Nöroblastom hücrelerinde lncRNA SLC7A11-AS1 ve miR-181a-5p etkileşiminin ferroptoz üzerine etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of lncRNA SLC7A11-AS1 and miR-181a-5p interaction on ferroptosis in neuroblastoma cells
- Tez No: 1024079
- Danışmanlar: PROF. DR. SELDA KABADERE
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Fizyoloji, Physiology
- Anahtar Kelimeler: Ferroptoz, Nöroblastom, Ferroptosis, Neuroblastoma
- Yıl: 2026
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Eskişehir Osmangazi Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Fizyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Nöroblastomda kemoterapi direnciyle mücadelede, demir bağımlı lipid peroksidasyonuyla karakterize ferroptoz yolağı umut verici bir hedeftir. Bu çalışmada, insan nöroblastom SH-SY5Y hücrelerinde lncRNA SLC7A11-AS1 ve hsa-miR-181a-5p'nin, rekabetçi endojen RNA (ceRNA) mekanizması üzerinden SLC7A11 ekspresyonunu ve hücresel redoks dengesini nasıl düzenlediği araştırılmıştır. Bu amaçla hücrelere SLC7A11-AS1 siRNA, miR-181a-5p inhibitör ve negatif kontrolleri uygulanarak; MTT, Ferrostatin-1 (Fer-1) kurtarma deneyleri, qRT-PCR, Western blot ve biyokimyasal analizler (GSH, GSH-Px, MDA, demir, TAS, TOS) gerçekleştirilmiştir. Bulgular, SLC7A11-AS1'in GSH'ı artırıp MDA ve demiri azaltarak antiferroptotik, miR-181a-5p'nin ise SLC7A11 genini hedefleyerek antioksidan savunmayı zayıflatıp oksidatif stresi artırarak ferroptotik bir rol üstlendiğini göstermiştir. İkili transfeksiyon verileri, SLC7A11-AS1'in miR-181a-5p'yi süngerleyerek SLC7A11 gen ifadesini desteklediğini kanıtlamıştır. GSH-Px ve total SLC7A11 protein düzeylerinde anlamlı değişim izlenmemekle birlikte kombine gruptaki (siRNA+inhibitör) hücre ölümünün Fer-1 ile geri döndürülebilmesi, hedeflenen eksenin hücreyi ferroptoza sürüklediğini doğrulamıştır. ACSL4 proteinindeki paradoksal sonuçlar ise hücrenin oksidatif strese karşı geliştirdiği adaptif bir sağkalım stratejisi veya miR-181a-5p tarafından hedeflenme ihtimali olarak değerlendirilmiştir. Sonuç olarak, SLC7A11-AS1/miR-181a-5p/SLC7A11 aksının nöroblastomda ferroptoza duyarlılığı etkileyen kritik bir regülatör ve terapötik hedef olabileceği gösterilmiştir.
Özet (Çeviri)
Targeting the ferroptosis pathway, characterized by iron-dependent lipid peroxidation, represents a promising strategy to overcome chemotherapy resistance in neuroblastoma. This study investigated how lncRNA SLC7A11-AS1 and hsa-miR-181a-5p regulate SLC7A11 expression and cellular redox balance in human neuroblastoma SH-SY5Y cells via a competitive endogenous RNA (ceRNA) mechanism. For this purpose, cells were treated with SLC7A11-AS1 siRNA, miR-181a-5p inhibitor, and their respective negative controls. MTT assays, Ferrostatin-1 (Fer-1) rescue experiments, qRT-PCR, Western blot, and biochemical analyses (GSH, GSH-Px, MDA, iron, TAS, and TOS) were performed. The findings revealed that SLC7A11-AS1 exerts an antiferroptotic role by increasing GSH levels while reducing MDA and iron accumulation. Conversely, miR-181a-5p was shown to have a pro-ferroptotic role by targeting the SLC7A11 gene, weakening antioxidant defenses and increasing oxidative stress. Dual transfection data confirmed that SLC7A11-AS1 supports SLC7A11 gene expression by sponging miR-181a-5p and limiting its availability. Although no significant changes were observed in GSH-Px and total SLC7A11 protein levels, the fact that Fer-1 successfully rescued the severe cell death observed in the combined treatment group (siRNA+inhibitor) confirmed that the targeted axis functionally drives the cells toward ferroptosis. The paradoxical results regarding the ACSL4 protein were interpreted as an adaptive survival strategy developed by the cell against oxidative stress, or as the possibility of being targeted by miR-181a-5p. In conclusion, the SLC7A11-AS1/miR-181a-5p/SLC7A11 axis has been demonstrated to be a critical regulator affecting ferroptosis sensitivity and a potential therapeutic target in neuroblastoma.
Benzer Tezler
- Hepatosellüler kanserde önemli bir LncRNA olan MIR100HG'nin transkripsiyonel regülasyonu
Transcriptional regulation of MIR100HG, an important LncRNA, in hepatocellular cancer
AYLİN TÜRKOĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
Moleküler TıpBalıkesir ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FERAY KÖÇKAR
- SH-SY5Y (nöroblastom) hücrelerinde HN1'in hücre döngüsünün düzenlenmesine katkısı
HN1 influences cell cycle regulation in SH-SY5Y (neuroblastoma) cell line
SEVDA ALTUN
Doktora
Türkçe
2023
BiyomühendislikEge ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KEMAL SAMİ KORKMAZ
- Galangin ve kuersetinin nöroblastom hücrelerinde hücre canlılığına ve proliferasyona etkileri
Galangin and quercetin efects on cell viability and proliferation in neuroblastoma cells
EDA ALTIN
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
OnkolojiAydın Adnan Menderes ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KEMAL ERGİN
- Arı sütünün SH-SY5Y nöroblastom hücrelerinde romo1 yolu üzerinden pentilenetetrazol kaynaklı nörotoksisite üzerindeki nöroprotektif etkisi
Neuroprotective effect of royal jelly on pentylenetetrazole-induced neurotoxicity via romo1 pathway in SH-SY5Yneuroblastoma cells
GÜLİSTAN KAVAK
Yüksek Lisans
Türkçe
2025
Moleküler TıpVan Yüzüncü Yıl ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. YASİN TÜLÜCE
- Azometin grubu içeren heterosiklik bileşiklerin nöroblastom hücrelerinde hücre döngüsü ve apoptoz yolağı üzerine etkisinin in vitro ve in siliko incelenmesi
In vitro and in silico investigation of the effect of heterocyclic compounds containing azomethine group on cell cycle and apoptosis pathway in neuroblastoma cells.
GÜLCİHAN ÇINAR
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
BiyokimyaSivas Cumhuriyet ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. YAVUZ SİLİĞ