Geri Dön

Bal arısı (Apis mellifera) venomundan saflaştırılmış melittin'in U118 glioblastoma hücre hattı üzerindeki etkileri

Purified melittin from honeybee (Apis mellifera) venom's effects on U118 glioblastoma cell line

PDF İndir

  1. Tez No: 493943
  2. Yazar: KÜBRA NUR GÜVEN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. NEVİN KESKİN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2017
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 76

Özet

Glioblastoma multiforme (GBM); merkezi sinir sistemi içindeki glial hücrelerinden ortaya çıkan, Dünya Sağlık Örgütü (WHO) tarafından grade IV olarak tanımlanan ölümcül beyin tümörlerinden bir tanesidir. MMP-9 ve ADAMTS-5 proteazları kanserli hücre invazyonunda etkili proteazlardır, bunların yanısıra TGF-β sitokini de hücre invazyonunda etkindir. Günümüzde uygulanan kanser tedavilerinin yetersiz kalması nedeniyle, bu konuda kemoterapötik ilaçların etkinliğini artırabilecek yeni ajanlar ve tedavi stratejilerine ihtiyaç duyulmaya başlanmıştır. Bu konuda en çok araştırılan biyotoksinlerden olan Melittin (MEL), arı zehrinin ana bileşenini oluşturmaktadır. Bu çalışmada bal arısı (Apis mellifera) venomundan saflaştırılmış melittinin, U118 glioblastoma hücre hattı üzerindeki etkilerine bakılmıştır. Melittin'in hücrelerdeki mitokondriyal aktivitesi MTT testi ile, protein içeriğinin varlığı ise Western Blotting yöntemi ile araştırılmıştır. MTT testinde 1, 3, 24, 48 ve 72 saat süreyle 0,5, 1, 3, 5, 10, 15, 20 µg/ml konsantrasyonlarında MEL' e maruz bırakılan U118 hücrelerinde; en düşük absorbans değerleri 10, 15 ve 20 µg/ml dozlarında ölçülmüştür. U118 kontrol grubu hücrelerinde TGF-β protein düzeyi düşük görülürken, MEL'in düşük doz olarak hücreye verilmesiyle TGF-β'nın aktif hale geldiği görülmüştür. MEL'in toksik etkisiyle TGF-β'nın aktivasyonu artmıştır. Ancak uygulama zamanı arttıkça ve MEL'in U118 hücresi üzerindeki toksik etkisi de artarak; TGF-β'nın baskılandığı görülmüştür.U118 kontrol hücrelerine göre TGF-β protein düzeyindeki en fazla düşüş, 3 µg/ml konsantrasyonda 48 saat Melittin uygulanan hücrelerde görülmüş ve düşüş 0,7 kattır. U118 hücrelerine uygulanan 48 saat 3 µg/ml konsantrasyonda Melittin uygulanan hücrelerden Melittin'nin toksik etkisinden dolayı MMP-9 proteinin salgılanması baskılanmış ve bu nedenle bant görüntüsü alınamamıştır. Uygulanan 3 µg/ml konsantrasyondaki MEL'in 24 saatlik uygulamasında MMP-9 protein düzeyi kontrol hücrelerine göre 0,8 kat düşüş görülmüştür. U118 hücrelerinin ADAMTS-5 protein seviyelerinin kontrol grubu hücrelerine göre daha düşük olduğu belirlenmiştir. U118 kontrol hücrelerine göre, en fazla düşüş 3 µg/ml konsantrasyonda 48 saat Melittin uygulanan hücrelerin ADAMTS-5 protein düzeyinde görülmüş ve düşüş 0,85 kattır. Western Blotting ile analiz edilen MMP-9 ve ADAMTS-5 proteazlarının ve TGF-β sitokininin protein seviyeleri en düşük 48 saat süreyle 3 µg/ml konsantrasyonda MEL uygulanan hücrelerde görülmüştür. Elde edilen sonuçlar GBM hücrelerinin tedavisinde MEL'in alternatif bir yol olabileceğini düşündürmüştür.

