Anacardiaceae ailesinden (Pistacia vera L. cv. Siirt) Lipaz enzimlerinin saflaştırılması ve karakterizasyonu
Purification and characterization of Lipase enzyme from Anacardiaceae (Pistacia vera L. cv. Siirt)
- Tez No: 444487
- Danışmanlar: PROF. DR. METİN BÜLBÜL
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2015
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Dumlupınar Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 66
Özet
Lipazlar, lipitlerin ester bağlarının hidrolizini katalizleyen, birçok canlıda trigliseridlerin (gıdasal lipitlerin)sindirim, taşınım ve işleniminde önemli rol alan hidroliz reaksiyonlarının yanı sıra esterifikasyon ve transesterifikasyon reaksiyonlarını da katalizleme yeteneğine sahip olan esterazların bir alt sınıfı enzimlerdir. Lipazlar, kimyasal sentezi ve ayrıştırılması zor özel bileşiklerin üretimi ve ayrıştırılması, geniş spektrumlardaki substratları kullanabilme yeteneklerine sahip oluşları, hidrolitik reaksiyon katalizinde kofaktöre gereksinim duymamaları, yan ürün oluşumunu engellemeleri gibi özelliklerinden dolayı son yıllarda biyolojik, endüstriyel, vs… gibi kullanım alanları giderek artmaktadır. Bu çalışmada alternatif bir kaynak olarak siirt fıstığı tohumundan lipaz enziminin saflaştırılması ve karakterizasyonu hedeflenmiştir. Siirt fıstığı tohumundan lipaz enzimi saflaştırabilmek için; siirt fıstığı tohumlarının proteinleri yağsızlaştırılarak amonyum sülfat çöktürmesi, diyaliz ve jel filtrasyon kromotografisi metodları kullanılarak siirt fıstık tohumları lipazı saflaştırılmaktadır. Her basamakta Bradford metoduna göre protein tayini, jel filtrasyon yöntemiyle sephadexG-100 jelinde saflaştırılmış, titrimerik metod lipaz aktivite tespiti yapılmış ve spesifik aktivite hesaplanmıştır. Elde edilen enzimlerin saflığının tespiti için aktivite ve elektroforez (SDS-PAGE) tayini yapılmıştır. Yapılan işlemler sonucunda antepfıstığı tohumu lipazının 1,97 kat saflaştırılmış olduğu tespit edilmiştir. Siirt fıstığı tohumundan saflaştırılan enzim en yüksek aktiviteyi 45°C optimum sıcaklıkta ve optimum pH 8,8'de göstermektedir. Ayrıca stabil sıcaklık 45°C ve stabil pH 8,4 olarak tespit edilmiştir. Siirt fıstığı tohumundan elde edilen lipaz enziminin depo kararlılığını tespit etmek için, 120 saat süreyle aktivite ölçümleri yapılmıştır. Enzim aktivitesinin 120 saat sonunda 45°C de korunduğu gözlemlenmiştir. Triolenin substratı kullanılarak antep fıstığı tohumu lipazının Km ve Vmax değerleri hesaplanmıştır. Vmax 15,60 U/dk. mg ve Km 0,078 Mm enzim olarak hesaplanmıştır.
Özet (Çeviri)
Lipases are an enzyme that catalyzes the hydrolysis of lipids. Lipases are a subclass of the esterases. Lipases perform essential roles in the digestion, transport and processing of dietary lipids ( triglycerides, fats, oils ) in organisms.Lipases serve important roles being exploited as cheap and versatile catalysts to degrade lipids in more modern applications. In the present work pistachios seed is choosen as an alternative source for purification and characterization of lipase. By purification of lipase from pistachios seed procure rem, deoiling of pistachios seeds protein procure ammonium sulfate precipitation purify by dialysis gel filtration chromatography methods. Protein concentration was determined by the Bradford method using Sephadex G-100 gel filtration column chromatography. In the and specific activity has been calculated as purification coefficient of 1.97 fold. Lipase activity was highest at PH 8.8 and at 45°C . Also stable activity showed at PH 8.4 and at 45°C. Pistachios seed's lipase stability is been tested for 120 hours and at the end of the test it has showed thah it's stability is protected at 45°C. Lipase substrate specificity has been calculated Vmax and Km. Their Vmax 15,60 U/dk.mg and Km 0,078 Mm enzyme, respectively.
Benzer Tezler
- Antep fıstıklarında Okratoksin a ve Aflatoksin varlığının incelenmesi
Determination of Ochratoxin a and Aflatoxins in pistachio nuts
CANSU SEDEFOĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2013
Gıda Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. DİLEK HEPERKAN
- Olgun Antep fıstığı bitkisinin (Pistacia vera L. Atlı) mikroçoğaltımı, in vitro konzervasyonu ve kriyoprezervasyonu için biyoteknolojik yöntemlerin geliştirilmesi
Development of biotechnological methods for micropropagation, in vitro conservation and cryopreservation of mature Pistachio (Pistacia vera L. Atli)
HÜLYA AKDEMİR
Doktora
Türkçe
2013
BiyolojiGebze Yüksek Teknoloji EnstitüsüMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. YELDA ÖZDEN ÇİFTÇİ
- Use of KASP assay in sex determination of Pistacia
Pistacia genus'unda cinsiyet ayrımının KASP yöntemiyle belirlenmesi
ZEYNEB NUR ŞAHİN
Yüksek Lisans
İngilizce
2018
BiyoteknolojiMarmara ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AHU ALTINKUT UNCUOĞLU
- Pistacia terebinthus L. yapraklarının kimyasal içeriği ve farklı ekstrelerinin biyolojik aktivitelerinin belirlenmesi
Determination of the chemical content and the biological activities of different extracts of Pistacia terebinthus L. leaves
SULTAN ÖZGE ÇAPAR
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
BiyolojiKilis 7 Aralık ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ HAKAN ÇETİNKAYA
- Spektroskopik yöntemlerle ülkemizin doğu bölgesinde yetişen 200 tıbbi ve aromatik bitki türünün metal analizleri ve kemometrik değerlendirilmesi
Evaluation chemometric and metal analysis of 200 medicinal and aromatic plant species growing in the eastern region of our country by spectroscopic methods
ADİL UMAZ
Doktora
Türkçe
2021
KimyaDicle ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FIRAT AYDIN
DOÇ. DR. ABDULSELAM ERTAŞ