Geri Dön

Oksitosinin takrolimusa maruz kalmış adipoz doku kaynaklı mezenkimal kök hücre hattı üzerine etkilerinin incelenmesi

Investigation of the effect of oxytocin on at-msc exposure with tacrolimus

PDF İndir

  1. Tez No: 619173
  2. Yazar: GÖZDE SIR
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. YİĞİT UYANIKGİL
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2016
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ege Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kök Hücre Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 97

Özet

Takrolimus (FK 506) organ nakillerinde alıcı bireyde immün cevabın oluşmasını engellemek için kullanılan ve bu etkiyi kalsinörin sinyal yolağı üzerinden T hücrelerinin uyarılmasını engelleyerek yapan kemoterapotik bir kimyasaldır. Metabolik olarak incelendiğinde vücutta temel olarak karaciğerde sitokrom P450 enzim sistemi tarafından metabolize edilen takrolimusun farklı hücreler üzerinde yüksek toksik etkilerinin olduğu bilinmektedir. Mezenkimal kök hücreler doku yenilenmesi ve hücresel tedavide kullanılabilmeleri sebebiyle son zamanlarda oldukça önem kazanmışlardır. Bazı klinik vakalarda organ nakli sonrasında hastaya destekleyici amaçla mezenkimal kök hücreler nakledilmektedir. Mezenkimal kök hücreler immünomodülatör etkileri ve rejenerasyona yardımcı olmaları sebebiyle günümüzde gittikçe yaygınlaşan bir kullanıma sahiptir. Oksitosin, primer olarak insanda nöromodülatör olarak işlev gören ve hipofizin nörohipofiz kısmından salgılanan peptit bir hormondur. Oksitosinin hücreler üzerinde oksidatif strese karşı direnç kazandırmak, proliferasyonu arttırmak ve rejenerasyona yardımcı olmak gibi etkileri vardır. Yapılan çalışmada takrolimus adlı etken maddenin, insan adipoz doku kaynaklı mezenkimal kök hücreler üzerindeki sitotoksik etkilerinin araştırılması hedeflenmiştir. Bunun yanında yine aynı şekilde nöral bir peptit hormon olan oksitosinin, adipoz doku kaynaklı mezenkimal hücreler üzerinde takrolimus kaynaklı oluşan toksisiteyi inhibe edip etmediği araştırılmıştır. İnsan adipoz doku kaynaklı mezenkimal kök hücre hattı üzerinde takrolimusun sitotoksik etkisi WST-1 analizi kullanılarak zaman ve doza bağımlı olarak değerlendirilmiştir. Belirlenen zaman ve doz ile yapılan izobologram analizleri sonucunda madde kombinasyonlarının endeks değerleri belirlenmiştir. Takrolimus ve oksitosinin IC50 dozu (72. saat) insan adipoz doku kaynaklı mezenkimal kök hücreler için sırasıyla 17.44 µM ve 13.43 µM olarak belirlenmiştir. İzobologram analizleri sonucu antagonistik olarak belirlenen iki etken maddenin kombinasyonlarının endeks değerleri ED50: 1.418, ED75: 1.25719, ED90: 1.23533 olarak kaydedilmiştir. Apoptotik ve nekrotik ölüm oranlarını belirlemek amacıyla anneksin V yöntemi uygulanmıştır. Analiz sonucunda apoptotik olmayan, erken apoptotik, geç apoptotik, toplam apoptotik ve ölü hücreler hem yüzde olarak hem de hücre/ml olarak hesaplanmıştır. Oksidatif stres ile birlikte oluşan ve reaktif oksijen metabolitlerinin verdiği zararı belirlemek amacıyla lipit peroksidasyonu, süperoksit dismutaz (SOD) aktivitesi, katalaz (CAT) aktivitesi, glutatyon peroksidaz (GPX) aktivitesi ölçülmüştür. Ayrıca antijen-antikor bağlanma prensibine göre çalışan immünofloresan boyama yöntemi ile hücrelerin içerisinde bulunan yapıtaşları ve meydana gelen kimyasal reaksiyonlar gösterilmiştir. Yapılan çalışmada elde edilen veriler doğrultusunda takrolimusun adipoz doku kaynaklı mezenkimal kök hücreler üzerinde oksidatif stres yaratarak hücrelerin erken apoptoza gitmelerine neden olduğu görülmüştür. Oksitosine maruz bırakılan hücrelerde proliferasyonun arttığı gözlemlenirken takrolimus ve oksitosin kombinasyonlarında takrolimusun hücreler üzerindeki sitotoksik etkisinin azaldığı belirlenmiştir. Çalışma sonunda belirlenen dozun alıcıya modifiye edilmesiyle, hem immünosupresif ilacın hem de mezenkimal kök hücrelerin birbirlerinden negatif yönde etkilenmeden immün sistem üzerinde gerekli baskıyı oluşturacakları düşünülmektedir. Bu duruma bağlı olarak organ nakilleri sonrasında uygulanan tedavi protokollerinde destekleyici olarak oksitosinin kullanımına ışık tutacağı da öngörülen sonuçlar içerisindedir.

