Geri Dön

İnsan adipoz kökenli mezenşimal kök hücre kaynaklı eksozom ve nanoveziküllerin, insan (HGRC1) ve sıçan (SIGC) granüloza hücre hatlarında siklofosfamid ile oluşturulan hasar üzerine koruyucu etkisinin incelenmesi

Investigation of the protective effect of human adipose mesenchymal stem cells-derived exosomes and nanovesicles against cyclophosphamide-induced damage on human (HGRC1) and rat (SİGC) granulosa cell lines

PDF İndir

  1. Tez No: 656091
  2. Yazar: MUSTAFA ÖZTATLICI
  3. Danışmanlar: PROF. DR. MAHMUT KEMAL ÖZBİLGİN
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2020
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Manisa Celal Bayar Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 156

Özet

Amaç: Bu çalışmada, in vitro şartlarda hem insan (HGrC1) hem de sıçan (SIGC) granüloza hücre hatlarında 4-hidroperoksi siklofosfamit (4-HC) ile apoptoz indüklenerek ADMSC'lerden elde edilen eksozom (EXO) ve nanoveziküllerin (NV) antiapoptotik ve terapötik etkilerinin incelenmesi amaçlanmaktadır. Gereç ve Yöntem: ADMSC'lerden EXO ve NV'ler izole edilerek karakterizasyonları flow sitometri yöntemi kullanılarak gerçekleştirildi. EXO ve NV'ler, HGrC1 ve SIGC hücre hatları ile hem tek başlarına hem de 4-HC ile birlikte kokültüre edilerek hücre canlılığı MTT yöntemi kullanılarak tespit edildi. Tüm uygulamalar sonrası apoptoz (Kaspaz 3, Bax ve Bcl-2) ve hücre proliferasyon (Ki-67) belirteçlerinin hem protein hem de mRNA ifade seviyeleri indirekt immunositokimya ve qRT-PCR yöntemleri ile analiz edildi. Ayrıca tüm gruplardaki hücre döngüsü analizleri flow sitometri yöntemi kullanılarak gerçekleştirildi. Bulgular: ADMSC EXO ve NV'lerinin tek başlarına HGrC1 ve SIGC hücre hatları ile kokültüre edilmesi sonrası granüloza hücre proliferasyonlarını indükledikleri saptandı. Her iki hücre hattında da 4-HC grubuna kıyasla 4-HC ile birlikte EXO ve NV ile kokültüre edilen gruplardaki Kaspaz 3 ve Bax ifadelerinin azaldığı Bcl-2 ve Ki-67 ifadelerinin ise arttığı tespit edildi. Buna ek olarak EXO ve NV'ler ile kokültüre edilen gruplarda S fazında tutulan hücre yüzdelerinin azaldığı, G2/M fazındaki hücre yüzdelerinin ise arttığı gözlendi. Sonuçlar: EXO ve NV'lerin, her iki granüloza hücre hattı üzerinde de sitostatik veya sitotoksik etkilerinin olmadığı, 4-HC'nin apoptotik etkisine karşı koruyucu kapasitelerinin olduğu ve bununla birlikte granüloza hücre proliferasyonunu indükledikleri gözlendi. Bu çalışma ile literatürde ilk defa ADMSC'lerden yapay olarak elde edilen NV'lerin, EXO'lar gibi benzer terapötik etkinliklerinin olduğu gösterildi. Bu sonuçlar, EXO ve NV'lerin, POI'nin önlenmesi ve tedavisinde etkili ve yeni bir yöntem olabileceğini düşündürmektedir.

