Geri Dön

Cystein-S-sulfat'ın sitotoksik ve genototoksik etkilerinin nöronal hücre dizisinde incelenmesi

Examination of cysteine-S-sulfate's cytotoxic and genotoxic effects on neuronal cell line

PDF İndir

  1. Tez No: 552618
  2. Yazar: VOLKAN TEKİN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. VURAL KÜÇÜKATAY
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Fizyoloji, Physiology
  6. Anahtar Kelimeler: Cystein-S-Sulfat, S-Sulfosistein, Genototoksite, Sitotoksite, Comet Analizi, Cysteine-S-Sulfate, Genotoxicity, Cytotoxicity, Comet Assay, SSulfocysteine
  7. Yıl: 2019
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Pamukkale Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Fizyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 74

Özet

Sülfit, kükürt içeren amino asit metabolizması sonucu ortaya çıkan toksik bir moleküldür. Sülfit metaboliti olan Cystein-S-Sulfat (SSC), glutamat benzeri eksitotoksik etki göstermektedir. SSC, Sülfit Oksidaz (SOX) Enzim eksikliği olan hastaların idrarında ve plazmasında yoğun miktarda tespit edilmektedir. SSC toksisitesinin, SOX enzim eksikliğindeki ağır nöropatolojinin sebebi olabileceği düşünülmektedir. Bu çalışmada, SSC molekülünün sitotoksik ve genototoksik etkilerinin HT-22 fare hipokampüs hücre dizini kullanılarak gösterilmesi amaçlanmıştır. %10 fetal bovin serumu (FBS), %1 L-glutamin, 100IU/ml penisilin/10mg/ml streptomisin ve yüksek glukoz içeren DMEM içerisinde çözdürülerek besi yeri olarak kullanılmıştır. Yöntem olarak; sitotoksite ölçümü için WST-1 testi kullanılmıştır. SSC LD50 dozunu belirlemek için hücrelere çeşitli konsantrasyonlarda SSC (her bir kuyucukta 5-300 µM'larda olacak şekilde) uygulanıp WST-1 çalışılmış ve probit analizi yapılmıştır. SSC (LD50 dozu 125 µM) ile birlikte NMDA reseptör antagonisti olan Memantin (20 µM) molekülü, glutamat metabotropik reseptör antagonisti olan LY341495 (10 µM) molekülü uygulanmıştır. Genototoksite analizi için deney gruplarına bahsedilen tedaviler verildikten sonra Comet Analizi yöntemi çalışılmıştır. Comet analizi için Comet Assay IV programı kullanılmıştır. Apopitotik süreci aydınlatmak için Kaspaz-3 aktivite tayini, ilaç verilen gruplarla ve kontrol grubunda çalışılmıştır. Antioksidan kapasiteyi ölçmek için hücre içi Total Glutatyon Ölçümü gerçekleştirilmiştir. Çalışmamız sonucunda, SSC'nin sitotoksik etkileri olduğu ancak Comet Analizi sonucunda genototoksik etkisinin mevcut dozlarda olmadığı gösterilmiştir. SSC'nin kaspaz-3 aktivitesini artırmadığı gözlenmiştir. SSC'nin hücre içi total glutatyon miktarını artırdığı görülmüş, bu durum oksidan strese karşı gelişen kompanzatuar bir mekanizma olarak değerlendirilmiştir.

Özet (Çeviri)

Sulfite is a toxic molecule resulting from sulfur-containing amino acid metabolism. The sulfide metabolite Cysteine-S-Sulfate (SSC) shows an excitotoxic effect like glutamate. SSC is detected in the urine and plasma of patients with Sulfite Oxidase (SOX) enzyme deficiency. It is thought that SSC toxicity may be the cause of severe neuropathology in SOX enzyme deficiency. In this study, the cytotoxic and genototoxic effects of the SSC molecule were aimed to be demonstrated using the HT-22 mouse hippocampus cell line. 10% fetal bovine serum (FBS), 1% L-glutamine, 100IU / ml penicillin / 10mg / ml streptomycin and high glucose DMEM were used as medium. As a method; WST-1 test was used for cytotoxicity measurement. In order to determine the dose of SSC LD50, various concentrations of SSC (with 5-300 300M in each well) were applied to the cells and WST-1 was studied and probit analysis was performed. Memantine (20 µM) molecule which is NMDA receptor antagonist and LY341495 (10 µM) molecule which is glutamate metabotropic receptor antagonist has been applied with SSC (LD50 dose 125 µM). After the mentioned treatments were given to the experimental groups for the genototoxicity analysis, Comet Analysis method was studied. Comet Assay IV program was used for Comet analysis. In order to elucidate the apoptotic process, caspase-3 activity was studied in the drug-treated groups and in the control group. Intracellular Total Glutathione Measurement was performed to measure the antioxidant capacity. In our study, it was shown that SSC had cytotoxic effects but the genototoxic effect was not present in the current doses as a result of Comet Analysis. It was observed that SSC did not increase caspase-3 activity. SSC was found to increase the amount of intracellular total glutathione and was evaluated as a compensatory mechanism against oxidant stress.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    445464

    Alzheimer hastalığında sistein katabolizması: Nörodejenerasyonda sülfit molekülünün olası rolünün araştırılması

    Cysteine catabolism in alzheimer's disease: Investigation of possible role of sulfite molecule on neurodegeneration

    YUSUF EKBİÇ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    NörolojiPamukkale Üniversitesi

    Fizyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. VURAL KÜÇÜKATAY

  2. Tez No

    316965

    Homosistein toksisitesine sülfit molekülünün olası katkısı ve oksidatif stresin rolünün nöroblastama hücre dizisinde incelenmesi

    Possible contribution of sulfide molecule on homocysteine toxicity and investigation of role of oxidative stress in neuroblastoma cell line

    GÜLŞAH GÜNDOĞDU

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    FizyolojiPamukkale Üniversitesi

    Fizyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. VURAL KÜÇÜKATAY

  3. Tez No

    203295

    Sistein türevlerinin tat (transkripsiyon transaktivatörü) aktivitesi üzerindeki etkilerinin araştırılması

    Investigation of the effects of cysteine derivatives on tat (transactivator of transcription) activity

    BAŞAK ÖKDEM

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2008

    BiyokimyaErciyes Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. İLHAN DEMİRHAN

  4. Tez No

    802449

    Sistein-S-sülfat ile tetiklenen hücre ölümünde korteks ve hipokampal nöronlarda kaspaz 3 bağımlı ve kaspaz bağımsız apopitotik sürecin in-vitro incelenmesi

    In vitro investigation of caspase 3-dependent and caspase-independent apopitotic process in cortex and hypocampal neurons in cell death triggered with sistein-S-sulphate

    AYSEL ALPHAN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    NörolojiPamukkale Üniversitesi

    Sinir Bilimi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ESAT ADIGÜZEL

    PROF. DR. VURAL KÜÇÜKATAY

  5. Tez No

    285287

    Kükürt'ün toprak ve bitki besleme yönünden önemi

    The importance of sulfur for soil and plant nutrition

    MEHMET REMZİ KAYMAK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    ZiraatÇukurova Üniversitesi

    Toprak Bilimi ve Bitki Besleme Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. KEMAL YALÇIN GÜLÜT

Geri Dön