Gentamisin, amoksisilin ve sefazolin sodyum antibiyotiklerinin fare karaciğer ve böbrek glutatyon redüktaz enziminin aktivite, protein ve gen ekspresyon düzeyleri üzerine etkilerinin incelenmesi
The investigation of the effects of gentamicin, amokcicilin and cefazolin sodium antibiotics on the enzyme activity, protein and gene expression levels of glutathione reductase in mouse liver and kidney
- Tez No: 427666
- Danışmanlar: PROF. DR. MEHMET ÇİFTCİ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2015
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 109
Özet
Glutatyon Redüktaz enzimi (GR; E.C.1.8.1.7) düşük veya yüksek molekül kütleli disülfür substratları ile indirgenmiş piridin nükleotidleri arasında elektron transferini katalizler. Reaktif oksijen türlerinin (ROS) üretimi hem karaciğer hastalıklarında hem de akut ya da kronik böbrek hastalıkları gibi çeşitli renal hastalıklarda rol oynamaktadır. Bu nedenle ilaçların bilinçsizce tüketildiği günümüzde, vücudumuzu ROS'un zararlı etkilerinden koruyan endojen antioksidan savunma sistemin önemli bir parçası olan GR enziminin karaciğer ve böbrek dokularında gen ve protein ekspresyonları düzeyleri ve aktivitesi üzerine gentamisin (aminoglikozid grubu), amoksisilin (penisilin grubu) ve sefazolin sodyum (sefalosporin grubu) antibiyotiklerinin etkilerinin incelenmesi amaçlanmıştır. İlk olarak GR enzimi 2',5'-ADP sepharose 4B afinite kromatografisi yöntemi ile karaciğer dokusundan 84,615 EÜ/mg spesifik aktiviteyle %8,659 verimle 1725,73 kat, böbrek dokusundan ise 9,63 EÜ/mg spesifik aktiviteyle %27,136 verimle 43,74 kat saflaştırıldı. Söz konusu antibiyotiklerin GR aktivitesi üzerine inhibisyon etkileri incelendi. İlaç konsantrasyonlarına karşı %Aktivite grafikleri çizilerek ve inhibisyon gösteren antibiyotikler için IC50 değerleri hesaplandı. İnhibisyon türleri ve Ki sabitleri Lineweaver Burk grafikleri çizilerek belirlendi. Sefazolin sodyum fare karaciğer ve böbrek GR enzimi aktivitesi üzerine inhibisyon etkisi göstermezken, gentamisin sülfat antibiyotiğinin karaciğer GR için IC50 değeri 43,32 mM Ki sabiti 52,62±21,94 mM, inhibisyon türü ise yarışmasız, amoksisilin antibiyotiğinin karaciğer GR için IC50 değeri 13,63 mM Ki sabiti 5,61±1,9 mM, inhibisyon türü yarışmalı, böbrek GR için IC50 değeri 86 mM, Ki sabiti 140±55 mM, inhibisyon türü ise yarışmasız olarak bulundu. Ayrıca bahsi geçen ilaçların in vivo etkileri de araştırıldı, her üç ilacın da enzimi hem karaciğer hemde böbrek dokusunda inhibe ettiği görüldü. Karaciğer dokusunda gentamisin gen ekspresyon düzeyini azaltırken, sefazolin sodyum her iki dokuda da Gr'nin gen ekspresyon düzeyini arttırdı, amoksisilin ise etkilemedi. Western Blot analizi sonucuna göre amoksisilin ve gentamisin karaciğer ve böbrek dokusunda protein ekspresyon seviyesini değiştirmezken, sefazolin sodyum böbrekde protein ekspresyonunu arttırdı.
