Polianyonların human serum albumin ile etkileşim mekanizmasının araştırılması
Research of interaction mechanism between human serum albumin and polyanions
- Tez No: 201284
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. ZEYNEP AKDESTE
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyomühendislik, Bioengineering
- Anahtar Kelimeler: HPLC, dört detektörlü GPC, dinamik ışık saçılması, elektroforetik ışık saçılması, poliakrilik asit, human serum albumin, protein-polielektrolit kompleksi, HPLC, GPC with quadruple dedector system, dynamic light scattering, electrophoretic light scattering, poly(acrylic acid), human serum albumin, protein-polyelectrolyte complex
- Yıl: 2007
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Yıldız Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 120
Özet
Yağ asidi, amino asit, biliburin gibi metaboliklere ve Cu2+- Zn2+ gibi metal içeren birçok etkin maddeye karşı yüksek ilgi gösteren HSA, araştırmacılar tarafından ilaç salınım sistemlerinde spesifik hedeflere taşıyıcı olarak kullanılmaktadır. Bu çalışmada HSA'nın polianyonlar ile etkileşim mekanizması araştırılarak tıp, eczacılık ve temel bilim çalışmaları için mühendislik yaklaşımı geliştirilmiş ve etkileşimin fiziko-kimyasal yapısı HPLC, dört detektörlü GPC, dinamik ve elektroforetik ışık saçılması ve flüoresans yöntemleri kullanılarak açığa çıkarılmıştır. Protein-polianyon etkileşimlerinde baskın kuvvet elektrostatik etkileşim olup, hidrofobik etkilerin ve hidrojen bağlarının katkısının da olduğu düşünülmektedir. Sulu çözeltilerde polianyon ile protein arasındaki etkileşimler; pH, iyonik şiddet ve nHSA/nPAA miktarına bağlıdır. Kompleks oluşumunun ve sistemdeki faz geçişlerinin, çözeltilerin pH'ına ve bileşenlerin oranına bağlı olduğu, poliakrilik asit (PAA) ve human serum albumin (HSA), CPAA=1mg/mL için farklı pH değerlerine (pH=4,0-7,0) ve nprotein/npolimer oranlarına (nHSA/nPAA=0,1-10) bağlı olarak, suda çözünebilen ve çözünemeyen polimer-protein kompleksleri oluşturduğu gösterilmiştir. pH (7,0-6,0) > pIHSA (4,9) koşulunda, HSA-PAA komplekslerinin kararlılığı ihmal edilebilecek kadar zayıf olup, polielektrolit komplekslerinin oluşumu ve serbest bileşenlerin varlığı ilk kez pH 5,0 değerinde gözlenmeye başlanmıştır. pH5,0'da polikompleks parçacıklarının sulu çözeltilerinin molekül ağırlığı(Mw, Mn), molekül ağırlığı dağılımı, Mark-Houwink (a), bağlanma (k) ve doyma (?m?) sabitleri gibi moleküler özelliklerinin ve yapısal değişikliklerin nHSA/nPAA oranına bağlılığı araştırtmıştır. pH < pI durumunda kararlı polikompleks oluşumları artmış ve suda çözünemeyen HSA-PAA komplekslerinin varlığı pH 4,0 değerinde gözlenmiştir. Ayrıca, CPAA=0,1mg/mL için pH4,0 ve pH4,5'de türbidimetrik titrasyon yöntemi kullanılarak, suda çözünmeyen interpolimer kompleksinin oluşumunun ve suda çözünür hale geçişin pH değişiminden etkilenme mekanizması aydınlatılmıştır.
Özet (Çeviri)
HSA that has a affinity to a very wide range materials, including metals such as Cu and Zn, fatty acid, amino acid, metabolites such as bilirubin is used for drug delivery systems as a carrier to specific targets by a lot of researcher. In this thesis, interaction mechanism between HSA and PAA which is a polyanion is investigated and approach in bioengineering is improved for medicine, pharmacy, fundamental science and physico-chemical character of interaction is researched by using HPLC, GPC with quadruple dedector systems, 2+2+dynamic and electrophoretic light scattering and fluorescence techniques. Electrostatic interactions are the main forces in PPC formations; however, hydrophobic effects and hydrogen bondings are also possible. The interactions of polyelectrolytes (PE) with proteins in aqueous solutions is found to be pH, ionic strength and nHSA/nPAA ratio dependent. It was shown that the complex formation and the phase state of the systems depends on pH of the solution and ratio of components. For CPAA=1 mg/mL, Polyacrylic acid (PAA) and human serum albumine (HSA) form polymer-protein complexes which are water soluble or insoluble depending on pH values (pH=4.0-7.0) and protein/polymer ratios (nHSA/nPAA=0.1-10). The stability of PAA-HSA complexes at pH > pI is negligible weak (pH 7.0 and pH6,0), at the same time decreasing of pH (pH < pI) results with increasing of the stability of polycomplex particles and n/n dependencies of HSAPAAphysicochemical and conformational properties of of aqueous solutions of polycomplex particles at pH5,0 such as molecular properties and structural parameters (molecular weights (M, M), molecularweight distribution, radius of gyration (R), the Mark-Houwink equation constants (a), strenght of adsorption(k), saturated molar binding coefficient wnh(?m?)) is investigated. In addition, for CPAA=0,1 mg/mL pH effect to phase transition of policomplex particle at pH4,0 and pH4,5 is clarified using turbidimetric titration method.
Benzer Tezler
- Polianyonların bovin serum albumin ile karışımlarının dört detektörlü moleküler eleme kromatografisi yöntemiyle analizi
Analysis of mixtures of polyanions with bovine serum albumin by size exclusion chromatography with quadruple detection method
MURAT TOPUZOĞULLARI
Yüksek Lisans
Türkçe
2006
BiyomühendislikYıldız Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF.DR. HURİYE KUZU
- Quantitative determination of some polyanions using microtiter plate reader
Mikroplaka okuyucu kullanarak bazı polianyonların kantitatif tayinleri
SİBEL NAÇ
Yüksek Lisans
İngilizce
2010
KimyaAbant İzzet Baysal ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NEDİME DÜRÜST
- Bovine serum albumin ile poliakrilik asidin suda çözünen komplekslerinin ve kovalent konjugatlarının HPLC yöntemiyle incelenmesi
The investigation of water soluble complexes and covalent conjugates of bovine serum albumin with polyacrylic acid by HPLC method
NAMIK AKKILIÇ
Yüksek Lisans
Türkçe
2006
BiyomühendislikYıldız Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
Y.DOÇ.DR. ZEYNEP AKDESTE
- Ornithogalum sigmoideum Freyn ve Sınt'da sitoembriyolojik ve sitokimyasal çalışmalar
Cytoembryological and cytochemical studies on Ornithogalum sigmoideum Freyn and Sint
IŞIL İSMAİLOĞLU
- Polianyonlarla katkılanmış polipirol filmlerinin elektrokimyasal sentezi ve karakterizasyonu
Electrochemical synthesis and characterization of polyanions-doped
HATİCE KİREMİTÇİ