Geri Dön

Bazı gram negatif bakterilerin bakteriyosin üretimlerinin araştırılması

Investigation of bacteriocin production from some gram negative bacteria

PDF İndir

  1. Tez No: 379626
  2. Yazar: SEBAHAT TEKCAN DÜĞENCİ
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. IŞIL SEYİS BİLKAY
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biyoteknoloji, Mikrobiyoloji, Biology, Biotechnology, Microbiology
  6. Anahtar Kelimeler: Bakteriyosin, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, antibakteriyel aktivite, bakteriyosin karakterizasyonu, Bacteriocin, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, antibacterial activity, bacteriocin characterization
  7. Yıl: 2014
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 101

Özet

Bu çalışmada, çeşitli klinik örneklerden izole edilen Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa ve Klebsiella pneumoniae suşlarının antibakteriyel aktiviteleri araştırıldı. En yüksek antibakteriyel aktiviteye sahip suşlar E.coli 26S, E. coli 14, E. coli 27, P. aeruginosa 8, P. aeruginosa 15 ve P. aeruginosa 22 olarak bulundu. Bu suşlardan elde edilen antibakteriyel maddelerin proteolitik enzimlere kısmen ya da tamamen hassas olduğu saptandı. Antibakteriyel aktivite belirlenmesi için damlatma, disk difüzyon ve kuyucuk yöntemleri karşılaştırılarak en uygun yöntem seçilen disk difüzyon yöntemi ile bakteriyosin üreten en verimli suşlar olarak E. coli 26S ve P. aeruginosa 8 seçildi. Optimum bakteriyosin üretimleri her iki bakteri suşu için de Luria Bertani Broth besiyerinde, pH 7.0' de 37 oC'de ve 21. saatte olduğu saptandı. Çalkalamalı ya da statik koşullar bakteriyosin üretimlerini etkilemedi. E. coli 26S' den elde edilen bakteriyosinin 75 oC' de 30 dk ve P. aeruginosa 8' den elde ettiğimiz bakteriyosinin ise 90 oC' de 30 dk kararlılığını koruduğu bulundu. Metanol, butanolün her iki suşun bakteriyosin aktiviteleri üzerine etkileri olmadığı belirlendi. Etanol, aseton, SDS ve Tween 80' in E. coli 26S bakteriyosinine sırasıyla %25, %30, %10, %20; P. aeruginosa 8 bakteriyosinine ise sırasıyla %32, %37, %5, %21 oranlarında etkili olduğu saptandı. Kloroformun, E. coli 26S bakteriyosini üzerine etkisi olmadığı, P. aeruginosa 8 bakteriyosini üzerine %16 kayba neden olduğu bulundu. 4 oC' de 180.günde E. coli 26S' in bakteriyosin aktivitesini %70 ve P. aeruginosa 8' in bakteriyosin aktivitesini ise %41 oranında koruduğu belirlendi. – 20 oC' de 6. ayda bakteriyosin aktivitelerinde herhangi bir kayıp saptanmadı. E. coli 26S ve P. aeruginosa 8 bakteriyosinlerinin saflaştırılması için %80 oranında amonyum sülfat çöktürmesinin uygun olduğu saptandı. E. coli 26S ve P. aeruginosa 8' in bu çalışmada kullanılan tüm antibiyotiklere duyarlı olduğu belirlendi. E. coli 26S ve P. aeruginosa 8' den yapılan plazmid DNA izolasyonu sonucu plazmid varlığı saptanmadı. Sonuç olarak, E. coli 26S ve P. aeruginosa 8' den antibiyotiklere alternatif olabilme potansiyeli olan bakteriyosinler elde edildi.

