Geri Dön

Makrofajlarda interferon stimülatör genleri (STING) sinyal yolağının indüklenmesinin Leishmania infantum'a karşı gelişen immun yanıta etkilerinin In vitro incelenmesi

Induction of interferon stimulator genes (STING) signaling pathway in macrophages In vitro examination of the effects on the immune response to Leishmania infantum

PDF İndir

  1. Tez No: 894344
  2. Yazar: NESRİN DELİBAŞI
  3. Danışmanlar: PROF. DR. ABDULLAH İNCİ, DOÇ. DR. AHMET EKEN
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Allerji ve İmmünoloji, Parazitoloji, Allergy and Immunology, Parasitology
  6. Anahtar Kelimeler: L. infantum, Visseral leishmaniasis, STING, RAW 264.7, L. infantum, Visceral leishmaniasis, STING, RAW 264.7
  7. Yıl: 2024
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Erciyes Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Parazitoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Parazitoloji Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 113

Özet

MAKROFAJLARDA İNTERFERON STİMÜLATÖR GENLERİ (STING) SİNYAL YOLAĞININ BASKILANMASININ LEISHMANIA INFANTUM'A KARŞI GELİŞEN İMMUN YANITA ETKİLERİNİN İN VİTRO İNCELENMESİ Nesrin DELİBAŞI T.C. Erciyes Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü Veteriner Parazitoloji Anabilim Dalı Doktora Tezi, Nisan 2024 Danışman: Prof. Dr. Abdullah İNCİ ÖZET Leishmaniasis'in klinik formlarının arasında en ağır seyreden formu visceral leishmaniasis (VL) olup tüm dünyada insanlarda ve hayvanlarda yüksek mortalite ve morbidite ile kendini göstermektedir. Leishmania türleri konak immun mekanizmalarından kaçınmak için geniş ölçekte stratejiler geliştirmişlerdir. Leishmania parazitleri ile enfekte olguların yaklaşık %90'ı subklinik VL semptomları gösterirler ve Leishmania antijenleri ve immunregülatör mekanizmalara karşı TH1-aracılı immun yanıtın gelişmesi ile ilgili efektör mekanizmalar arasında bir balans sağladıkları için asemptomatik olarak nitelenirler. İn vitro deney modelleri konak-parazit etkileşiminde immün sistemin regülasyonu araştırmalarında kullanılmaktadır. Biyoteknolojideki gelişmeler ışığında çeşitli patojenlerin yol açtığı enfeksiyonlarda sitozolik DNA duyarlı sinyalin bir birleşen noktası olarak interferon genlerinin stimülatörü (STING) konak-patojen etkileşimine katıldığı belirlenmiştir. Sitozolik DNA veya cyclic dinükleotidlerin cyclic GMP-AMP synthase (cGAS) gibi DNA reseptörleriyle tanınmasıyla, STING uyarılır, fosforile olur, ER'den perinükleer alana translokalize olur ve tip 1 interferonların transkripsiyonuna yol açar. Günümüze kadar yapılan araştırmalar STING'in çeşitli patojen enfeksiyonlarında konak yanıtlarının modülasyonuna dahil olduğunu ve patojene bağlı olarak farklı fonksiyonlara yol açtığını göstermiştir. Günümüze kadar L. infantum enfeksiyonuyla ilgili olarak STING aracılı immun yanıtların in vitro değerlendirildiği bir araştırma yapılmamıştır. Bu çalışma in vitro zeminde Raw 264.7 fare makrofaj hücre hattı kullanılarak L. infantum enfeksiyonunda STING aracılı immun yanıtların ve ilgili yangısal sitokin sekresyonlarının araştırılması sonucu enfeksiyonun 12. saatinden itibaren IFN-β, IFN-γ, IL-12, IL-6 ve TNF-α ekspresyonlarında artış gözlenmiştir. Ligand ile stimüle edilmeyen makrofajlarda ve 2,3 cGAMP ligand ile stimüle edilen makrofajlarda kontrol grubuna göre 3., 6., 12 ve 24 saat gerçekleştirilen enfeksiyon grupları kendi aralarında değerlendirilmiş olup bu değerlendirme sonucunda enfeksiyon saati arttıkça, enfeksiyon oranı ve parazitemi oranlarında artış tespit edilmiştir. Protein düzeyinde yapılan analizlerde ise cGAS ve STING'in ekspresyonlarında kontrol makrofaja göre, saat dilimleri arasında bir artış gözlense de bu artış istatistiksel olarak anlamlı bulunmamıştır (p>0,05). NFKB proteinlerinin ekspresyonunda ise 2,3 cGAMP ligand ile stimüle edilen makrofajlarda kontrol grubuna göre, p ≤0.05 düzeyinde bir azalış bulunmuştur. Sonuç olarak bu tez çalışmasında STING sinyal yolağının uyarılması saatlere bağlı olarak enfeksiyon ve parazit alımını artırmış, genel olarak da enfeksiyonun 12. saatinden itibaren immün yanıtlarda bir artışa sebebiyet vermiştir. Parazitin konak makrofaj hücreleri içindeki gelişim süreci ve immunopatolojisi de göz önüne alındığında enfeksiyonun ilerleyen dönemlerini içeren hem in vitro hem de in vivo araştırmalarla STİNG'in L. infantum enfeksiyonundaki rolünün ayrıntılı olarak araştırılmasına ihtiyaç bulunmaktadır.

