Geri Dön

Karbonik Anhidraz Enziminin Afinite Kromatografisiyle Saflaştırılması ve Biyoteknolojik Uygulamaları

Karbonik anhidraz enziminin afinite kromatografisiyle saflaştirilmasi ve biyoteknolojik uygulamalari

  1. Tez No: 479936
  2. Yazar: YASEMİN UYMAZ
  3. Danışmanlar: PROF. DR. ARZU ERSÖZ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Karbonik anhidraz, kriyojel kolon, sülfonamid, treonin, mimik etkileşim, Carbonic anhydrase, cryogel column, sulphonamide, threonine, mimic interaction
  7. Yıl: 2017
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Anadolu Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 60

Özet

Bu çalışmada, koyun karaciğerinden karbonik anhidraz (CA) enzimi, yeni bir afinite destek geliştirilerek saflaştırılmıştır. Bu tez kapsamında; öncelikle karbonik anhidraz enziminin inhibitörlerinden biri olan sülfonamid ile treonin aminoasidi arasındaki etkileşim mimik edilerek sülfonamid ve MA-Treonin ön-organizasyonu sonrası çapraz bağlayıcılar eşliğinde kriyojel kolon sentezlenmiştir. Sentezlenen kriyojel kolonun karakterizasyonu şişme testi, BET, FT-IR ve SEM analizleri ile gerçekleştirilmiştir. Çalışmanın bir sonraki aşamasında, koyun karaciğerinden elde edilen ham ekstrakttan CA enziminin Hızlı Protein Sıvı Kromatografi (FPLC) ile saflaştırma işlemi gerçekleştirilmiştir. Saflaştırılan CA enziminin Bradford yöntemi ile protein içeriği, UV spektrometrik ölçümler ile esteraz ve hidrataz aktivitesine göre optimum aktivite gösterdiği koşullar tespit edilmiş, Dairesel Dikroizm (CD) Spektroskopisi ile ikincil ve tersiyer yapılarındaki değişim değerlendirilmiş ve Sodyum Dodesil Sülfat Poliakrilamid Jel Elektroforez (SDS-PAGE) ile molekül ağırlığı tayin edilmiştir.

Özet (Çeviri)

In this study, the carbonic anhydrase (CA) enzyme has been purified with a new affinity support developed from sheep liver. Within the scope of the study; the interaction between the sulfonamide, one of the inhibitors of CA enzyme, and threonine amino acid, has been mimicked and cryogel column has been synthesized in the presence of the sulfonamides and MA-threonine pre-organization with cross-proper linkers. Characterization of the synthesized cryogel column has been performed by swelling test, BET, FT-IR and SEM analysis. In the next step of the study, the purification of CA enzyme has been realized by Fast Protein Liquid Chromatography (FPLC) from crude extract obtained from sheep liver. The protein content of the purified enzyme has been determined by Bradford method, UV spectrometric measurements have been showed the optimum conditions for esterase and hydratase activity, Circular Dichroism (CD) Spectroscopy has been used to evaluate changes in secondary and tertiary structure and molecular weight has been determined by Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE).

Benzer Tezler

  1. Gökkuşağı alabalık (Oncorhynchus mykiss) eritrositlerinden karbonik anhidraz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu ve bazı antibiyotiklerin enzim aktivitesi üzerine inhibisyon etkilerinin incelenmesi

    Purification and characterization of carbonic anhydrase from rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) erythrocytes and inhibition effects of some antibiotics on enzyme activity

    OLCAY HİSAR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2002

    Su ÜrünleriAtatürk Üniversitesi

    Su Ürünleri Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. TELAT YANIK

    PROF.DR. İRFAN KÜFREVİOĞLU

  2. Farklı urasil türevlerinin bazı metabolik enzimler üzerinde etkilerinin incelenmesi

    Investigation of the effects of differential urasil derivatives on some metabolic enzymes

    KÜBRA ÇAVUŞOĞLU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    BiyokimyaAğrı İbrahim Çeçen Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MURAT ŞENTÜRK

  3. Karbonik anhidraz enziminin koyun kalp dokusundan saflaştırılması, karakterizasyonu ve yeni sentezlenen sülfonamid kalkonların etkilerinin araştırılması

    Purification and characterization of carbonic anhydrase enzyme from sheep heart tissue andinvestigation of the effects of new synthesized sulfonamide chalcones

    MUSTAFA ORHAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    BiyokimyaAğrı İbrahim Çeçen Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. MURAT ŞENTÜRK

  4. Karbonik anhidraz enziminin farklı destek materyalleri üzerine immobilizasyonunun araştırılması

    Research of immobilization of carbonic anhydrase on different support materials

    AZİZE ALAYLI

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2002

    KimyaAtatürk Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NAZAN DEMİR

  5. Sığır eritrositlerinden karbonik anhidraz enziminin saflaştırılması ve bazı antibiyotiklerin enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi

    Purification of carbonic anhydrase enzyme from bovine erytrocytes and investigation effects of some antibiotics on enzyme activity

    MEHMET YAZICIOĞLU

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    ZiraatOndokuz Mayıs Üniversitesi

    Tarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. DENİZ EKİNCİ

    PROF. DR. ŞÜKRÜ BEYDEMİR