Özet (Çeviri)

Glioblastoma multiforme (GBM); is one of the deadly brain tumors created by the glial cells in the central nervous system defined as grade IV by the World Health Organization (WHO). MMP-9 and ADAMTS-5 are proteases that are effective in cancer cell invasion, besides TGF-β cytokines are effective in cell invasion. Due to the inadequacy of currently available cancer therapies, new agents and treatment strategies which can increase the effectiveness of chemotherapeutic drugs have started to be needed. One of the most investigated biotoxin, Melittin (MEL) is the main component of bee venom. In this study, the effects of purified melittin from honeybee (Apis mellifera) venom on U118 glioblastoma cell line was investigated. Mitokondrial activities of the melittin on the cells with MTT test, and the presence of protein component on the cells with the western blotting method have been displayed. The lowest absorbance values in U118 cells exposed to MEL at concentrations of 0.5, 1, 3, 5, 10, 15, 20 μg/ml for 1, 3, 24, 48 and 72 hours in MTT test were measured at doses of 10, 15 and 20 μg/ml. While TGF-β protein levels were low in the U118 control group cells, it was observed that TGF-β was activated by administration of low dose MEL to the cells. The activation of TGF-β has increased by the toxic effect of MEL. However; toxic effect of MEL on U118 cell increases with increased administration time, and TGF-β has been suppressed. The highest decrease in TGF-β protein level compared to U118 control cells was observed in cells treated with Melittin for 48 hours at a concentration of 3 μg/ml, and the decrease was 0.7 fold. Because of the toxic effect of Melittin, the secretion of MMP-9 protein was suppressed in cells treated with Melittin at a concentration of 3 μg/ml for 48 hours in U118 cells, and thus no band image was able to be obtained. At 24 hours of application of MEL at 3 μg/ml concentration, there was a 0.8 fold decrease in MMP-9 protein level compared to control cells. It has been identified that the ADAMTS-5 protein levels of U118 cells were lower than control cells. Comparing to the U118 control cells, the highest decrease was observed at ADAMTS-5 protein level of cells treated with Melittin for 48 hours at a concentration of 3 μg/ml, and the decrease was 0.85 fold. The protein levels of MMP-9 and ADAMTS-5 proteases and TGF-β cytokin analysed by western blotting has been displayed the cells threated with MEL minimum level through 48 hour and 3 µg/ml concentration. The results obtained that MEL may be an alternative way for therapy of GBM cells.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    521339

    Bal arısı venomunun adipoz doku kökenli mezenşimal kök hücreler üzerine etkileri

    Effects of honey bee venom on adipose tissue-derived mesenchymal stem cells

    MELİS SESLİ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    BiyolojiHacettepe Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET ALİ ONUR

  2. Tez No

    305933

    Arı (Apis mellifera L.) venomunun T98G insan glioblastoma hücre hattı üzerindeki sitotoksik etkisi

    Cytotoxic effect of bee (Apis mellifera L.) venom on the T98G human glioblastoma cell line

    GAMZE AYAZ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    BiyolojiHacettepe Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET ALİ ONUR

  3. Tez No

    691320

    Apis mellifera arı venom bileşenlerinin insan meme kanseri hücre hatları üzerindeki antikanser ve antimetastatik etkilerinin araştırılması

    Investigation of the anticancer and antimetastatic effects of Apis mellifera bee venom components on human breast cancer cell lines

    DİLBER ECE AKGÜN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    BiyoteknolojiEskişehir Osmangazi Üniversitesi

    Biyoteknoloji ve Biyogüvenlik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FİGEN ÇALIŞKAN

  4. Tez No

    84412

    Bal arısı (apis mellifera L.)'nda farklı koloni populasyon büyüklüğünün polen üretimi üzerine etkisi

    Effects of different colony population gravity on pollen production in honey bee (apis mellifera L.)

    ALİ CİHAN GÜREL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1999

    ZiraatOndokuz Mayıs Üniversitesi

    Zootekni Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. AHMET GÜLER

  5. Tez No

    78581

    Bal arısı (Apis mellifera L.)'nda değişik koloni populasyonu gücü, yüksek tipi ve hasat zamanlarının arı sütü verimine etkisi

    Effects of different colony populaton sizes, queen cup types and harvest times on royal jelly production in honey bee {Apis mellifera L.)

    İSMAİL DURMUŞ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    1998

    ZiraatOndokuz Mayıs Üniversitesi

    Zootekni Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. AHMET GÜLER

Geri Dön