkinliği albumin, lizozim ve IgG ile karşılaştırılarak FPLC sisteminde gösterilmiştir. Jelatin immobilize PHEMA kriyojel kullanılarak insan plazmasından %64 verimle fibronektin elde edilmiştir. Son olarak, desorbe fibronektindeki konformasyonel değişim florimetre ile araştırılmış, saflığı SDSPAGE ile kontrol edilmiştir.

Özet (Çeviri)

Fibronectin is a high molecular weight glycoprotein found on the surface of many cells and in extracellular fluids including plasma. It plays a major role in many important physiological processes such as embryogenesis, wound healing and hemostasis. Fibronectin purification is, therefore, important from both a therapeutic and a biological point of view. Purification of fibronectin with affinity chromatography was aimed in this study. Poly(hydroxyethyl methacrylate) (PHEMA) cryogel which is one of the new generation polymeric systems was prepared as the polymer support and gelatin which has a high affinity for fibronectin was chosen as the ligand. PHEMA cryogel characterized by means of swelling tests, infrared spectroscopy, scanning electron microscope (SEM) and surface area measurement. Blood compatibility of PHEMA cryogel was investigated by coagulation tests. Fibronectin adsorption on gelatin immobilized PHEMA cryogel was investigated in terms of temperature, initial fibronectin concentration, ligand loading, ionic strength, flow rate and time parameters. Adsorption models and kinetics were applied to obtained data. Efficieny of gelatin immobilized PHEMA cryogel in fibronectin separation was showed in FPLC system comparing with albumin, lysozyme and IgG. Fibronectin was obtained from human plasma with a yield of 64% by using the gelatin immobilized PHEMA cryogel. Finally, conformational changes in desorbed fibronectin was investigated by fluorometer and purity of it was checked with SDSPAGE.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    510650

    Production of recombinant amylopullulanase enzyme from Thermoanaerobium brockii brockii

    Thermoanaerobium brockii brockii kaynaklı amilopullulanaz enziminin rekombinant üretimi

    HANDE MUMCU

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2018

    Biyoteknolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NEVİN GÜL-KARAGÜLER

  2. Tez No

    60692

    Fibronektin fragmentinde farklı nokta mutasyonlarının yapı-fonksiyon ilişkilerine etkisinin teorik konformasyon analiz metoduyla incelenmesi

    Başlık çevirisi yok

    ŞÜKRİYE YILMAZ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    1997

    Tıbbi Biyolojiİstanbul Üniversitesi

    Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. ASIM CENANİ

  3. Tez No

    818159

    Pankreatik adenokarsinom hastalarına özgü kolajen/hiyalüronik asit/fibronektin temelli filmlerin sentez ve karakterizasyonu

    Fabrication and characterization of collagen/hyaluronic acid/fibronectin-based films specific to pancreatic adenocarcinoma patients

    ELİF AYŞE KAÇAR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    BiyomühendislikSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Doku Mühendisliği Anabilim Dalı

    DOÇ. DR. SEVDE ALTUNTAŞ

  4. Tez No

    524262

    Obezite ve metabolik sendrom tanılı çocuklarda irisin düzeylerinin, non-alkolik yağlı karaciğer hastalığı, glukoz ve lipit metabolizması ile ilişkisi

    The relationship of irisin levels in children with obesity and metabolic syndrome, non-alcoholic fatty liver disease, glucose and lipid metabolism

    DAMLA BAYSAL BAKIR

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ÇİĞDEM ÖMÜR ECEVİT

  5. Tez No

    346875

    Servikovajinal fibronektin ve servikal uzunluk ölçümünün erken doğum eylemi prognozuna etkileri

    Başlık çevirisi yok

    ZEKİ SALAR

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2005

    Kadın Hastalıkları ve DoğumAkdeniz Üniversitesi

    Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. MÜNİRE ERMAN AKAR

Geri Dön