Geri Dön

Small scale lipase production from Cryptococcus albidusD24 and its immobilization

Cryptococcus albidus D24 ile küçük ölçekli lipaz üretimi veimmobilizasyonu

  1. Tez No: 673477
  2. Yazar: ABDUSSAMED URAS
  3. Danışmanlar: PROF. DR. DİLEK KAZAN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyomühendislik, Bioengineering
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2018
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Marmara Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 75

Özet

Bu çalışmada, Cryptococcus albidus D24 tarafından üretilen lipaz enziminin besi yeri optimizayonu gerçekleştirilmiştir. Öncelikli olarak, Plackett-Burman (PB) istatistik tasarım yöntemi kullanılarak, C. albidus tarafından sentezlenen lipaz enziminin, üretiminde kullanılan besi yeri bileşenleinden, en etkin olabilecekler belirlenmiştir. Lipaz üretimi 28 oC sıcaklıkta ve pH 7.0 değerinde ve 250 rpm karıştırma hızında gerçekleştirilmiştir. 144 saat inkübasyon sonucunda elde edilen aktivite değerleri incelendiğinde, PB istatistiksel tasarım sonucunda, en yüksek lipaz aktivitesinin (19.34 U/ml/min) elde edildiği besi yeri içeriği: Tween 80 (X2) 2.5% (v/v) ve (g/L) Peptone (X4) 8.0, maya özütü (X6) 7.5, sığır özütü (X7) 7.5, malt özütü (X8) 7.5, amonyum klorür (X9) 6.0, sodium nitrat (X10) 1.5, amounyum nitrat (X12) 6.0, amonyum hidrojen karbonat (X13) 6.0, MgSO4.7H2O (X15) 1.0 ve KH2PO4 (X16) 2.0 dir. PB istatistiksel tasarım sonucuna göre, konsantrasyon etkisi (concentration effect, CE) ikinin üzerinde ve pozitif etki eden bileşenler, ki bunlar sırası ile amounyum klorür (CE=7.1587), zeytin yağı (CE=3.5544), amounyum hidrojen karbonat (CE=3.0747) ve tripton (CE=2.1427), en etkin bileşenler olarak belirlenmiştir. Bu doğrultuda, zeytin yağı (X3), tripton (X5), amounyum klorür (X9) ve amounyum hidrojen karbonat (X13) seçilerek, tepki yüzeyi metodolojisi (Response Surface Methodology, RSM) ile bu bileşiklerin en uygun konsantrasyonları belirlenmiştir. Yapılan deneysel çalışma sonuçlarına göre, maksimum lipaz aktivitesi (12.03 U/ml/min), zeytin yağı 1.5% (v/v) ve (g/L) tryptone 3.0, amonyum klorür 7.5 ve amonyum hidrojen karbonat 12 içeren besiyerinde, aynı fermentasyon koşullarında elde edilmiştir. RSM sonucu ile lipaz aktivitesi daha az gibi görünse de, 1 unite enzim üretmek için kullanılan besi yeri bileşenlerinin maliyeti PB tasarımında 0.104 Avro iken, RSM de sadece 0.0277 Avro olarak hesaplanmıştır. Diğer bir değişle, sadece X3, X5, X9 ve X13 ile C albidus D24 den lipaz üretiminin maliyeti daha uygundur. Bu çalışmaların yanı sıra, farklı materyaller ile D24 lipaz enziminin immobilizasyonu da çaışılmıştır. Bu tez ile, ilk defa C. albidus D24 suşundan lipaz üretimi optimize edilmiştir.

Özet (Çeviri)

In this thesis, optimization of the medium components used for the production of lipase enzyme from Cryptococcus albidus D24 was performed by using the Plackett-Burman (PB) statistical design method. Since the medium optimization is the most substantial step for enzyme productions, the first step included the determination of the most important nutrients that effect the production of lipase enzyme from D24 strain. Lipase production was carried out at a temperature of 28 °C, at pH of 7.0 and at a stirring rate of 250 rpm. According to PB statistical design, the highest lipase activity (19.34 U/ml/min) was obtained with the medium including Tween 80 (X2) 2.5% (v/v), and (g/L) Peptone (X4) 8.0, Yeast Extract (X6) 7.5, Beef Extract (X7) 7.5, Malt Extract (X8) 7.5, Ammonium chloride (X9) 6.0, Sodium nitrate (X10) 1.5, Ammonium nitrate (X12) 6.0, Ammonium hydrogen carbonate (X13) 6.0, MgSO4.7H2O (X15) 1.0 and KH2PO4 (X16) 2.0 at the end of 144 hours of cultivation period. Regarding the concentration effect (CE) values obtained from PB design, ammonium chloride (CE=7.1587), olive oil (CE=3.5544), ammonium hydrogen carbonate (CE=3.0747) and tryptone (CE=2.1427) were evaluated as the more effective nutrients among the 16 compounds studied. After that, the optimum concentrations of these effective compounds were experimented with Response Surface Methodology (RSM). According to the experimental results, the medium containing olive oil (X3) 1.5% (v / v) and (g/L) tryptone (X5) 3.0, ammonium chloride (X9) 7.5 and ammonium hydrogen carbonate (X13) 12 yielded the maximum lipase activity (12.03 U/ml/min) compared to other concentration of four compound studied. Although the maximum lipase activity obtained with the RSM methodology was lower than that obtained by PB design, the cost of the nutrient components used to produce 1 unit enzyme is 0.104 Euro in the PB design, while only 0.0277 Euro RSM is spent. In other words, production of lipase using compounds coded X3, X5, X9 and X13 is cost effective process. Additionally, different immobilization materials were also used to investigate D24 lipase vi immobilization. To our knowledge, this is the first research work to optimize lipase production from C. albidus D24

Benzer Tezler

  1. Recovery of succinic acid for bio-based C4 bifunctional building block production

    Başlık çevirisi yok

    ÇAĞRI EFE

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2011

    BiyokimyaTechnische Universiteit Delft (Delft University of Technology)

    PROF. DR. L. A. M. VAN DER WIELEN

    DR. A. J. J. STRAATHOF

  2. Kakao yağının serbest yağ asitliği düzeyini etkileyen proses parametrelerinin incelenmesi

    Investigation of process parameters affecting the level of free fatty acid of cocoa butter

    BÜŞRA ÇİÇEK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Gıda Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Gıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NEŞE ŞAHİN YEŞİLÇUBUK

  3. Arabidopsis Thaliana lipases: Cloning and expression in Pichia pastoris

    Arabidopsis Thaliana lipazları: Klonlama ve Pichia pastoris'te ekspresyonu

    EBRU KAYMAK

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2008

    BiyolojiSabancı Üniversitesi

    Biyoloji Bilimleri ve Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. UGUR SEZERMAN

  4. Küratif amaçla ameliyat edilen mide kanserli hastalarda uzun dönemde ekzokrin pankreas yetersizliği

    Long-term exocrine pancreas insufficiency in patients WHO had surgery for stomach cancer wi̇th curative purposes

    ERSAN ÖZKARDEŞLER

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    Genel CerrahiSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Genel Cerrahi Ana Bilim Dalı

    UZMAN DR. ALİ SÜRMELİOĞLU