Geri Dön

WNT/beta-catenin signaling pathway activation in epithelial cancers

Epitel kanserlerinde WNT/beta-catenin yolağının aktivasyonu

PDF İndir

  1. Tez No: 180667
  2. Yazar: KHEMAİS BENHAJ
  3. Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. KAMİL CAN AKÇALI, PROF. DR. MEHMET ÖZTÜRK
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2006
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: İhsan Doğramacı Bilkent Üniversitesi
  10. Enstitü: Mühendislik ve Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Karaciğer Kanserinde Wnt yolaklarını çalışırken, öncelikle insan hepatomahücre hatlarını hepatositlere özel biyojik işaretler (marker) kullanarak özelleşmiş veaz özelleşmiş olarak sınıflara ayırdık. Wnt/β-katenin sinyal aktivitesi TCF/LEFraportör testi yapılarak ölçüldü. Standart Wnt/β-katenin sinyalleri, tamamenözelleşmiş hücre hatlarının 80%'inde, ve az özelleşmiş hücre hatlarının %14'ündesürekli aktifti. Bunun yanısıra, mutant S33Y β-katenin'in ektopik sentezi, tamamenözelleşmiş HCC hücre hatlarında güçlü standart Wnt/β-katenin aktivitesine yolaçarken, az özelleşmiş HCC hücre hatlarında bu etki görülmedi. Başlıca Wnt sinyalelemanları üzerine RT-PCR ile yapılan kapsamlı araştırmalar, birçok Wnt ligandları,Frizzled reseptörleri, ko-reseptörler ve TCF/LEF faktörlerinin gereğinden fazla vebirbirinin yerine geçebilecek şekilde sentezlendiğini göstermiştir. Buna karşılık,standart Wnt sinyalini inhibe eden Wnt5A ve Wnt5B ligandları, seçici olarak azözelleşmiş HCC hücre hatlarında sentezlenmektedir. Bizim gözlemlerimize görestandart Wnt/β-katenin sinyali, tamamen özelleşmiş HCC hücrelerinde aktif, fakat azözelleşmiş HCC hücrelerinde baskılanmış durumdadır. Bu nedenle, standart Wnt/β-katenin sinyali HCC hücrelerinde çift rol oynamaktadır.Meme Kanserinde Wnt yolaklarını çalışırken, ölümsüzleştirilmiş normal insan memeepitel hücreleri (HMECs), 6 meme kanser hücre hattı (BCCL) ve 14 primer memetümörü kullanarak, Wnt sinyal moleküllerinden, 19 Wnt ligandı, 10 frizzledreseptörü, 2 LRP ko-reseptörü ve 4 Lef/TCF transkripsiyon faktörünün kapsamlıvekspresyon analizleri yapıldı. BCCL, FZD10 hariç bütün frizzledları, LRP5/6 veLef/TCF'leri sentezliyor/aşırı sentezliyordu. Ayrıca WNT4, WNT7B, WNT8B,WNT9A ve WNT10B de aşırı sentezleniyor, fakat WNT1, WNT2B, WNT3, WNT5A,WNT5B ve WNT16 sentezi birçok BCCL de kayboluyor ya da düşüyordu. Wntekspresyonun, Normal İnsan Meme Hücre Hattı ile kıyaslandığında, Meme KanserHücre hatlarındaki çekirdek β-katenin birikmesi ve cyclin D1 indüksiyonu ile ilintiliolması standart Wnt sinyali kanserli hücrelerde yeniden aktive edildiğinigöstermekteydi. Bunun yanı sıra, FZD1, WNT-4, WNT7B, WNT8B, WNT9A veWNT10B gibi standart Wnt sinyali ile ilişkili genlerin ekspresyonu Primer MemeTümörlerinde arttığı halde, standart olmayan WNT5A ekspresyonu baskılanmaktaydı.Bu sonuçlar otokrin standart Wnt sinyalinin insan meme karsinogenezi ile ilişkiliolduğunu göstermekteydi.Bizim çalışmamız, Wnt yolakının karaciğer ve meme kanserleri ile ilgili olan farklıilşkisi üzerine güçlü kanıtlar sunmaktadır. Karaciğer kanserinde, Wnt yolakınınaktivitesi HCC hücre hatlarının özelleşmesi ile ilgili gözükmektedir. Bunun yanı sıra,sonuçlarımız Wnt yolakının tamamen özelleşmiş HCC hücre hatlarında aktif, azözelleşmiş olanlarda baskılanmış durumda olduğunu göstermiştir. Buna karşılık,Meme Kanser Hücre hatlarıyla yapılan Wnt çalışmaları farklılıktan ziyadebenzerlikler göstermiştir. Çalışmamız, Meme Kanser Hücre hatlarında, Wntligandlarının mRNA ekspresyon profili ile cyclin D indüksiyonu ve çekirdek β-katenin proteininin birikmesi arasındaki kayda değer ilişkiyi ortaya çıkartmıştır.Sonuç olarak, Wnt sinyali iki tip kanserle de ilişkili olmasına karşın, karaciğer vememe kanserinde farklı roller oynamaktadır. Daha da ilgi çekici olanı, Wnt sinyali,HCC gibi aynı tip kanserde bile, hücrenin özelleşme durumuna göre farklı aktivitelergösterebilmektedir.vi

Özet (Çeviri)

