Geri Dön

Taşıyıcısız immobilizasyon yöntemiyle çapraz bağlı glukoz oksidaz (GOD) enzim agregatlarının ve kristallerinin sentezi ve karakterizasyonu

Synthesization and characterization of cross-linking glucose oxidase (GOD) enzyme aggregates and crystals with carrier-free immobilization methods

  1. Tez No: 179534
  2. Yazar: YASEMİN İSPİRLİ
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. HAKAN AYHAN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Kimya, Chemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Glukozoksidaz, Enzim İmmobilizasyonu, Çapraz Bağlı Enzim Agregatları, Çapraz Bağlı Enzim Kristalleri, Glucoseoxidase, Enzyme Immobilization, CLEA, CLEC
  7. Yıl: 2008
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Muğla Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 94

Özet

Sunulan bu çalışmanın amacı; Aspergillus Niger Glukozoksidaz enziminin çapraz bağlı enzim agregatları ve enzim kristalleri olmak üzere iki farklı yöntem kullanarak taşıyıcısız immobilizasyonunu gerçekleştirmek, optimum immobilizasyon koşullarını ve immobilize enzim setlerinin özelliklerini belirlemektir. Çalışmanın ilk bölümünde glukozoksidaz enziminin çapraz bağlı enzim agregatları yöntemi ile taşıyıcısız immobilizasyonu yapılmıştır. İmmobilizasyon, çözünmüş enzimden, farklı çöktürücüler ve farklı çapraz bağlayıcılar ile farklı ortam koşulları varlığında gerçekleştirilmiştir. İmmobilizasyon işlemlerinin ardından glukoz varlığında gösterdikleri aktivite ise uygun aktivite tayin yöntemi ile saptanmıştır. Bu amaçla yapılan çalışmaların sonunda optimum koşullar; başlangıç enzim derişimi 0.05 mg/ml, sıcaklık 25?C, çöktürücü tipi BSA, çöktürücü derişimi 5 mg/ml, çapraz bağlayıcı tipi glutaraldehit, çapraz bağlayıcı derişimi ise % 2 (h/h) olarak saptanmıştır. Çalışmanın ikinci bölümünde ise, glukozoksidaz enziminin çapraz bağlı enzim kristalleri yöntemi ile taşıyıcısız immobilizasyonu yapılmıştır. İmmobilizasyon; çözünmüş enzimden, amonyum sülfat ve glutaraldehit varlığında gerçekleştirilmiştir. İmmobilizasyon işlemlerinin ardından glukoz varlığında gösterdikleri aktivite ise uygun aktivite tayin yöntemi ie saptanmıştır. Bu amaçla yapılan çalışmaların sonunda optimum koşullar; başlangıç enzim derişimi 0.75 mg/ml, sıcaklık 4 ? 1 ?C, çöktürücü derişimi %75, çapraz bağlayıcı derişimi ise % 2 (h/h) olarak saptanmıştır. Lineweaver-Burk grafikleri ile hesaplanan kinetik parametreler ise; serbest enzim için Km=6,65 mM; Vm=61,18 mM.min-1; çapraz bağlı enzim agregatları için Km= 11,37 mM; Vm=19,67 mM.min-1 ; çapraz bağlı enzim kristalleri için Km= 15,45 mM; Vm=21,09 mM.min-1 ise şeklindedir.

Özet (Çeviri)

The aim of the submitted study is to realize carrier-free immobilization (as cross-linking enzyme aggregates and crystals) of Aspergillus Niger Glucose Oxidase enzyme, to determinate the optimum immobilization conditions, to investigate the properties of immobilized enyzme sets. In the first step of the submitted study, carrier-free enzyme immobilization was realised by forming cross-linked glucose oxidase enzyme aggregates (CLEA?s). Different precipitants and different cross-linking agents were used with different media conditions during forming CLEA?s. The ?immobilized enzyme activity? was specified by activity determination method with in glucose The optimum conditions found at the end of the experiments for the cross-linked enzyme aggregates are: the initial enzyme concentration, 0.05 mg/ml; the optimum temperature, 25?C; the precipitant type, BSA; the precipitant concentration, 5 mg/ml; the cross-linker type, glutaraldehyde; the cross-linker concentration, 2% (v/v). In the second step of the submitted study, carrier-free enzyme immobilization was realised by forming cross-linked glucose oxidase enzyme crystals (CLEC?s). Ammonium sulfate was used as a precipitant and glutaraldehyde was used as a cross-linking agent during forming CLEC?s. The ?immobilized enzyme activity? was specified by activity determination method with in glucose.The optimum conditions found at the end of the experiments for the cross-linked enzyme crystals are: the initial enzyme concentration, 0.75 mg/ml; the optimum temperature, 4 ? 1 ?C; the precipitant concentration, 75%; the cross-linker concentration, 2% (v/v).The kinetic parameters were calculated by Lineweaver-Burk plots such as; Km=6,65 mM; Vm=61,18 mM.min-1 for native enzyme, Km= 11,37 mM; Vm=19,67 mM.min-1 for cross-linking enzyme aggregates and Km= 15,45 mM; Vm=21,09 mM.min-1 for cross-linking enzyme crystals.

Benzer Tezler

  1. Tekstil atık suyunda hidrojen peroksidin enzimatik giderimi, modellenmesi ve tasarımı

    Enzymatic removal of hydrogen peroxide in textile waste water, modelling and designing

    GÜLÇİN ÖZEVCİ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    BiyoteknolojiMuğla Üniversitesi

    Çevre Bilimleri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. HAKAN AYHAN

    YRD. DOÇ. DR. OĞUZ AKPOLAT

  2. Poliakrilat bazlı hidrojel matrislerin sentezi ve enzim immobilizasyonunda kullanımı

    Synthesis of polyacrylate based hydrogel matrices and their use in enzyme immobilization

    HÜSEYİN ÇİÇEK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    1998

    Kimya MühendisliğiHacettepe Üniversitesi

    Kimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. S. ALİ TUNCEL

  3. Modifiye edilmiş kitosan boncuklar üzerine katalaz enziminin immobilizasyonu

    Immobilization of catalase on modify chitosan beads

    ESRA BAŞAK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    BiyokimyaCelal Bayar Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. TÜLİN AYDEMİR

  4. Taşıyıcılı ve taşıyıcısız sistemlerde peroksidaz enziminin karakterizasyonu

    Characterization of immobilized enzyme systems on carrier-bound and carrier-free systems

    CEREN TOPÇULAR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2006

    BiyomühendislikHacettepe Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. HAKAN AYHAN