Biberde rejenerasyon ve Na-H antiportır ve izopentenil transferaz genlerinin aktarılması üzerine araştırmalar
Regeneration and transformation of pepper plants with Na-H antiporter and isopentenyl transferase genes
- Tez No: 610413
- Danışmanlar: PROF. DR. HÜLYA İLBİ, PROF. DR. NESLİHAN YEŞİM YALÇIN MENDİ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Ziraat, Biyoteknoloji, Agriculture, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Bitki rejenerasyonu, Dolmalık biber, Genetik transformasyon, Yeşil biber, Plant regeneration, Bell pepper, Genetic transformation, Green pepper
- Yıl: 2019
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Bahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Bahçe Bitkileri Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu tez çalışmasında, dört farklı biber hattına (sivri, çarliston, kapya ve dolma) Agrobacterium tumefaciens aracılığıyla kuraklığa ve tuzluluğa tolerans sağlayan PSARKIPT ve AtNHX1 genlerinin aktarılarak, transformasyon ve rejenerasyon protokollerinin geliştirilmesi amaçlanmıştır. Araştırmada, biber hatlarının rejenerasyon ve transformasyon protokolleri geliştirilmiştir. Rejenerasyon denemelerinde somatik embriyogenesis ve organogenesis için farklı protokoller araştırılmıştır. En iyi bitki rejenerasyonları, BA ve IAA'nın farklı kombinasyonlarında, organogenesis denemelerinde elde edilmiştir. En yüksek sürgün gelişimleri ise sivri biberin hipokotil eksplantından %80 oranında 4 mg/l BA+0.5 mg/l IAA'da, çarliston biberin hipokotil eksplantından %80 oranında 3 mg/l BA+0.5 mg/l IAA'da, kapya biberin hipokotil eksplantından %80 oranında 5 mg/l BA+0.5 mg/l IAA'da ve dolma biberin hipokotil eksplantından %84 oranında 5 mg/l BA+0.5 mg/l IAA'da belirlenmiştir. Geliştirilen sürgünler köklendirilmiş ve bitkicikler elde edilmiştir. Transformasyon denemelerinde toplam 3857 eksplanttan 119 sürgün gelişirken, bunların 87 adedi PCR'da pozitif sonuç vermiştir. Transformasyon frekansları ise AtNHX1 geni için kapya biberde %2.44, çarliston biberde %2.53, sivri biberde %2.92 ve dolma biberde %1.18 iken, PSARKIPT için ise kapya biberde %1.73, çarliston biberde %3.74, sivri biberde %2.30 ve dolma biber için ise %1.34 olarak belirlenmiştir. PCR ile doğrulaması yapılan aday transgenik biber hatlarının mikroçoğaltımları gerçekleştirilmiştir. AtNHX1'lı transgenik biber hatlarının mikroğaltım oranları, %81-87 arasında değişirken PSARKIPT'li aday transgenik hatlar ise %80-84 arasında değişim göstermiştir.
Özet (Çeviri)
In this thesis, transformation of PSARKIPT and AtNHX1 genes causing tolerance to drought and salinity by Agrobacterium tumefaciens to four different lines of pepper (Green, banana, capia and bell) was aimed. In the present study, regeneration and transformation protocols of pepper lines were developed. Different protocols for somatic embryogenesis and organogenesis were investigated in regeneration experiments. Optimum plant regeneration was obtained in different combinations of BA and IAA in organogenesis assays. The highest shoot development was determined as 80% from hypocotyl explant of green pepper in 4 mg/l BA+0.5 mg/l and IAA, 80% from hypocotyl explant of banana pepper in 3 mg/l BA+0.5 mg/l IAA, 80% from hypocotyl explant of capia pepper in 5 mg/l BA+0.5 mg/l and 84% from hypocotyl explant of bell pepper in 5 mg/l BA+0.5 mg/l IAA. Then, shoots were rooted and a complete plant forms were obtained. In the transformation experiments, 119 shoots were developed from 3857 explants and 87 of them were produced positive results in PCR analysis. The transformation frequencies for the AtNHX1 gene as 2.44% for capia pepper, 2.53% for banana pepper, 2.92% for green pepper and 1.18% for bell pepper while PSARKIPT gene as 1.73% for capia pepper, 3.74% for banana pepper, 2.30% for green pepper and 1.34% for bell pepper were determined. Micropropagation of the putative transgenic pepper lines confirmed by PCR was performed. While the micropropagation rates of the AtNHX1 putative transgenic pepper lines ranged from 81-87%, the putative transgenic lines with PSARKIPT ranged from 80-84%.
Benzer Tezler
- Biberde (capsicum annuum L.) anter kültürü yoluyla haploid bitki eldesinde farklı besin ortamlarının etkisi
The Effects of different culture media on production of haploid plant via anther culture of pepper
H. FİLİZ BOYACI (YILDIRIM)
Yüksek Lisans
Türkçe
1999
ZiraatAkdeniz ÜniversitesiBahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. NURGÜL SAMANCI
- Genome editing by CRISPR/CAS9 system for capsaicin synthase gene in pepper (Capsicum annuum L.)
Biberde (Capsicum annuum L.) kapsaisin sentaz geni için CRISPR/CAS9 sistemi ile genom düzenleme
FATMANUR KESKİN
Doktora
İngilizce
2026
Biyoteknolojiİzmir Yüksek Teknoloji EnstitüsüMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SAMİ DOĞANLAR
- Genotip,besin ortamı ve stres uygulamalarının biberde androgenesis üzerine etkileri
Effects of genotype, nutrient media and stress treatments on androgenesis in pepper
BÜŞRA ÖZSOY
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
BiyoteknolojiTokat Gaziosmanpaşa ÜniversitesiBahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NAİF GEBOLOĞLU
- Biber (Capsicum annum L.) ıslah materyallerinden dihaploid hatların üretimi
Production of doubled haploid lines from pepper (Capsicum annuum L.) breeding materials
FATMA NUR KAPLAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2012
BiyolojiPamukkale ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ALİ RAMAZAN ALAN
- Üç burun biber genotiplerinde ın vitro androgenesis yöntemi ile dihaploid hatların elde edilmesi
Development of dihaploid lines in some pepper genotypes with in vitro androgenesis
MURAT EMRE ÇELİK
Yüksek Lisans
Türkçe
2016
ZiraatGaziosmanpaşa ÜniversitesiBahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NAİF GEBOLOĞLU