Wnt signaling is involved in a large set of cellular and developmentalprocesses, and when mis-regulated can lead to both degenerative diseases and manytypes of cancer. The involvement of Wnt signaling was already well demonstrated inseveral types of human cancers such as colorectal cancer. However, in some otherssuch as hepatocellular carcinoma (HCC) and breast cancer, the role of Wnt signalingis not fully understood.To study the role of Wnt pathway in liver cancer, we first classified humanhepatoma cell lines into well-differentiated and poorly differentiated groups usinghepatocyte-specific biomarkers. Wnt/β-catenin signaling activity was measuredusing TCF/LEF-dependent reporter assay. Canonical Wnt/β-catenin signaling wasconstitutively active in 80% of well differentiated and 14% of poorly differentiatedcell lines, respectively. Furthermore, ectopic expression mutant of S33Y β-cateninresulted in strong canonical Wnt/β-catenin activity in well differentiated, but not inpoorly differentiated HCC cells. Comprehensive analysis of major Wnt signalingcomponents by a rapid RT-PCR assay showed redundant expression of many Wntligands, Frizzled receptors, co-receptors and TCF/LEF factors in HCC. In contrast,canonical signaling-inhibitory Wnt5A and Wnt5B ligands were selectively expressedin poorly differentiated HCC cell lines. Our observations indicate that canonicalWnt/β-catenin signaling is active in well differentiated, but repressed in poorlydifferentiated HCC cells. Thus, canonical Wnt/β-catenin signaling plays a dual rolein HCC.iiiTo study the role of Wnt pathway in breast cancer, we performed acomprehensive expression analysis, by RT-PCR, of Wnt signaling molecules,including 19 Wnt ligands, ten Frizzled receptors, two LRP co-receptors and fourLef/TCF transcription factors in immortalized normal human mammary epithelialcells (HMECs), six breast cancer cell lines (BCCL) and 14 primary breast tumors(PBT). BCCL expressed/over-expressed all Frizzleds except FZD10, LRP5/6 andLef/TCFs. They also overexpressed WNT4, WNT7B, WNT8B, WNT9A and WNT10B,but the expression of WNT1, WNT2B, WNT3, WNT5A, WNT5B and WNT16 was lostor decreased in most BCCL. Wnt expression correlated with nuclear β-cateninaccumulation and cyclin D1 induction in BCCL, compared to HMECs, indicating areactivation of the canonical Wnt signaling in malignant cells. Furthermore, theexpression of FZD1, WNT-4, WNT7B, WNT8B, WNT9A and WNT10B, all implicatedin canonical Wnt signaling, was upregulated in PBT, whereas the non-canonicalWNT5A expression was down-regulated.Our study gave strong evidences for the differential involvement of Wntpathway in liver and breast cancers. In liver cancer, Wnt pathway activity seems tobe linked to the differentiation status of HCC cell lines. Furthermore, our datashowed that the canonical Wnt pathway was active in well-differentiated HCC celllines and repressed in poorly differentiated ones. In contrast, the study of Wntpathway in breast cancer cell lines showed similarities rather than differences.Indeed, our study revealed a significant correlation between Wnt ligands mRNAexpression profile and the induction of Cyclin D and nuclear β-catenin proteinaccumulation in all breast cancer cell lines studied. We concluded that, althoughinvolved in both types of cancers, Wnt signaling is acting differently in liver andbreast cancers. More interestingly, in the same type of cancer such as HCC, Wntsignaling displayed differential activity depending on the cell differentiation status.iv

Benzer Tezler

  1. Tez No

    275094

    Genetic and epigenetic targets in liver cancer

    Karaciğer kanserinde genetik ve epigenetik hedefler

    HALUK YÜZÜGÜLLÜ

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2010

    Genetikİhsan Doğramacı Bilkent Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET ÖZTÜRK

  2. Tez No

    324207

    Hepatosellüler karsinoma hücre proliferasyonunda lösince zengin tekrarlar içeren g-protein aracılıklı reseptör 5 (LGR5)'in önemi

    The importance of leucine-rich repeat containing g-protein coupled receptor 5 (LGRS5) in proliferation of hepatocellular carcinoma cell

    SOHEİL AKBARİ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    Tıbbi BiyolojiDokuz Eylül Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ŞERİFE ESRA ERDAL

  3. Tez No

    605064

    İnsan A549 hücre hattında sigara dumanı özütünün olumsuz etkileri

    Adverse effects of cigarette smoke extract on the human A549 cell line

    EZGİ SARI

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    Tıbbi Biyolojiİstanbul Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. FÜSÜN ÖZTAY

  4. Tez No

    781905

    The effect of SETD3 on beta-catenin and canonical WNT signaling pathway activity in mouse embryonic stem cells

    SETD3'ün fare emriyonik kök hücrelerinde beta-catenin ve kanonikal WNT yolak aktivitesi üzerindeki etkisi

    CEREN ALGANATAY

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2023

    BiyolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ NİHAL TERZİ ÇİZMECİOĞLU

  5. Tez No

    361332

    Kronik miyeloid lösemide tirozin kinaz inhibitörlerine karşı oluşan primer dirençte WNT/β-katenin yolağı antagonistlerinin rollerinin incelenmesi

    Investigation of the role of WNT/β-catenin pathway antagonists generated against primary the resistance to tyrosine kinase inhibitors in chronic myeloid leukemia

    MELEK PEHLİVAN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    Tıbbi BiyolojiDokuz Eylül Üniversitesi

    Temel Tıp Bilimleri Bölümü

    PROF. DR. HAKKI OGÜN SERCAN

Geri Dön