Özet (Çeviri)

Tacrolimus (FK 506) is a chemotherapeutic agent, which uses calcineurin pathway via inhibiting the stimulation of T cells to prevent the formation of immune response in the recipient individual in organ transplants. Tacrolimus is mainly metabolized in the liver by cytochrome P450 enzyme system and is known to be of high toxic effects on different cells. Mesenchymal stem has recently gained importance because they can be used in cellular therapy and tissue regeneration. In some clinical cases mesenchymal stem cells are transferred into the patient after the organ transplantations in order to support the treatment. Because of their immunomodulatory effects and to assist the regeneration, mesenchymal stem cells has an increasingly prevalent use today. Oxytocin is primarily acting as neuromodulators in humans and is a peptide hormone secreted by the pituitary gland of the neurohypophysis. Oxytocin has such effects on cells as to confer resistance against oxidative stress on cells and to increase the proliferation and help regeneration. Studies on the active substance of tacrolimus were aimed to investigate the cytotoxic effects on human adipose tissue derived mesenchymal stem cells. Besides, likewise a peptide hormone oxytocin neural adipose tissue was investigated in order to reveal the inhibition of the tacrolimus-induced toxicity comprising the mesenchymal cells Cytotoxic effects of tacrolimus on human adipose tissue derived mesenchymal stem cell line were evaluated by WST- 1 assay as time and dose dependent. Isobologram analysis was conducted using the assessed dose and time revealed the index values of substance combinations. IC50 dose of tacrolimus and oxytosin (72 hours) for human adipose tissue derived mesenchymal stem cell were designated 17.44 µM and 13.43 µM, respectively. The results of isobologram analysis for two substance determined as antagonistic and the combination indexes were recorded as ED50: 1.418, ED75: 1.25719, ED90: 1.23533, respectively. In order to determine the apoptotic and necrotic death rate, annexin V method was used. By the help of the result of the analysis, non apoptotic, early apoptotic, late apoptotic, apoptotic and dead cells, both in total and percent cells / ml was calculated. In order to determine the damage caused by the active metabolites that formed with oxidative stress, superoxide dismutase activity (SOD), catalase activity (CAT), glutathione peroxidase activity (GPX) were measured. Also immunofluorescence staining, which works by the the antigen-antibody binding principle was conducted to the show the cell constituents and chemical reactions that take in place. The data obtained in the present study suggest that tacrolimus has been shown to cause early apoptosis on human by creating oxidative stress. Proliferation was observed in cells that exposed to oxytocin and the combination of tacrolimus and oxytocin also decreased cytotoxic effects on cells. By the modification of the determined dose to recipient's will generate the necessary pressure on the immune system without being affected by both immunosuppressive drug and mesenchymal stem cells. Depending on this case, the results obtained in this study will enlighten the use of oxytocin in addition to treatment protocols that applied after the transplantation.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    792218

    The effect of oxytocin on spem longevity in vitro

    Oksitosinin sperm hareketliliginin devam süresine ın vıtro etkisi

    HÜSEYİN BAKİ ÇİFTCİ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    1995

    ZiraatUniversity of Aberdeen

    Zootekni Ana Bilim Dalı

    DR. J. S. M. HUTCHINSON

  2. Tez No

    542531

    Oksitosinin alfa-2 adrenoseptör duyarlılığını ve ağrı eşiğini artırmasının sıçanlarda morfine bağımlılık ve tolerans gelişmesine etkilerinin araştırılması

    Investigation of the effects of oxytocin-induced increase in alpha-2 adrenoceptor sensitivity and pain threshold on the development of morphine dependence and tolerance in rats

    SAFİYE ÖZDEMİR ÇEZİK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Eczacılık ve Farmakolojiİstanbul Üniversitesi

    Tıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NURHAN ENGİNAR

  3. Tez No

    440285

    Oksitosinin polikistik over sendromu modeli geliştirilen sıçanlarda olası tedavi edici etkisinin biyokimyasal ve histolojik olarak gösterilmesi

    Oxytocins biochemical and histological demonstration of the potential therapeutic effects in A rat model of polycystic ovary syndrome

    GÜL ÖZPINAR ÖZTÜRK

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    Kadın Hastalıkları ve DoğumEge Üniversitesi

    Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MURAT ULUKUŞ

  4. Tez No

    625933

    Oksitosinin gürültüye bağlı işitme kayıplarındaki koruyucu ve tedavi edici etkinliğinin araştırılması ve elektron mikroskopik inceleme (Deneysel çalışma)

    Protective and therapeutic effects of oxytocin in acoustic trauma: systemic versus intratympanic administration in rats

    EREN BOLDAZ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    Kulak Burun ve BoğazSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Kulak Burun Boğaz Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ HAKAN AVCI

  5. Tez No

    359214

    Yaygın anksiyete bozukluğu ve panik bozukluk ile serum oksitosin düzeylerinin ilişkisi

    Generalized anxiety disorder and panic disorder relationship with the level of serum oxytocin

    İSMAİL KARAATLI

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    PsikiyatriErciyes Üniversitesi

    Ruh Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MUSTAFA TAYFUN TURAN

Geri Dön