Özet (Çeviri)

IN VITRO EXAMINATION OF THE EFFECTS OF SUPPRESSION OF THE INTERFERON STIMULATOR GENES (STING) SIGNAL PATHWAY IN MACROPHAGES ON THE IMMUNE RESPONSE AGAINST LEISHMANIA INFANTUM Nesrin DELİBAŞI Erciyes University, Graduate School of Health Science Department of Veterinary Parasitology PhD Thesis, Nisan 2024 Supervisor: Prof. Dr. Abdullah İNCİ ABSTRACT Among the clinical forms of leishmaniasis, visceral leishmaniasis (VL) is the most severe form, with high mortality and morbidity in humans and animals worldwide. Leishmania species have evolved strategies to evade host immune mechanisms on a large scale. Approximately 90% of cases infected with Leishmania parasites show subclinical VL symptoms and are characterized as asymptomatic because they maintain a balance between Leishmania antigens and effector mechanisms involved in the development of a TH1-mediated immune response against immunoregulatory mechanisms. In vitro experimental models have been used to study the regulation of the immune system in host-parasite interactions. In the light of advances in biotechnology, it has been determined that the stimulator of interferon genes (STING) participates in host-pathogen interaction as a junction of cytosolic DNA-sensitive signaling in infections caused by various pathogens. Upon recognition of cytosolic DNA or cyclic dinucleotides by DNA receptors such as cyclic GMP-AMP synthase (cGAS), STING is stimulated, phosphorylated, translocalized from the ER to the perinuclear space and leads to the transcription of type 1 Interferons. To date, studies have shown that STING is involved in the modulation of host responses to various pathogen infections and functions differently depending on the pathogen. To date, there has been no in vitro evaluation of STING-mediated immune responses to L. infantum infection. In this study, STING-mediated immune responses and related inflammatory cytokine secretions were investigated in L. infantum infection using Raw 264.7 mouse macrophage cell line in vitro and an increase in IFN-β, IFN-γ, IL-12, IL-6, TNF-α expression was observed from the 12th hour of infection. In macrophages not stimulated with ligand and macrophages stimulated with 2,3 cGAMP ligand, the infection groups performed at 3, 6, 12 and 24 hours were evaluated among themselves compared to the control group and as a result of this evaluation, as the infection time increased, the infection rate and parasitemia rates increased. In protein level analyses, although an increase in the expression of cGAS and STING was observed between the time periods compared to control macrophages, this increase was not statistically significant (p>0.05). In the expression of NFKB proteins in macrophages stimulated with 2,3 cGAMP ligand a decrease was found at the p ≤0.05 level compared to the control group. In conclusion, in this thesis, stimulation of the STING signaling pathway increased infection and parasite uptake in a time-dependent manner and generally caused an increase in immune responses from the 12th hour of infection. Considering the developmental process and immunopathology of the parasite in host macrophage cells, there is a need to further investigate the role of STING in L. infantum infection with both in vitro and in vivo studies involving later stages of infection.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    421249

    The effect of Helicobacter felis on macrophage polarization

    Helicobacter felis'in makrofaj polarizasyonu üzerine etkisi

    ASLI KORKMAZ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2015

    Allerji ve İmmünolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. AYÇA SAYI YAZGAN

  2. Tez No

    744072

    Makrofajlarda interlökin-33'ün JAK/STAT yolaklarına etkilerinin araştırılması

    Investigation of the effects of interleukin-33 on JAK/STAT pathways in macrophages

    MEHMET ZAFER KALAYCI

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Allerji ve İmmünolojiGazi Üniversitesi

    İmmünoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. VEDAT BULUT

  3. Tez No

    474825

    Makrofajlarda neopterin ve IP-10 üretimlerine interlökin 33'ün etkileri

    Interleukin-33 effects of neopterine and IP-10 products in macrophages

    RAHİME AKSOY

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    Allerji ve İmmünolojiGazi Üniversitesi

    İmmünoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. VEDAT BULUT

  4. Tez No

    156918

    Leishmania tropika majör ile enfekte edilmiş makrofajlarda antimon'un proinflamatuar sitokinler ile reaktif nitrojen ve oksijen metabolitleri üzerine etkisinin araştırılması

    To investigate the effects of antimonial compounds in macrophage infected with Leishmania tropica major on proinflammatory cytokines and reactive nitrogene and oxygen species

    HÜSEYİN KELEŞ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2004

    BiyokimyaHarran Üniversitesi

    Biyokimya ve Klinik Biyokimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. ABDURRAHİM KOÇYİĞİT

  5. Tez No

    412818

    Plevra sıvılarında IL-8 ve neopterin düzeyinin tanısal değeri

    Di̇agnosti̇c value of IL-8 and neopteri̇n levels i̇n pleural flui̇ds

    AYŞE UYANMIŞ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    Göğüs HastalıklarıNecmettin Erbakan Üniversitesi

    Göğüs Hastalıkları ve Tüberküloz Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. OKTAY İMECİK

Geri Dön