Geri Dön

Lentiviral MYDGF üretimi, çoğaltılması ve iletimi

Lentiviral MYDGF production, reproduction and transmission

PDF İndir

  1. Tez No: 551810
  2. Yazar: MUSTAFA CAN KİREN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. ERTUĞRUL KILIÇ, PROF. DR. ÜLKAN KILIÇ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Fizyoloji, Genetik, Physiology, Genetics
  6. Anahtar Kelimeler: Gen tedavisi, Lentiviral vektörler, MYDGF geni, Gene therapy, Lentiviral vectors, MYDGF gene
  7. Yıl: 2019
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: İstanbul Medipol Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Tıbbi Fizyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 64

Özet

Gen tedavisi, hastalığa sahip hücrelerde genetik bozuklukların düzeltilmesi amacıyla ilgili genlerin aktarımı olarak tanımlanan bir tedavi yöntemidir. Terapötik gen olarak adlandırılan tedavi edici bu genlerin aktarım amacı, mutasyon sonucu oluşan fonksiyon kayıplarını geri getirmek veya eksik olan gen ürününün ekspresyon seviyesini fizyolojik olarak normal seviyelere getirmektir. Ekpresyon artırma, bastırma veya gen onarma gibi ihtiyaçlara göre üretilen terapötik gen vektör adı verilen genetik materyali çeşitli hücrelere, dokulara ve tüm organlara taşıyan araçlar olan vektörler aracılığla yüklenmektedir. Gen tedavisinde taşıyıcı olarak rol alan vektörler viral ve viral olmayan vektörler olarak iki sınıfa ayrılır. Viral vektörler, viral olmayan vektörlere göre daha etkin bir gen tedavi fırsatı sunmaktadır. Lentiviral vektörler, güçlü transdüksiyon özelliklerine ve kararlı ifade yeteneklerine sahip olduklarından dolayı gen tedavisinde etkin yöntemlerden biri olarak kabul edilirler. En önemli özelliklerden biri ise sadece bölünen değil, bölünmeyen hücreleri de enfekte edebilme yetenekleridir. Miyeloid türevli büyüme faktörü (MYDGF) kemik iliği kaynaklı monositlerden/makrofajlardan salgılanan parakrin etkili bir proteindir. MYDGF, MAPK1 / 3-, STAT3- ve CCND1 aracılı sinyal yolakları üzerinden endotel hücre çoğalmasını düzenler. PI3K / AKT'ye bağımlı sinyal yolağında ise kardiyak miyosit ölümünü inhibe eder. Bu tezde, miyokardiyal enfarktüs, romatoid artrit, hepatosellüler kanser gibi çeşitli hastalıklara tedavi seçeneği sunmak adına MYDGF'yi lentiviral vektör olarak üretmek, çoğaltmak ve hücreye aktarımını sağlamak amaçlanmıştır. Bu tez çalışmasında kullanılan MYDGF geni, SH-SY5Y hücre hattından elde edilmiştir. MYDGF, pLenti-CMV-GFP-2A-Puro vektörüne klonlanıp uygun paketleme plasmidleri yardımıyla HEK293T hücrelerine verilerek lentiviral vektörü üretilmiş, çoğaltılmış ve hedef hücreye aktarımı sağlanmıştır. Bu çalışmadaki lentiviral vektör yardımı ile MYDGF geninin hücreye aktarılma yöntemi gelecekte yapılacak olan MYDGF geni ile ilgili hastalıların gen tedavisi çalışmalarına yardımcı olacaktır.

Özet (Çeviri)

Gene therapy is a treatment that is defined as the transmission of genes of interest in order to correct genetic disorders in the cells with disease. The therapeutic purpose of these genes called therapeutic genes, is to restore functional loss resulting from mutation or to bring back the level of expression of the missing gene product to physiologically normal levels. The therapeutic gene produced according to needs such as expression enhancement, suppression, or gene repair is carried by vectors, which act like a vehicle to the genetic material transportation, into a variety of cells, tissues and all organs. These carrier vectors in gene therapy are divided into two classes as viral and non-viral vectors. Viral vectors offer a more efficient gene therapy compared to non-viral vectors. Lentiviral vectors are considered to be effective methods in gene therapy because of their strong transduction properties and stable expression abilities. One of the most important features is the ability not only to divide but also to infect non-dividing cells. Myeloid-derived growth factor (MYDGF) is a paracrine-effective protein secreted from bone marrow-derived monocytes / macrophages. MYDGF regulates endothelial cell proliferation through MAPK1 / 3-, STAT3- and CCND1 mediated signaling pathways. In the PI3K / ACT-dependent signaling pathway, it inhibits cardiac myocyte death. The aim of this thesis is to produce, reproduce and transfer the MYDGF as a lentiviral vector to provide treatment alternatives for various diseases such as myocardial infarction, rheumatoid arthritis, and hepatocellular cancer. The MYDGF gene used in this thesis was obtained from SH-SY5Y cell line. The MYDGF was cloned into the pLenti-CMV-GFP-2A-Puro vector and delivered to HEK293T cells with the help of appropriate packaging plasmids, produced as lentiviral vector, amplified and transfered to the target cell. Thanks to this study, in future, the method of transferring the MYDGF gene to the cell with the help of the lentiviral vector will help the gene therapy for the patients with MYDGF generelated disease.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    493341

    Lentiviral mertk üretimi, çoğaltılması ve iletimi

    Lentiviral mertk production, multiplication and transmission

    ASLI GÜNER ÖZTÜRK DEMİR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Mikrobiyolojiİstanbul Medipol Üniversitesi

    Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. SÜLEYMAN YILDIRIM

  2. Tez No

    571399

    Lentiviral vektör aracılıklı GDNF uygulamasının omurilik hasarı sonrası patofizyolojik süreçlerdeki rolleri

    The effects of lentiviral vector mediated gdnf transmission on pathophysiological processes following spinal cord injury

    REYHAN ZEYNEP GÜNDOĞDU ÖZDEMİR

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    Fizyolojiİstanbul Medipol Üniversitesi

    Sinir Bilimi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ERTUĞRUL KILIÇ

  3. Tez No

    484728

    3. jenerasyon hıv tabanlı lentiviral vektörlerin ın vıvo uygulamalar için üretimi ve pürifikasyon yöntemlerinin optimizasyonu

    Optimization of production and purification methods of 3rd generation hiv based lentiviral vectors for in vivo applications

    HAZAL BANU OLGUN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    BiyomühendislikAkdeniz Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SALİH ŞANLIOĞLU

  4. Tez No

    459024

    Intracellular immunodynamics of lentiviral gene delivery in human natural killer cells

    İnsan doğal öldürücü hücrelerde lentı̇vı̇ral gen aktarımının hücre ı̇çı̇ ı̇mmün dı̇namı̇ğı̇

    ECE CANAN SAYİTOĞLU

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2017

    Allerji ve İmmünolojiSabancı Üniversitesi

    Biyoloji Bilimleri ve Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET BATU ERMAN

    YRD. DOÇ. DR. TOLGA SÜTLÜ

  5. Tez No

    405820

    Multiple miyelom hücrelerinde lentiviral yöntemle DEK geni ifadesinin susturulması

    Silencing of DEK gene expression by using lentiral method in multiple myeloma cells

    EMRAH ÖZÇELİK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyolojiGebze Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. AYTEN KANDİLCİ

Geri Dön