G proteinleri üzerine yapı ve işlev çalışmaları
Studies on G protein structure and function
- Tez No: 193600
- Danışmanlar: PROF. DR. BEKİ KAN
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyofizik, Biophysics
- Anahtar Kelimeler: G oα protein, pQE80, His-Tag, klonlama, ekspresyon, saflaştırma, BODIPY FL- GTPγS, floresans spektroskop
- Yıl: 2006
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyofizik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 108
Özet
Bu çalışmada merkezi sinir sisteminde yaygın olarak bulunan yapısı ve işlevi henüzaçiklığa kavuşmamış olan G oα proteininin rekombinant olarak E.Coli'den saflaştırılmasıamaçlandı. Rekombinant G oα cDNA'sının, alıcı hücre olarak E.Coli Top10 hücrelerikullanılarak, pQE80 vektör sistemine alt klonlanması gerçekleştirildi. En uygunekspresyon düzeyi farklı IPTG koşullarında ve farklı sıcaklıklarda belirlendi. 1 mMIPTG derişimimde 25 o C'taki sıcaklıkta yüksek miktarda çözünür protein eldesininmümkün olduğu saptandı. His etiketli G oα proteini Ni -NTA ilginlik kromotografisikullanılarak saflaştırıldı. Saflaştırmanın her aşamasındaki protein miktarları Lowry yöntemiylebelirlendi. Elde edilen G oα proteinlerinin analizi SDS-PAGE ve G oα proteinine özgülantikor kullanarak Western emdirimi analizi ile gerçekleştirildi. Afinite kromotografisinden elde edilen protein deki safsızlıklardan kurtulmak için, protein Sephadex G-100 (moleküler elekkromotografisi) kolonuna verildi. Böylelikle ikinci bir saflaştırma işlemi uygulanmış oldu.Protein etkinliğini belirlemek üzere floresans ölçümleri yapıldı. Proteinin içselfloresans spektrum ları elde edildi. Proteinin guanin nükleotid bağlama etkinliğiBODIPY FL- GTPγS probu kullanılarak gösterildi. Guanin nükleotid bağlama etkinliğiayrıca, GTP'nin hidrolizlenmeyen analoğu [35 S]GTPγS kullanılarak belirlendi.Kullanılan pQE80 ekspresyon sistemiyle etkin G oα proteininin çözünür kesimdeneldesi mümkün olmuştur.
Özet (Çeviri)
Özet çevirisi mevcut değil.
Benzer Tezler
- Mobil telefon kullanımına bağlı oluşan 900-1800 mhz radyo frekans dalgalarının meydana getirdiği elektromanyetik alanın iliak kanat kemik mineral yoğunluğuna etkisi
The effect of electromagnetic fields on bone mineral density of iliac bone produced by 900-1800 mhz radio frequency waves dependent on cellular phone usage
BEŞİR ANDAÇ AKSOY
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2006
Ortopedi ve TravmatolojiSüleyman Demirel ÜniversitesiOrtopedi ve Travmatoloji Ana Bilim Dalı
PROF.DR. NEVRES HÜRRİYET AYDOĞAN
- Investigation of mechanoregulatory role of desmin protein
Investigation of mechanoregulatory role of desmin protein
NİLÜFER DÜZ
Doktora
Türkçe
2024
Tıbbi BiyolojiHacettepe ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. PERVİN RUKİYE DİNÇER
- Biophysical and functional characterization of wheat metallothionein at molecular level
Moleküler düzeyde buğday metallothionein'nin biyofiziksel ve fonksiyonel karakterizasyonu
FİLİZ YEŞİLIRMAK
Doktora
İngilizce
2008
BiyofizikSabancı ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HİKMET BUDAK
PROF. DR. ZEHRA SAYERS GÖKHAN
- Exploring allosteric mechanisms of chemokine receptor CXCR4 and implications in drug design
Kemokin reseptörü CXCR4'ün allosterik mekanizmalarının ve ilaç tasarımındaki uygulamalarının keşfedilmesi
TUĞÇE İNAN
Doktora
İngilizce
2023
Kimya Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AYŞE ÖZGE KÜRKÇÜOĞLU LEVİTAS
- Characterization of BAG-1S/C-raf interaction targeting peptide
BAG-1S/C-raf etkileşimini hedefleyen peptitin karakterizasyonu
ECENUR ÇEBİ
Yüksek Lisans
İngilizce
2022
Biyokimyaİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GİZEM DİNLER DOĞANAY