Bromelain ve 3-4 dihydroxyphenylglycol antioksidanlarının, gümüş ve çinko oksit nanopartiküllerinin tuj koçu spermasının dondurulması üzerine etkileri
Effects of bromelain and 3,4-dihydroxyphenylglycol antioxidants, silver and zinc oxide nanoparticles on the cryopreservation of tuj ram semen
- Tez No: 1022033
- Danışmanlar: PROF. DR. SAVAŞ YILDIZ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Veteriner Hekimliği, Veterinary Medicine
- Anahtar Kelimeler: Koç sperması, kriyoprezervasyon, bromelain, 4- dihydroxyphenylglycol, gümüş nanopartikülü, çinko oksit nanopartikülü, antioksidan, Ram semen, cryopreservation, bromelain, 4-dihydroxyphenylglycol, silver nanoparticles, zinc oxide nanoparticles, antioxidant
- Yıl: 2026
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Kafkas Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Dölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Dölerme ve Suni Tohumlama Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu çalışmanın amacı, bromelain ve 3,4-dihydroxyphenylglycol (DHPG) antioksidanları ile gümüş (AgNP) ve çinko oksit nanopartiküllerinin (ZnO NP) farklı dozlarda koç sperması sulandırıcısına ilave edilmesinin, spermanın dondurulabilirliği ve eritme sonrası spermatolojik özellikler üzerine etkilerinin araştırılmasıdır. Araştırmada 5 baş Tuj ırkı koç kullanılmış, her koçtan haftada iki kez olmak üzere toplam 10 ejekülat elektroejakülatör yöntemiyle alınmıştır. Spermatolojik muayeneleri yapılan ejekülatlar pooling yapıldıktan sonra dokuz eşit hacme ayrılmıştır. Her bir hacim, tris-sitrik asit-fruktoz-yumurta sarısı esaslı sulandırıcı ile kontrol (K) ve uygulama gruplarına [AgNP 0,125 mg/mL (G1), AgNP 0,250 mg/mL (G2), ZnO NP 0,10 mg/mL (G3), ZnO NP 0,15 mg/mL (G4), bromelain 0,05 mg/mL (G5), bromelain 0,10 mg/mL (G6), DHPG 0,05 mg/mL (G7) ve DHPG 0,10 mg/mL (G8)] göre sulandırılmıştır. Sulandırılan spermalar sıvı azotta dondurularak muhafaza edilmiş ve eritme sonrasında motilite, ölü-canlı spermatozoa oranı, anormal spermatozoa oranı, hipoozmotik şişme testi (HOST), total antioksidan kapasite (TAC), total oksidan kapasite (TOC), CASA kinematik parametreleri ile akrozom bütünlüğü ve mitokondriyal membran fonksiyonu flow sitometrik yöntemlerle değerlendirilmiştir. Eritme sonrası yapılan değerlendirmelerde, total motilitenin G6 ve G7 gruplarında kontrol grubuna göre istatistiksel olarak daha yüksek olduğu belirlenmiştir (p<0,05). HOST değerleri bakımından bromelain ve DHPG uygulanan gruplarda plazma membran bütünlüğünün daha iyi korunduğu, en yüksek değerlerin G6 ve G7 gruplarında elde edildiği saptanmıştır (p<0,05). Eritme sonrası ölü spermatozoa oranı ile anormal spermatozoa oranının G6 ve G7 gruplarında kontrol grubuna göre daha düşük olduğu belirlenmiştir (p<0,05). Flow sitometrik analizlerde değerlendirilen akrozom bütünlüğü ve mitokondriyal membran fonksiyonunun bromelain ve DHPG uygulamalarıyla önemli ölçüde korunduğu, özellikle G6 ve G7 gruplarının kontrol ve nanopartikül uygulama gruplarına göre daha yüksek değerlere sahip olduğu tespit edilmiştir (p<0,05). TAC düzeylerinin G6 ve G7 gruplarında arttığı, buna karşılık TOC düzeylerinin aynı gruplarda kontrol grubuna göre daha düşük olduğu belirlenmiştir (p<0,05). CASA analizlerinde değerlendirilen total motilite, progresif motilite ve diğer kinematik parametreler bakımından bromelainin 0,10 mg/mL dozunun uygulandığı G6 grubunun en başarılı sonuçları verdiği, DHPG'nin 0,05 mg/mL'lik dozunun kullanıldığı G7 grubunun ise G6 grubuna yakın sonuçlar gösterdiği saptanmıştır. Sulandırıcılara gümüş ve çinko oksit nanopartikülü ilavesinin bazı spermatolojik özelliklerde kontrol grubuna göre iyileşme sağladığı, ancak bromelain ve DHPG kadar belirgin koruyucu etki oluşturmadığı belirlenmiştir. Sonuç olarak, bromelain ve DHPG ilavesinin koç spermasının kriyoprezervasyonu sırasında meydana gelen kriyo hasarın azaltılmasında ve eritme sonrası sperm fonksiyonlarının korunmasında gümüş ve çinko oksit nanopartiküllerine göre daha etkili olduğu belirlenmiştir. Özellikle 0,10 mg/mL dozda kullanılan bromelainin (G6) sperm motilitesi, membran bütünlüğü, akrozom bütünlüğü, mitokondriyal membran fonksiyonu, oksidatif stres parametreleri ve CASA kinematik özelliklerinin korunmasında en başarılı sonuçları sağladığı, bunu 0,05 mg/mL DHPG (G7) grubunun izlediği tespit edilmiştir. Elde edilen bulgular, bromelainin koç spermasının kriyoprezervasyonunda etkili bir sulandırıcı katkısı olarak kullanılabileceğini, yine DHPG'nin de sperm fonksiyonlarının korunmasına önemli katkılar sağlayabileceğini ortaya koymaktadır.
