İnsan meme kanseri hücre hattında (MCF-7) AKT inhibitörünün apoptozis üzerine etkisi
Effect of AKT inhibitor on apoptosis in human breast cancer (MCF-7) cell line
- Tez No: 721532
- Danışmanlar: PROF. DR. ORHAN ERDOĞAN
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biyoteknoloji, Genetik, Biochemistry, Biotechnology, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2022
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 96
Özet
Amaç: Bu çalışmada, AKT fosforilasyonunu inhibe eden bir benzimidazol bileşiği olan AKT inhibitörü-IV (5-(2-Benzotiazolil)-3-etil-2-[2-(metilfenilamino)etenil]-1-fenil-1H-benzimidazolyum iyodür)'ün MCF-7 insan meme kanseri hücre hattı üzerine sitotoksik ve apoptotik etkilerinin meme kanseri tedavisinde kemoterapötik ilaç olarak kullanılan tamoksifenle kıyaslanarak belirlenmesi amaçlanmıştır. Yöntem: Amacımız kapsamında, MCF-7 hücreleri hücre kültür ortamında çoğaltıldı ve etkilerini araştırmak istediğimiz AKT inhibitörü-IV'ün 0,1, 1, 1,5, 2,5 ve 5 µM'lık konsantrasyonları ve tamoksifenin 5, 10, 25 ve 50 µM' lık konsantrasyonları ile muamele edildi. Ardından yapılan MTT testi ile MCF-7 hücrelerinin % canlılık oranları ve uygulanan her iki test örneği de gruplarının IC50 değerleri belirlenmiştir. Sonrasında test bileşiklerinin apoptotik hücre ölümü üzerine etkisi kolorimetrik olarak CDDE yöntemi ile analiz edilmiştir. Test bileşiklerinin apoptotik yolaklarda görev alan AKT, BCL-2, BAX ve Kaspaz-3 gen ekspresyonları üzerine etkisi ise Real-Time PCR yöntemi ile değerlendirilmiştir. Bulgular: AKT inhibitörü-IV ve tamoksifen uygulanan MCF-7 hücrelerinde hücre canlılığının doza bağımlı olarak azaldığı belirlenmiştir. IC50 değerleri AKT inhibitörü-IV için 1,1 µM, tamoksifen için ise 5,2 µM olarak hesaplanmıştır. MCF-7 hücrelerine uygulanan tedaviler apoptoz oranını önemli oranda artırmıştır. Apoptozun kolorimetrik değerlendirmesi sonucunda AKT inhibitörü-IV ve tamoksifen uygulanan hücrelerde kontrol grubu hücrelerine kıyasla apoptozun sırasıyla 5,9 ve 3,65 kat arttığı gözlenmiştir. Ayrıca her iki tedavi grubunda da, BCL-2 ve AKT gen ifadesini azaldığı, BAX ve Kaspaz-3 gen ifadelerinin arttığı belirlenmiştir. Sonuç: Kanser tedavisinde son yıllarda yeni teröpatiklerin keşfi ve etkinliğinin araştırılması önem arz etmektedir. Bu çalışma ile AKT inhibitörü-IV'ün in vitro ortamda MCF-7 hücreleri üzerinde güçlü sitotoksik etkinliğe sahip olduğu, hücreleri apoptotik hücre ölümüne yönlendirdiği ve bazı apoptotik gen ekspresyonları üzerinde önemli etkilere sahip olduğu sonucuna varılmıştır.