Özet (Çeviri)

In this study, strains of Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa and Klebsiella pneumoniae, which were isolated from several clinical samples, were investigated for their antibacterial activities. Strains of E. coli 26S, E. coli 14, E. coli 27, P. aeruginosa 8, P. aeruginosa 15, and P. aeruginosa 22 were found to have the highest activity. It was established that the antibacterial substances obtained from these strains were partially or completely sensitive to proteolytic enzymes. E. coli 26S and P. aeruginosa 8 were selected as the most efficient strains producing bacteriocin by disk diffusion method which was found to be the optimal method when spot-on-lawn, disc diffusion and well-diffusion methods were compared for determining antibacterial activity. Optimal bacteriocin production was established in Luria Bertani Broth medium at pH 7.0 and 37 oC in 21 hours for both strains. It was observed that agitated and static conditions did not affect the bacteriocin production. It was also found out that the bacteriocin produced by E. coli 26S remained stable at 75oC for 30 minutes while bacteriocin produced by P. aeruginosa 8 remained stable at 90oC for the same time period. Moreover, it was determined that methanol and buthanol had no effect on the bacteriocin activities of both strains. It was observed that ethanol, acetone, SDS and Tween 80 caused 25%, 30%, 10% and 20% loss, respectively, on E. coli 26S bacteriocin and, 32%, 37%, 5% and 21% loss on P. aeruginosa 8 bacteriocin. It was also investigated that chloroform had no effect on E. coli 26S bacteriocin while it caused 16% loss on P. aeruginosa 8 bacteriocin. It was determined that E. coli 26S bacteriocin maintained 70% of its activity and P. aeruginosa 8 bacteriocin maintained 41% of its activity at 4oC after 180 days. No loss on bacteriocin activities were observed at -20oC after 180 days. It was found that precipitation of amonium sulfate at the rate of 80% was appropriate for purification of E. coli 26S and P. aeruginosa 8 bacteriocins. It was determined that E. coli 26S and P. aeruginosa 8 were sensitive to all antibiotics used in this study. The existence of plasmid was not observed as a result of plasmid DNA isolation on E. coli 26S and P. aeruginosa 8. In conclusion, bacterocins obtained from E. coli 26S and P. aeruginosa 8 had a potential of being alternatives to antibiotics.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    104594

    Salamura beyaz peynirden izole edilen bazı laktokok, enterekok ve laktobasil suşlarının proteolitik aktivite, bakteriyosin etkenliği ve biyogen amin oluşumu açısından karşılaştırılması

    A Comparative study on proteolytic activity, bacteriocin efficiency and biogenic amine formation of some lactoccucus enteroccoccus and lactobacillus strains isolated from white pickled cheese

    FÜGEN DURLU ÖZKAYA

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2001

    Gıda MühendisliğiAnkara Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NEZİHE TUNAİL

  2. Tez No

    389199

    Laktik asit bakterilerinin Enterobacter sakazakii üzerine antibakteriyal etkisinin incelenmesi

    Antibacterial effect of some lactic acid bacteria on Enterobacter sakazakii

    SİNEM DOĞAL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    Gıda Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ZEYNEP DİLEK HEPERKAN

  3. Tez No

    657018

    Ameliyat sonrası oluşan yara enfeksiyonlarının bakteriyolojik profili

    Bacteriological profile of post-operative wound infections

    ABDULLAH MADHLOOM MOHAMMED MUSAFER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    Klinik Bakteriyoloji ve Enfeksiyon HastalıklarıKastamonu Üniversitesi

    Genetik ve Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NEJDET GÜLTEPE

  4. Tez No

    811478

    Kanatlı gastrointestinal sisteminden özgün laktik asit bakteri suşlarının izolasyonu ve biyoteknolojik yönden değerlendirilmesi

    Isolation and biotechnological evaluation of specific lactic acid bacteria strains from the poultry gastrointestinal system

    ESRA BEDİR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    BiyoteknolojiYıldız Teknik Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. TÜLİN ÖZBEK

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ENES SEYFULLAH KOTİL

  5. Tez No

    55258

    Bazı fermente et ürünlerinden izole edilen pediococcus suşlarının metabolik ve antimikrobiyal aktivitelerinin incelenmesi ve yeni bir metodla bakteriosinin kısmi purifikasyonu ile aktivitesinin tespiti

    Başlık çevirisi yok

    MUSTAFA AŞKAR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1996

    BiyolojiGazi Üniversitesi

    DOÇ.DR. YAVUZ BEYATLI

Geri Dön