Özet (Çeviri)
The aim of this study was to investigate the effects of supplementing a ram semen extender with different concentrations of the antioxidants bromelain and 3,4-dihydroxyphenylglycol (DHPG), as well as silver nanoparticles (AgNPs) and zinc oxide nanoparticles (ZnO NPs), on semen freezability and post-thaw spermatological characteristics. Five Tuj rams were used in the study, and a total of 10 ejaculates were collected from each ram twice weekly using an electroejaculator. Following spermatological evaluation, the ejaculates were pooled and divided into nine equal aliquots. Each aliquot was diluted with a Tris-citric acid-fructose-egg yolkbased extender and assigned to either the control (C) group or one of the treatment groups: AgNP 0.125 mg/mL (G1), AgNP 0.250 mg/mL (G2), ZnO NP 0.10 mg/mL (G3), ZnO NP 0.15 mg/mL (G4), bromelain 0.05 mg/mL (G5), bromelain 0.10 mg/mL (G6), DHPG 0.05 mg/mL (G7), and DHPG 0.10 mg/mL (G8). The diluted semen samples were cryopreserved in liquid nitrogen, and after thawing, sperm motility, live/dead sperm ratio, abnormal sperm ratio, hypoosmotic swelling test (HOST), total antioxidant capacity (TAC), total oxidant capacity (TOC), CASA kinematic parameters, acrosome integrity, and mitochondrial membrane function were evaluated using flow cytometric techniques. Post-thaw assessments demonstrated that total motility was significantly higher in the G6 and G7 groups than in the control group (p < 0.05). Regarding HOST results, plasma membrane integrity was better preserved in the bromelainand DHPG-treated groups, with the highest values observed in G6 and G7 (p < 0.05). The proportions of dead and morphologically abnormal spermatozoa after thawing were significantly lower in the G6 and G7 groups compared with the control group (p < 0.05). Flow cytometric analyses revealed that acrosome integrity and mitochondrial membrane function were markedly preserved following bromelain and DHPG supplementation, with G6 and G7 exhibiting significantly higher values than both the control and nanoparticle-treated groups (p < 0.05). TAC levels were significantly increased in G6 and G7, whereas TOC levels were significantly lower than those of the control group (p < 0.05). CASA analysis showed that the G6 group, supplemented with 0.10 mg/mL bromelain, produced the most favorable results in terms of total motility, progressive motility, and other kinematic parameters, while the G7 group, supplemented with 0.05 mg/mL DHPG, yielded results comparable to those of G6 (p < 0.05). Although supplementation with silver and zinc oxide nanoparticles improved certain spermatological parameters compared with the control group, their protective effects were less pronounced than those achieved with bromelain and DHPG. In conclusion, bromelain and DHPG supplementation were more effective than silver and zinc oxide nanoparticles in reducing cryodamage during ram semen cryopreservation and preserving post-thaw sperm function. In particular, bromelain at a concentration of 0.10 mg/mL (G6) provided the greatest protection of sperm motility, plasma membrane integrity, acrosome integrity, mitochondrial membrane function, oxidative stress parameters, and CASA kinematic characteristics, followed by DHPG at 0.05 mg/mL (G7). These findings suggest that bromelain may serve as an effective extender supplement for ram semen cryopreservation, while DHPG may also provide substantial protection of sperm function during the cryopreservation process.
Benzer Tezler
- Kilo vermeye yardımcı olarak kullanılan bromelain içeren ürünler, bazı bitkisel gıda takviyeleri ve çaylarda sibutramin kaynaklı tağşişatın araştırılması
Investigation of the potential adulterant sibutramine in some bromelain-containing products, herbal dietary supplements, and teas in the management of weight loss
SİBEL YILMAZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
Eczacılık ve FarmakolojiAnkara ÜniversitesiFarmakognozi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ALEV ÖNDER
- Ananas meyve ve atıklarından bromelain (C39H66N2O29) ekstrakt eldesi ile uygulama alanlarının araştırılması
Production of bromelain (C39H66N2O29) extract from pineapple fruit and wastes and investigation of application areas
ASLIHAN TURHAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
Kimya MühendisliğiYıldız Teknik ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMEK DERUN
- The effects of bromelain enzyme addition to high lipid and high protein diets on nutritional physiology, tissue histology and gene expression in rats
Yüksek lıpıdlı ve yüksek proteınlı dıyetlere bromelaın enzımının eklenmesının sıçanlarda beslenme fızyolojısı, doku hıstolojısı ve gen ekspresyonu üzerındekı etkılerı
OMAR SALAH AHMED AHMED
Doktora
İngilizce
2025
Beslenme ve DiyetetikErciyes ÜniversitesiTarım Bilimleri ve Teknolojileri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. YUSUF KONCA
- Alüminyum toksikasyonunda bromelainin antioksidan sistem, homosistein ve mineral düzeylerine etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of bromelain on antioxidant system, homocysteine, and mineral concentrations in aluminum toxicity
ÇAĞATAY ÖZBEY
- Farklı deproteinizasyon ajanlarının ve termal siklusun fissür örtücülerin makaslama bağlanma dayanımı üzerine etkisi: İn Vitro çalışma
The effect of different deproteinization agents and thermal cycling on the shear bond strength of fissure sealants: An In Vitro study
MERVE TATAR
Diş Hekimliği Uzmanlık
Türkçe
2025
Diş HekimliğiTokat Gaziosmanpaşa ÜniversitesiÇocuk Diş Hekimliği Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ ALEM COŞGUN