Özet (Çeviri)
Purpose: In this study, it was aimed to determine the cytotoxic and apoptotic effects of AKT inhibitor-IV, a benzimidazole compound that inhibits AKT phosphorylation, on MCF-7 human breast cancer cell line by comparing with tamoxifen, which is used as a chemotherapeutic drug in the treatment of breast cancer. Method: Within the scope of our purpose, MCF-7 cells were grown in cell culture medium and treated with various concentrations AKT inhibitor IV (0,1, 1, 1,5, 2,5 and 5 µM) and tamoxifene (5, 10, 25 and 50 µM). Changes in cell viability percentges of AKT inhibitor-IV and tamoxifen treated MCF-7 cells were determined by MTT assay, and half maximal inhibitory concentrations (IC50) calculated. Afterwards, the effect of test compounds on apoptotic cell death was analyzed colorimetrically by CDDE method. The effect of test compounds on the expression of AKT, BCL-2, BAX and Caspase-3 genes involved in apoptotic pathways was evaluated by Real-Time PCR method. Findings: It was determined that the cell viability decreased in a dose-dependent manner in MCF-7 cells treated with AKT inhibitor-IV and tamoxifen, and the IC50 values were calculated as 1,1 µM for AKT inhibitor-IV and 5.2 µM for tamoxifen. Both test samples applied to MCF-7 cells significantly increased the rate of apoptosis. As a result of the colorimetric evaluation of apoptosis, it was observed that apoptosis increased 5.9 and 3.65 times, respectively, in AKT inhibitor-IV and tamoxifen-treated MCF-7 cells compared to control group cells. In addition, it was determined that BCL-2 and AKT gene expression decreased and BAX and Caspase-3 gene expressions increased in both treatment groups. Results: In the treatment of cancer, it is important to discover new therapeutic agents and to investigate their efficacy in recent years. With this study, it was concluded that AKT inhibitor-IV has strong cytotoxic activity on MCF-7 cells in vitro, directs cells to apoptotic cell death and has significant effects on some apoptotic gene expressions.
Benzer Tezler
- Difraktaik, vulpinik ve evernik asitin insan meme kanseri hücre hatlarında WNT/β-KATENİN ve PI3K/AKT/mTOR sinyal yolakları aracılı antimigrasyon etkisinin araştırılması
Investigation of the WNT/β-CATENİN and PI3K/AKT/mTOR signalling pathway-mediated anti-i̇mmigration effects of difractaic, vulpinic and evernic acid in human breast cancer cell lines
FEYZA SÖNMEZ AYDIN
Doktora
Türkçe
2024
GenetikAtatürk ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HARUN BUDAK
- Aril hidrazonal bileşikleri üzerinden sentezlenen inhibitörlerin 4T1 fare meme kanseri hücre hattında antikanser özelliklerinin incelenmesi ve er+ meme kanseri hücre hattında etkilerinin karşılaştırılması
Investigation of anti-cancer properties of inhibitors synthesis from aryl hydrazonal compounds in 4T1 mouse breast cancer cell line and comparison of their effects on er+ breast cancer cell line
ELİF CANSU ABAY
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
Tıbbi BiyolojiSağlık Bilimleri ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ HANİ H.S. ALSAADONİ
DR. ÖĞR. ÜYESİ KÜBRA AÇIKALIN COŞKUN
- Vulpinik asitle farklı kemoterapotik ilaçların meme kanseri hücre hatları üzerinde sinerjik antikanser etkilerinin gen ve protein seviyesinde araştırılması
Investigation of synergistic anticancer effects of vulpinic acid and different chemotherapeutic drugs on breast cancer cell lines at gene and protein levels
ESMA KÜBRA KAĞAN YENİÇERİ
Doktora
Türkçe
2024
BiyokimyaErzincan Binali Yıldırım ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AHMET ALTAY
PROF. DR. HARUN BUDAK
- Meme kanserinde antiöstrojen ilaçların hipoksik koşullarda VEGF ekspresyonu üzerindeki etkileri
Effect of antiestrogenic drugs on VEGF expression in breast cancer cell lines under hypoxi̇c condi̇ti̇ons
MEHTAP ŞAHİN
- hsa-miR-497 as a modulator of the expression in the presence or absence of CHRNA5 in breast cancer
mir-497 meme kanserinde, CHRNA5 ile alakalı, önemli bir regülatör mü?
BAŞAK ÖZGÜRSOY
Yüksek Lisans
İngilizce
2017
Biyolojiİhsan Doğramacı Bilkent ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ÖZLEN KONU KARAKAYALI