Protein ayırma teknolojisi için HPLC kolon dolgu materyali tasarımı
HPLC column packing material design for protein separation technology
- Tez No: 363944
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. BERNA SARAÇOĞLU KAYA
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya Mühendisliği, Chemical Engineering
- Anahtar Kelimeler: Kromatografi-yüksek basınçlı-sıvı, Chromatography-high pressure-liquid
- Yıl: 2014
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Cumhuriyet Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Mühendisliği Bölümü
- Bilim Dalı: Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Tez kapsamında, Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi (High Performance Liquid Chromatography, HPLC) için monodispers ve gözenekli partikül formunda poli(vinil asetat-co-divinilbenzen) [poli(VAc-co-DVB)] ve poli(divinilbenzen) (PDVB) kolon dolgu materyalleri“Çok Basamaklı Mikrosüspansiyon Polimerizasyonu”yöntemi ile yaklaşık 9.5 mm boyutunda sentezlenmiş ve kolon performansları Ters Faz Sıvı Kromatografisi (Reverse Phase Chromatography, RPC) modunda test edilmiştir. Partiküller bazik ortamda hidrolizlenerek, partikül yüzeyi“hidroksi”formuna dönüştürülmüş ve kromatografik kullanım için uygun yüzey ve gözenek yapısına sahip poli(vinilalkol-co-divinilbenzen) [poli(VA-co-DVB)] partiküller elde edilmiştir. Partiküllerin karakterizasyonu Taramalı Elektron Mikroskobu (Scanning Electron Microscopy, SEM), yüzey alanı ve gözeneklilik ölçüm sistemi (Brunauer–Emmett–Teller, BET) ve Fourier Transfer Infrared Spektrofotometre (Fourier Transform Infrared Spectroscopy, FTIR) ile yapılmıştır. Sentez sonrası elde edilen partiküllerle doldurulan kolonların kromatografik performansları incelediğinde, poli(VAc-co-DVB) (2500 tabaka/m) kolon için literatürdeki değerlerden daha yüksek ve kararlı teorik tabaka sayısı değerleri elde edilirken pik çözünürlük değerlerinin de kabul edilen değerlerin üstünde olduğu görülmüştür. Poli(VAc-co-DVB) (%93-99) ulaşılan protein geri kazanım değerleri ise bütün proteinler için kantitatife yakın değerler olarak belirlenmiştir. Üretilen kolonlar için analitlerin, analizden analize ve günden güne tekrarlanabilirlik testleri yapılmış, hem“analizden analize ”hem de“günden güne”BSS değerleri % 2.8'in altında bulunmuştur. Bu sonuçlar sentezlenen kolon dolgu materyallerinin başarılı bir ii şekilde RPC'de kullanılabileceğini göstermiştir. Poli(VAc-co-DVB) kolonda, monomerin (VAc) varlığının, geri-basınç değeri, kromatografik ayırma yeteneği (pik çözünürlüğü ve tabaka sayısı) ve kolondan analit geri-kazanımı ve kısa alıkonma süresi (17 dakika) açısından etkili olduğu görülmüştür. Tez kapsamında sentezlenen Poli(VAc-co-DVB) kolonu, gradyent koşullarda protein ayrımı için ticari olarak kullanılan kolonlara benzer bir kromatografik performans sergilemektedir. Bununla birlikte yüksek mekanik ve kimyasal kararlılık, protein geri kazanımı, teorik tabaka sayısı ile düşük geri basınç ve tekrarlanabilirlik değerlerine sahip olması açısından ticari kolonlara üstünlük sağlamaktadır.
Özet (Çeviri)
In this thesis, the column materials in the form of monodisperse and porous particles were synthesized with regard to test their column performances in Reverse Phase Chromatography (RPC) mode. Particles in the form of poly(vinyl acetate-co-divinylbenzene) [poly(VAc-co-DVB)] and poly(divinylbenzene) [poly(DVB)] used for starting materials in the synthesis, were produced by“multi-stage microsuspension polymerization”. The surface of particles were converted to“hydroxyl”form by base hydrolysis that were then used as poly(vinylalcohol-co-divinylbenzene) [poly(VA-co-DVB)] particles, having appropriate structural properties like surface and porosity for chromatographic applications. Particle characterization was assessed by Scanning Electron Microscopy (SEM), BET surface area and porosity measurement system and FTIR spectroscopy. The investigation of column performances concluded that columns, poli(VAc -co-DVB) (2500 plate/m) ve PDVB (1500 plate/m), showed high and stable theoretical plate number and high peak resolution values compared to literature knowledge. Protein recovery data in RPC column, poli(VAc-co-DVB) (93-99%), were determined as similar as quantitative values for all proteins. Reproducibility tests of analytes of poli(VAc-co-DVB) column was assessed“during analysis and day by day”. BSS values were determined under 2.8%. The RPC column synthesized in this thesis exhibited similar chromatographic performance for protein separations in gradient conditions compared to the commercial columns. Moreover, the column exhibited superior properties like high chemical and mechanical stability, high protein recovery and theoretical plate number, low reverse pressure and reproducibility.
Benzer Tezler
- Kuru incirlerde küf florası ve aflatoksigenik küflerin saptanması
Başlık çevirisi yok
SİBEL BÜYÜKŞİRİN
- Hitzebedingte veränderungen an der caseinmicelle unter Uht-bedingungen und deren auswirkungen auf die käsereitechnologie
Uht koşullar altında ısıya bağlı caseinmicelle de meydana gelen değişimler ve peynircilik teknolojisine tesirleri
SELDA BULCA
Doktora
Almanca
2007
Gıda MühendisliğiTechnısche Unıversıtat MunchenGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ULRİCH KULOZİK
PROF. DR. JÖRG HİNRİCHS
- Mili ve Mikro Boyutlu Kanallarda İki Fazlı Sıvı Katı Akışı ve Manyetik Taneciklerin Akıştan Ayrılması
Two Phase Solid-Liquid Flow in Mili and Micro Sized Channels and the Separation of Magnetic Particles
SEVİLAY GÜRBÜZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2011
Makine Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiMakine Mühendisliği Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. İ. YALÇIN URALCAN
- Impact of support material type on the performance of dynamic membrane bioreactors treating municipal wastewater
Dinamik membran biyoreaktörler ile evsel atıksu arıtımında farklı destek tabakası tiplerinin araştırılması
RIZA HUDAYARIZKA
Yüksek Lisans
İngilizce
2019
Çevre Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiÇevre Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HALE ÖZGÜN ERŞAHİN
- Development of bacteriophage nanoparticles for glycomics analysis by genetic engineering
Glikomiks analizine yönelik bakteriyofaj nanopartiküllerinin genetik mühendisliği ile geliştirilmesi
GÖKSU GÜR
Yüksek Lisans
İngilizce
2014
GenetikHacettepe ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. EDA ÇELİK AKDUR