ARPE-19 hücrelerinde anti-vegf'ler ile birlikte resveratrol kullanımının etkilerinin araştırılması
Investigation of effects of combined usage of anti-VEGF's and resveratrol on ARPE-19 cells
- Tez No: 726551
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ MEHMET ARGUN
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Göz Hastalıkları, Eye Diseases
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2022
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Süleyman Demirel Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 87
Özet
Yaşa Bağlı Maküla Dejenerasyonu (YBMD) görme kaybı ile karakterize progresif bir hastalıktır. Patogenezinde vasküler endotelyal büyüme faktörü (VEGF) önemli yere sahiptir. Bu nedenle tedavide Anti-VEGF ajanlar kullanılmaktadır. Ancak literatürde bu ajanların makülada atrofi gelişimi üzerinde etkileri bulunduğuna dair bilgiler bulunmaktadır. Bu tez çalışmasında Anti-VEGF ajanlardan ranibizumab, aflibercept ve ziv-afliberceptin resveratrol ile kombinasyonunun ARPE-19 hücreleri üzerindeki etkilerinin in-vitro olarak araştırılması amaçlanmıştır. Bu amaç doğrultusunda sitozolik ve mitokondriyal reaktif oksijen türlerinin üretimi (SitROS ve MitROS), mitokondriyal membran depolarizasyonu (MitDep), kaspaz-3, kaspaz-8 ve kaspaz-9, hücre canlılığı, apoptozis ve VEGF-A düzeylerindeki değişimler konfokal mikroskop, mikro tabaka okuyucu (plate reader) ve ELISA yöntemleri kullanılarak ölçülmüştür. ARPE-19 hücreleri Kontrol, Kobalt Klorür (Co), Resveratrol (RES), Ranibizumab (RAN), Aflibercept (AFB), Ziv-aflibercept (ZAB), RAN+RES, AFB+RES, ZAB+RES, RAN+RES+Co, AFB+RES+Co ve ZAB+RES+Co şeklinde 12 gruba ayrıldı. Kontrol grubu dışındaki gruplardaki hücreler RES, RAN, AFB veya ZAB (yalnız veya kombine edilerek) ile 24 saat boyunca inkübasyon sonrasında ilgili gruplar kobalt klorür (CoCl2) ile 24 saat daha inkübe edildiler. Çalışmamızda Anti-VEGF'ler yalnız uygulandıklarında MitROS, MitDep ve SitROS'u artırarak oksidatif stresi artırdı. Kaspaz-3,8 ve 9 düzeyini ve apoptozisi artırıp hücre canlılığını azalttılar. Resveratrol ile Anti-VEGF'ler kombine uygulandığında resveratrol Anti-VEGF'lerin artırdığı oksidatif stresi azalttı. Kaspaz-3 ve 9 seviyelerini ve apoptozisi azaltarak hücre canlılığını artırdı. Sonuçlarımız in-vitro ortamda ranibizumab, aflibercept ve ziv-afliberceptin oksidatif stresi artırıcı ve hücre canlılığını azaltıcı etkileri olduğunu göstermiştir. Resveratrol bu ilaçlara kombine edildiğinde bu etkileri önleyerek hücre canlılığını artırmıştır.
