Ratlarda akut böbrek hasarında melatonin uygulamasının apoptotik genler üzerine etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of melatonin administration on apoptotic genes in acute renal injury in rats
- Tez No: 931629
- Danışmanlar: DOÇ. DR. TANSEL SAPMAZ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2025
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Sağlık Bilimleri Üniversitesi
- Enstitü: Hamidiye Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Amaç: Bu tez çalışmasının amacı; ratlarda oluşturulan akut böbrek hasarı (ABH) modelinde melatonin uygulamasının morfolojik parametrelere etkisinin histopatolojik olarak, apoptotik genlerdeki (p53, PUMA, NOXA, Bax ve Bcl-2) ekspresyon seviyeleri üzerine etkisinin immünfloresan ve moleküler olarak ve böbrek fonksiyon testleri üzerine etkisinin biyokimyasal olarak incelenmesidir. Gereç ve Yöntem: 28 adet rat 4 gruba ayrıldı. Kontrol; hiçbir işlem yapılmadı. Geri kalan tüm gruplara 45 dk böbrek iskemi, ardından 24 saat reperfüzyon uygulanarak ABH modeli oluşturuldu. ABH; etken madde verilmedi. ABH+Çözücü; %1'lik ethanol, ABH+Melatonin; 20 mg/kg melatonin intraperitoneal (ip) verildi. 24 saat sonunda ratlar sakrifiye edildi ve böbrek dokuları çıkarıldı. Histopatolojik inceleme için H&E boyama ve PAS boyama yöntemleri uygulandı. İmmunfloresan inceleme ile p53, PUMA, NOXA, Bax ve Bcl-2 proteinleri işaretlendi. Moleküler inceleme için ayni genlerin ekspresyonları kantitatif gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (qRT-PCR) metodu ile belirlendi. Biyokimyasal inceleme için serumda kan üre nitrojen (BUN) ve kreatinin analizleri yapıldı. Bulgular: Kontrole kıyasla ABH'de histopatolojik hasarların arttığı görüldü (p<0,001), melatonin uygulamasıyla azaldı. p53, PUMA ve Bax proteinlerinin pozitif hücre indeksleri (PHI) ABH grubunda anlamlı derecede artarken, Bcl-2'nin PHI'sı azalmıştı (p<0.05). NOXA PHI'sında herhangi bir farklılık yoktu (p>0,05). Apoptotik genlerin qRT-PCR ile ölçülen ekspresyon seviyelerinde anlamlı farklılık görülmedi (p>0,05). Serum kreatinin seviyesinin ABH grubunda anlamlı arttığı tespit edildi (p<0,001) ancak serum BUN seviyesinde anlamlı bir değişiklik gözlenmedi (p>0,05). Veriler Kruskall Wallis H testi ile analiz edilirken, grup içi karşılaştırmalarda Dunn Testi ve Bonferroni düzeltmesi uygulandı. Sonuç: Melatoninin, akut böbrek hasarında böbrekte görülen apoptozu, NOXA yerine PUMA genini düzenleyerek, p53-PUMA-Bax-Bcl-2 sinyal yolağı aracılığı ile düşürdüğünü öngörmekteyiz.
Özet (Çeviri)
Aim: This thesis study aims to investigate the effect of melatonin application on morphological parameters histopathologically, on the expression levels of apoptotic genes (p53, PUMA, NOXA, Bax, and Bcl-2) immunofluorescently and molecularly, and on renal function tests biochemically in the acute kidney injury (AKI) model created in rats. Materials and Methods: 28 rats were divided into 4 groups. Control; no procedure was performed. The remaining groups were subjected to 45 min of renal ischemia followed by 24 h of reperfusion to create an AKI model. AKI; no active substance was administered. AKI+Solvent; 1% ethanol, AKI+Melatonin; 20 mg/kg melatonin was administered intraperitoneally (IP). At the end of 24 hours, the rats were sacrificed and their kidney tissues were removed. H&E staining and PAS staining methods were applied for histopathological examination. Immunofluorescence examination marked p53, PUMA, NOXA, Bax, and Bcl-2 proteins. For molecular examination, expressions of the same genes were determined by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). Blood urea nitrogen (BUN) and creatinine analyses were performed in serum for biochemical examination. Results: Histopathological damage was observed to be increased in AKI compared to control (p<0.001) and decreased with melatonin application. While the positive cell index (PCI) of p53, PUMA, and Bax proteins was significantly increased in the AKI group, the PCI of Bcl-2 was decreased (p<0.05). There was no difference in NOXA PCI (p>0.05). No significant difference was observed in the expression levels of apoptotic genes measured by qRT-PCR (p>0.05). Serum creatinine level was found to increase significantly in the AKI group (p<0.001), but no significant change was observed in serum BUN level (p>0.05). Data were analyzed using the Kruskall Wallis H test, while the Dunn Test and Bonferroni correction were applied for intragroup comparisons. Conclusion: We predict that melatonin reduces apoptosis in acute kidney injury by regulating the PUMA gene instead of NOXA, via the p53-PUMA-Bax-Bcl-2 signaling pathway.
Benzer Tezler
- Deneysel olarak oluşturulan tıkanma sarılıklarında eritrosit morfolojisi
Başlık çevirisi yok
M.ZEKİ TÜR
- Ratlarda massif ince barsak rezeksiyonu sonrası oluşan hiperasiditeye trunkal vagotominin etkileri
Başlık çevirisi yok
SALİH Z. PİŞKİN
- Pre ve postanal dönemlerin farklı evrelerinde olan ratlarda (rattus norvegicus) epifiz kıkırdağının gelişimi ve enzimatik aktivitesinin araştırılması
Başlık çevirisi yok
İSMAİL ÜSTÜNEL
Yüksek Lisans
Türkçe
1988
MorfolojiAkdeniz ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. RAMAZAN DEMİR