Koyun orijinli polimorf nükleer lökositlerde toxoplasma gondii'ye karşı şekillenen hücre dışı tuzağın kantitatif analizinde picogreen ve sytox orange boyalarının karşılaştırılması
Comparison of picogreen and sytox orange stains in quantitative analysis of extracellular trap formed against toxoplasma gondii in polymorphonuclear leukocytes from sheep
- Tez No: 474508
- Danışmanlar: PROF. DR. KADER YILDIZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Parazitoloji, Parasitology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2017
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Kırıkkale Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Parazitoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Parazitoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 100
Özet
Toxoplasma gondii dünya çapında yaygın, zorunlu hücre içi zoonoz parazitik protozoondur. Vücuda giren patojenlere karşı canlıda ilk savunma hattını doğal bağışıklık yanıtı oluşturmaktadır. Bu yanıtın en önemli unsurlarından birisi polimorf nükleer lökositlerdir (PMN). PMN'i oluşturan hücrelerin büyük çoğunluğu nötrofillerdir. Nötrofil vücutta patojenle mücadelede fagositosis, degranülasyon ve netosis stratejilerini kullanır. Patojenle karşılaşan PMN'de şekillenen bir dizi reaksiyon sonrasında çekirdek ve granüler içerikler ağ biçiminde hücre dışı alana salınmaktadır. Bu tuzak yapılarınının kantitatif analizinde çeşitli DNA boyaları kullanılmaktadır. Bu tez çalışmasında koyun PMN'inde T. gondii takizoitlerine karşı in vitro şekillenen hücre dışı tuzak yapılarının omurgasını oluşturan DNA'nın kantitatif ölçümünde iki ekstraselüler DNA boyasının (Sytox orange ve Picogreen) etkinliğinin karşılaştırılması amaçlanmıştır. Çalışma kapsamında koyunlardan izole edilen PMN ve T. gondii takizoitleri farklı sürelerde (30, 60, 90 ve 120 dakika) inkübe edilmiş ve reaksiyon sonucunda açığa çıkan ekstrasellüler DNA iki farklı boya ile boyanarak ölçülmüştür. Çalışma sonucunda 30 dakikalık inkubasyon dışındaki (p=0.014) inkubasyon sürelerinde açığa çıkan DNA'nın ölçümü bakımından iki boya arasında istatistiksel fark bulunmamıştır (p>0.05). İki boya arasında 30. dakikadaki boyanma farklılığı önemli bulunmuştur. Bu durumun sebebinin kullanılan boyaya ait boyama özelliği ile ilgili olabileceği düşünülmüştür. In vitro netosis çalışan araştırıcıların kısa süreli inkubasyon sonucunda şekillenen ekstrasellüler DNA'nın kantitatif analizinde iki farklı boya kullanmaları önerilmiştir.
Özet (Çeviri)
Toxoplasma gondii is an obligate intracellular zoonotic parasitic protozoan that is common in the world. Innate immunity is the first line of defense of host against pathogens entering the body. One of the most important cells of innate immunity is the polymorphonuclear leukocytes (PMN's). Neutrophils consist the majority of the PMN. Neutrophil uses several strategies including phagocytosis, degranulation, and netosis while it is fighting the pathogen in the body. Upon encountering with a pathogen, a series of reactions occur inside of PMN, then, nucleus and granular contents release extracellular area like as network structures. Various extracellular DNA dyes are used for the quantitative analysis of these trap structures. The aim of the thesis study was to compare the effectiveness of two extracellular DNA dyes (Sytox orange and Picogreen) in quantitative measurement of the DNA that forms the backbone of the extracellular trap structures released from sheep PMN's after confronted with T. gondii tachyzoites in vitro. In the study, T. gondii tachyzoites and PMN's isolated from the sheep were incubated at different times (30, 60, 90 and 120 min), and then extracellular DNA released after incubation was stained with two different dyes. There was no statistical significant difference between the two extracellular DNA dyes regarding the measurement of DNA released during incubation times (p>0.05), except for the 30-minute incubation time in the present study. There was a statistically significant difference at 30 minutes incubation time (p=0.014). It is thought that this may be explained by the staining properties of the dye. Researchers studying in vitro netosis are recommended to use two different extracelluler DNA dyes for the quantitative analysis of extracellular DNA formed during short-term incubation.
Benzer Tezler
- Koyun orijinli escherıchıa colı O157:H7 izolatlarının moleküler karakterizasyonu
Molecular characterization of escherichia coli O157:H7 isolates from sheep origin
YILMAZ EMRE GENÇAY
Doktora
Türkçe
2014
Halk SağlığıKırıkkale ÜniversitesiMikrobiyoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MURAT YILDIRIM
- Sığır ve koyun orijinli Campylobacter jejuni ve Campylobacter coli'nin moleküler tiplendirilmesi
Moleculer typing of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli isolated from cattle and sheep
MEHMET NURİ AÇIK
Doktora
Türkçe
2006
MikrobiyolojiFırat ÜniversitesiMikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF.DR. BURHAN ÇETİNKAYA
- Hayvan, gıda ve çevre örneklerinden lısterıaların izolasyonu ve moleküler karakterizasyonu
Listeria isolation ann molecular characterization from animal, food and environmental samples
ERAY ATIL
Doktora
Türkçe
2009
MikrobiyolojiFırat ÜniversitesiMikrobiyoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HASAN BASRİ ERTAŞ
- Hayvansal orijinli escherichia coli izolatlarının filogruplarının belirlenmesi ve virulens genlerinin analizi
Determination of phylogroups of escherichia coli isolates of animal origin and analysis of virulence genes
EMRE KARAKAYA
Doktora
Türkçe
2021
Veteriner HekimliğiErciyes ÜniversitesiMikrobiyoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FUAT AYDIN
- Koyun keçi çiçek aşısının Mdbk hücre kültüründe üretilmesi ve Lumpy Skin Disease'e karşı sığırlarda bağışıklık çalışması
Propagation of sheep and goat pox vaccine in MDBK cell culture and immunity study in cattle against Lumpy Skin Disease
SERDAR UZAR
Doktora
Türkçe
2019
Veteriner Hekimliğiİstanbul Üniversitesi-CerrahpaşaViroloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NURİ TURAN