Kalp krizinin ve kalp yetmezliğinin hızlı tespiti için tanı kiti geliştirilmesi
Developing rapid test kits for detection of heart attack and congestive heart failure
- Tez No: 405251
- Danışmanlar: PROF. DR. MURAT ELİBOL, PROF. DR. SAİME İSMET GÜRHAN
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyomühendislik, Biyoteknoloji, Bioengineering, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2015
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 181
Özet
Kalp krizi ve kalp yetmezliğinin görülme sıklığı gelişmiş toplumlarda azalırken gelişmemiş ve gelişmekte olan toplumlarda artmaktadır. Bunun başlıca sebebi gelişmiş ülkelerdeki tanı ve tedavi sistemlerinin gelişmiş ve daha kolay ulaşabilir durumda olmasıdır. Kalp krizi ve yetmezliğinin tanısında, yüksek isabet oranı ile tanının konması ve hastanın yönlendirileceği polikliniğin belirlenmesi, özellikle acil servisler başta olmak üzere tüm poliklinikler için önemlidir. Halka açık alanlarda, ambulans, otobüs, uçak gibi taşıtlarda ve hatta her bireyin cebinde bulunabilecek ve hızlı bir şekilde sonuç verebilen tanı kitlerinin varlığı doğru zamanda doğru müdehalenin yapılması ile sonuçlanıp hayatta kalım oranlarının iyileştirilmesini sağlayacaktır. Bu çalışmada in vitro immünizasyon ile elde edilen hibridoma klonları karakterize edildi ve ürettikleri anti-hFABP monoklonal antikorları ve anti-NT-proBNP monoklonal antikorları kullanılarak yanal akış prensibi ile çalışan tanı kitleri tasarlandı. Tasarlanan kitlerinin tespit limitleri PBS içinde hazırlanan protein çözeltileri için sırasıyla 10 ng/mL ve 1000 ng/mL olarak belirlendi. Tanı kitlerinin hassaslaştırılması adına lokalize yüzeysel plazmon salınımı (LSPR) prensibi ile çalışan, hem 96 gözlü mikropleyt formatında hem de taşınabilir tek kullanımlık mikroakışkan çip formatında kitler tasarlandı. Elde edilen bu kitlerin hassasiyeti PBS'te ve insan serumunda hazırlanmış protein çözeltileri ile yapılan denemeler ile belirlendi ve sırasıyla PBS için de hFABP 1 pg/mL, NT-proBNP 100 pg/mL; serumda hFABP 10 pg/mL, NT-proBNP ise 1 pg/mL konsantrayonlarda dahi tespit edilebildi. Taşınabilir tek kullanımlık mikroakışkan çipler için yapılan deneme ise kitlerin PBS içinde hazırlanan hFABP ve NT-proBNP çözeltilerini 10 pg/mL konsantrasyonlarda dahi tespit edebildiği gösterildi.
Özet (Çeviri)
The aim of this thesis was to obtain hybridoma cells that produce anti-hFABP and anti-NT-proBNP monoclonal antibodies to design sensitive diagnostic test kits for detectioon of heart attack and congestive heart failure. For this purpose, hybridoma clones that produce anti-hFABP and anti-NT-proBNP monoclonal antibodies were obtained by in vitro immunization methodology and characterized by growth kinetics, isotyping and HPLC. Lateral flow immonuassays (LFIA) and localized-surface plasmon resonance (LSPR)-based diagnostic test kits in the form of 96 well plate and microfluidic chips were designed by using produced antibodies in combination of commercial ones. The detection limits of the lateral flow immonuassays (LFIA) were determined as 10 ng/mL and 1000 ng/mL for hFABP and NT-proBNP in PBS, respectively. The sensitivity of the LSPR-based diagnostic kits in both 96 well plate and microfluidic chip forms were found to be dramatically increased compared to that of LFIA. 96 well plate LSPR-based diagnostic kits was found to be able to detect 1 pg/mL hFABP in PBS and 10 pg/ml hFABP in serum while detecting 100 pg/mL NT-proBNP in PBS and 1 pg/mL NT-proBNP in serum. The sensitivity of the single-use microfluidic chips was determined as 10 pg/ml for hFABP and NT-proBNP in PBS. Consequently, LFIA based assays are easy to produce, portable, requires no reading system with less sensitivity. On the other hand, LSPR based systems are far more sensitive than developped LFIA kits (10 pg/mL). The only disadvantage of LSPR-based kits is the need of a spectrophotometer for analysis. But with the production of portable LSPR-based microfluidic chips this disadvantage is not going to be concern with high sensitive, easy to use portable set-ups.
Benzer Tezler
- Miyokardiyal iskemi/reperfüzyon hasarının indüklediği apoptozda HMGB-1/TLR2 aksının hücre içi sinyal yolağının belirlenmesi
The identification of intracellular signalling pathway through HMGB-1/TLR2 axis on myocardial ischemia/reperfusion injury-induced apoptosis
EYLEM TAŞKIN GÜVEN
- Akut miyokard enfarktüsü biyogöstergelerinden homosistein, miyoglobin ve yağ asiti bağlayıcı proteinin (FABP) girişimsiz tayini için ters iyontoforez tabanlı elektrokimyasal immünosensörün geliştirilmesi
Development of a reverse iontophoresis-based electrochemical immunosensor for the noninvasive determination of homocysteine, myoglobin and fatty acid binding protein (FABP), biomarkers of acute myocardial infarction
FATMA GÜLAY DER
Doktora
Türkçe
2024
Eczacılık ve FarmakolojiEge ÜniversitesiAnalitik Kimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MUSTAFA EMRAH KILINÇ
- Application of human mesenchymal stem cells to 3D silk fibroin scaffolds for cardiac tissue engineering
İnsan mezenkimal kök hücrelerinin 3B ipek fibroin yapı iskelelerine uygulanarak kardiyak doku mühendisliğinde kullanılması
GİZEM MERVE ŞAHİN
Yüksek Lisans
İngilizce
2017
Biyomühendislikİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FATMA NEŞE KÖK
DR. YÜKSEL ÇETİN
- Gıda alımı artırılan, azaltılan ve monosodyumglutamat uygulanan genç sıçanların mide dokusunda Apelin'in immünohistokimyasal olarak belirlenmesi
Determination of Apelin as immunohistochemically in gastric tissue of young rats applied monosodiumglutamate and increased, restricted food intake
ZÜBEYDE ÇALIŞKAN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2010
Histoloji ve EmbriyolojiFırat ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. LEYLA CANPOLAT KOYUTÜRK
- Sağlıklı genç erişkinlerde sigara içiminin ve sigara dumanına maruz kalmanın kardiyak otonomik fonksiyonlar üzerindeki etkisi
Effect of smoking and exposure cigarette smoke on cardiac autonomic function of healthy young adults
YUSUF ARPACIK
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
FizyolojiAbant İzzet Baysal ÜniversitesiFizyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KENAN GÜMÜŞTEKİN
DOÇ. DR. ALİM ERDEM