Özet (Çeviri)
Age-Related Macular Degeneration (AMD) is a progressive disease characterized by vision loss. Due to the Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) having a crucial role in the pathogenesis of AMD, Anti-VEGF agents are used for treatment. However, it is indicated that those agents may cause the progression of atrophy development in the macula. It is aimed to investigate the effects of Anti-VEGF agents ranibizumab, aflibercept and ziv-aflibercept combined with resveratrol on ARPE-19 cells in-vitro. In accordance with this purpose alterations in the levels of cytosolic reactive oxygen spices (CytROS), mitochondrial reactive oxygen spices (MitROS), mitochondrial membrane depolarization (MitDep), caspase-3, caspase-8 and caspase-9, cell viability, apoptosis and VEGF-A were measured by using confocal microscope, plate reader and ELISA methods in this study. The cells were divided into twelve groups described as follow: Control, Cobalt Chloride (Co), Resveratrol (RES), Ranibizumab (RAN), Aflibercept (AFB), Ziv-aflibercept (ZAB), RAN+RES, AFB+RES, ZAB+RES, RAN+RES+Co, AFB+RES+Co and ZAB+RES+Co. Except for the Control group (48 hours incubation with no treatment), all the other groups were treated with resveratrol, ranibizumab, aflibercept or ziv-aflibercept (alone or combined) for 24 hours then the cells in the merely related groups were incubated with Cobalt Chloride (CoCl2) for 24 hours more. It was revealed that alone treatment with an Anti-VEGF agent causes increment on cellular oxidative status level by prompting the MitROS, MitDep and SitROS levels. Thus, it increased the caspase-3, caspase-8 and caspase-9 levels resulting in enhancing apoptosis or on the contrary decreasing cell survival. Consequently, our findings indicate that ranibizumab, aflibercept and ziv-aflibercept may have a provoker effect on cellular oxidative stress and a suppressor effect on apoptosis in-vitro. Besides, it is concluded that combination with resveratrol has valuable and non-negligible potential for intercepting the devastating effects of Anti-VEGF agents.
Benzer Tezler
- Asetil l karnitin'in insan retinal pigment epiteli (ARPE-19)hücrelerinde oluşturulan hipoksi modelinde VEGF veoksidatif stres üzerine etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of acetyl carnite on VEGF and oxidative stress in the HYPOXY model created in ARPE-19 cells
ALİ DAL
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2020
Göz HastalıklarıFırat ÜniversitesiGöz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ ONUR ÇATAK
- İnsan retinal pigment epitel (ARPE-19) hücrelerinde paeonol'ün miR-155 ve miR-210 aracılı hipoksi sinyalindeki rolü
The role of paeonol in miR-155 and miR-210 mediated hypoxia signaling in human retinal pigment epithelial (ARPE-19) cells
NAZLI ŞENAY BEŞİRİK
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
BiyoteknolojiTrakya ÜniversitesiBiyoteknoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ZEYNEP BANU DOĞANLAR
- Development of topical drug formulations for the treatment of ocular neovascularization
Göz neovaskularızasyonunun tedavisi için topikal ilaç formülasyonları geliştirilmesi
ABUZER ALP YETİŞGİN
Doktora
İngilizce
2023
BiyomühendislikSabancı ÜniversitesiMalzeme Bilimi ve Nanomühendislik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ÖZLEM KUTLU
DR. ÖĞR. ÜYESİ SİBEL ÇETİNEL
- Development of a nanogel based topical drug formulation for the treatment of neovascular age-related macular degeneration(nAMD)
Noevasküler yaşa bağlı makular dejenerasyon tedavisi için topikal bir ilaç formülasyonunun geliştirilmesi
HANDE EDA ŞUTOVA
Yüksek Lisans
İngilizce
2022
BiyomühendislikSabancı ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ SİBEL ÇETİNEL
DR. ÖĞR. ÜYESİ ÖZLEM KUTLU
- İnsan retina pigment epiteli hücre kültüründe (ARPE-19) anti-VEGF ilaçların(bevacizumab, ranibizumab, aflibercept) sitotoksisite derecelerinin belirlenmesi ve oluşturdukları oksidatif stresin total antioksidan kapasite çalışılarak ölçülmesi
Determination of cytotoxicity levels of anti-vegf drugs (bevacizumab, ranibizumab, aflibercept) in human retinal pigment epithelial cell culture (ARPE-19) and measurement of oxidative stress produced by total antioxidant capacity
SHARGIYYA BAYRAMOVA
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2018
Göz HastalıklarıSağlık Bilimleri ÜniversitesiGöz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. NİL İREM UÇGUN ZEKİ FİKRET