Özet (Çeviri)
Glutathione reductase (GR; E.C.1.8.1.7) catalyses the electron transfer between low or high molecular mass disulphide substrate and reduced pyridine nucleotides. The production of reactive oxygen species (ROS) is involved in both liver diseases and various renal diseases such as acute or chronic kidney diseases. GR is an important part of the endogenous antioxidant defence system that protects our body from the harmful effects of ROS. Therefore, todays that drugs unconsciously consumed, it is aimed to investigate that the effects of gentamicin (aminoglycoside group), amoxicillin (penicillin), and cefazolin sodium (cephalosporin group) antibiotics on the activity of GR. Firstly, GR enzyme was purified by 2',5'-ADP Sepharose 4B affinity chromatography method from the mouse liver with a specific activity of 84.615 EU/mg protein, % 8.659 yield, 1725.73 fold, and from kidney with a specific activity of 9.63 EU/mg protein, % 27.136 yield, 43.74 fold. Inhibitory effects of in question antibiotics were investigated on GR activity. IC50 values for antibiotics showing inhibition were calculated by ploting drug concentration vs. Activity% graphs. Inhibition types and Ki constants were determined by drawing Lineweaver Burk plots. It was found that while cefazolin sodium did not show inhibitory effect on the GR activity in both tissue, IC50 value of gentamicin for hepatic GR is 43.32 mM, Ki constant is 52.62±21.94 mM, and the inhibition type is noncompetitive, IC50 value of amoxicillin for hepatic GR is 13.63 mM, Ki constant is 5.61±1.9 mM, and inhibition type is competitive, for kidney GR IC50 value of amoxicillin is 86 mM, Ki constant is 140±55 mM, and inhibition type is noncompetitive. Also in vivo effects of the medication at issue were investigated, it was seen that all three drugs inhibited the enzyme in both tissues. While gentamicin reduced the level of Gr gene expression only in liver, cefazolin sodium increased the level of the Gr gene expression in both tissues and amoxicillin did not show any effect. According to the results of Western Blot analysis amoxicillin and gentamicin did not change the level of protein expression of GR in liver and kidney but cefazolin sodium increased protein expression in kidney.
Benzer Tezler
- Gentamisin sülfat, amoksisilin ve sefazolin sodyum antibiyotiklerinin fare kalp dokusunda antioksidan enzim aktiviteleri, protein ve gen ekspresyon düzeyleri üzerine etkilerinin incelenmesi
The investigation of antioxidant enzyme activities of gentamicin sulfate, amoxicillin and cefazolin sodium antibiotics and their effect on gene expressions and protein levels in mice heart tissue
AHMET SAVCI
- Sefazolin sodyum, amoksisilin ve gentamisin antibiyotiklerinin fare testis dokusundaki oksidatif stres ve fertilite üzerine etkisinin moleküler ve protein seviyesinde araştırılması
Investigation at molecular and protein levels of effect on oxi̇dati̇ve stress and fertility in mouse testis tissue of cefazolin sodium, amoxicillin and gentamycin antibiotics
MUHAMMET KARAMAN
- Sıçan karaciğer ve böbrek dokularından saflaştırılan beta-glukozidazlar üzerine bazı antibiyotiklerin in vitro etkilerinin araştırılması
Investigation of the in vitro effects of some antibiotics on the purified beta-glucosidases from the rat liver and kidney
NİHAL TÜRKMEN
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
BiyokimyaBalıkesir ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. HATİBE KARA
- Veteriner hekimlikte kullanılan antibiyotiklerin yoğurt kültürleri ( S.thermophilus ve L. bulgaricus) üzerine etkileri
The Effects on yoghurt cultures (S. Thermophilus and L.bulgaricus) of antibiotics used for veterinary medicine
NİYAZİ ALTAY
Doktora
Türkçe
1999
Veteriner HekimliğiFırat ÜniversitesiBesin Hijyeni ve Teknolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. CEMAL ÇELİK
- Islatılmış derilerdeki enterobacterıaceae familyasına ait türlerın izolasyonu, tanımlanması ve farklı antibıyotiklere karşı duyarlılıklarının belirlenmesi
Isolation and identification of bacterial species belonging to the family enterobacteriaceae from soaked hides and skin samples and determination of their antibiotic susceptibility
EDA YAZICI