Özet (Çeviri)

Aim: In this study, it is aimed to investigate the antiapoptotic and therapeutic effects of exosomes (EXO) and nanovesicles (NV) derived from ADMSCs by inducing apoptosis with 4-hydroperoxy cyclophosphamide (4-HC) in both human (HGrC1) and rat (SIGC) granulosa cell lines under in vitro conditions. Material and method: EXOs and NVs were isolated from ADMSCs and their characterization was performed using flow cytometry method. EXOs and NV's were cocultured with HGrC1 and SIGC cell lines both alone and together with 4-HC and cell viability was determined by using the MTT method. After all applications, both protein and mRNA expression levels of apoptosis (Caspase 3, Bax and Bcl-2) and cell proliferation (Ki-67) markers were analyzed by indirect immunocytochemistry and qRT-PCR methods. Moreover, the cell cycle analyzes in all groups were performed by using flow cytometry method. Results: It was determined that EXOs and NVs derived from ADMSC induced granulosa cell proliferation after coculturing with HGrC1 and SIGC cell lines. In both cell lines it was found that Caspase 3 and Bax expressions decreased and Bcl-2 and Ki-67 expressions increased in the groups which cocultured EXOs and NVs together with 4-HC compared to the only 4-HC group. In addition, it was observed that the percentage of cells kept in S phase decreased and the percentage of cells in the G2/M phase increased in the groups cocultured with EXOs and NVs. Conclusions: It was found that EXOs and NVs had no cytostatic or cytotoxic effects on both granulosa cell lines, they had protective capacities against the apoptotic effect of 4-HC and they also induced granulosa cell proliferation. It was found that EXO and NV do not have cytostatic or cytotoxic effects on both granulosa cell lines, they have protective capacities against the apoptotic effect of 4-HC and they also induced granulosa cell proliferation. With this study, it was shown for the first time in the literature that artificially generated NVs from ADMSCs have similar therapeutic effects like EXOs. These results suggest that EXO and NV's can be an effective and new method in the prevention and treatment of POI.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    851815

    Mezenkimal kök hücrelerin ve eksozomların oosit matürasyonuna etkisinin incelenmesi: Deneysel çalışma

    Investigation of the effect of mesenchymal stem cells and their exosomes on oocyte maturation: An experimental study

    DAMLA AKOĞULLARI ÇELİK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Histoloji ve EmbriyolojiManisa Celal Bayar Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HAFİZE SEDA VATANSEVER

  2. Tez No

    352853

    Adipöz doku kaynaklı mezenşimal kök hücrelerin uterin skarların tedavisindeki yeri

    The effect of adipose tissue derived mesenchymal stem cells on regeneration in uterine scars

    RUKİYE ADA BENDER

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    Kadın Hastalıkları ve DoğumKırıkkale Üniversitesi

    Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. AYKAN YÜCEL

  3. Tez No

    443935

    Hipoksik ve normoksik ortam şartlarında osteojenik nesile farklılaştırılmış insan adipoz kökenli mezenkimal kök hücrelerin gen/mikrorna ifade profillerinin karşılaştırmalı analizi

    Comparative evaluation of the gene/microrna expression profiles of hypoxic and normoxic conditions on the osteogenic differentiation of adipose-derived mesenchymal stem cells

    OYA ÇELİKAĞ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    BiyolojiAnkara Üniversitesi

    Disiplinlerarası Kök Hücre ve Yenileyici Tıp Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AYŞE ESER ELÇİN

  4. Tez No

    375145

    Adipoz kökenli kök hücre ile yapay kıkırdak gelişiminin incelenmesi

    Examination of the development of artificial cartilage with adipose derived stem cells

    SERKAN BARIŞKAN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    Kulak Burun ve BoğazCelal Bayar Üniversitesi

    Kulak Burun Boğaz Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. KIVANÇ GÜNHAN

  5. Tez No

    508491

    Segmental periferik sinir defektlerinin onarımında otolog sinir grefti, epinöral kılıf ve kök hücre ile indüklenmiş prefabrike sinir grefti kullanımının karşılaştırılması

    Comparison of results of autogenous nerve graft, epineural sheath and prefabricated nerve graft induced by stem cell in repair of segmental peripheral nerve defects

    GAMZE KURDAL

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    Plastik ve Rekonstrüktif CerrahiSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Plastik Cerrahi Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. OĞUZ KAYIRAN

Geri Dön