Theileria parva'nın laktat dehidrogenaz enzimini kodlayan genin izolasyonu, klonlanması ve ekspresyonu
Isolation, cloning and expression of the gene encoding lactate dehydrogenase enzyme from Theileria parva
- Tez No: 292724
- Danışmanlar: PROF. DR. ÖMER MUNZUROĞLU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biyoloji, Biyoteknoloji, Biochemistry, Biology, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Theileria parva, Apikompleksan, Laktat dehidrogenaz, Antitheilerial, Kemoterapötik Hedef, Theileria parva, Apicomplexan, Lactate Dehydrogenase, Antiheilerial, Chemotherapeutic Target
- Yıl: 2011
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Fırat Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 68
Özet
Theileria parva, Şark sahili humması adı verilen (East Coast Fever, ECF), sığırlarda önemli ekonomik kayıplara neden olan kene kaynaklı bir hastalık etmenidir. ECF'nin tedavisinde kullanılan ilaçların maliyetlerinin yüksek olması, bu ilaçlardan bazılarına direnç geliştirildiğinin rapor edilmesi, parazite karşı etkili bir aşının bulunmaması hastalıkla mücadelede önemli bir problemdir. Bu nedenle etkili, ucuz ve güvenle kullanılabilecek yeni ilaçların geliştirilmesini sağlayacak, kemoterapötik hedeflerin araştırılması gerekmektedir.Theileria parva ihtiyaç duyduğu enerjiyi glikoliz ile sağlamaktadır. Glikoliz metabolizmasında önemli bir yere sahip olan enzimler, antiheileriallerin tasarımı için yeni hedef olabilirler. Laktat dehidrogenaz enzimi, parazitin glikoliz enzimleri arasında en yüksek aktiviteyi gösteren enzim olmasından dolayı terapötik hedef olarak seçilmiştir. Laktat dehidrogenaz enzimini kodlayan genin klonlanması standart metodlarla gerçekleştirilip, pGEM-T vektörüne aktarılmıştır. TpLDH geni 2 intron ve 3 ekson içerip, intronlarıyla beraber toplam 1353 baz çiftinden oluşmuştur. TpLDH geninin intronları yönlendirilmiş mutagenezle çıkarılıp, ekson fragmentleri PCR ile birleştirilmiştir. PCR ile gerçekleştirilen çalışmanın sonunda, TpLDH geni intronsuz, 966 baz çifti uzunluğunda, ekspresyona hazır halde elde edilmiştir.
Özet (Çeviri)
Theileria parva is the causative agent of East Coast fever (ECF), a tick born disease, result in major economic losses in cattle. The high costs of drugs used to treat of ECF, development of resistance to some of these drugs , the absence of an effective vaccine against the parasite are significant problems in dealing with this illness. Thus, it is necessary that exploiting new resources to identify effective therapeutic targets to help develop new, effective, and cheap drugs, is imperative.Glycolysis is the main pathway of Theileria parva for energy production. The enzymes that play an important role in glycolysis may provide new targets for designing antitheilerials. Given its highest activity among glycolytic enzymes of the parasite, lactate dehydrogenase enzyme has been selected as the therapeutic target. Lactate dehydrogenase gene was cloned into pGEM-T vector with standard methods. TpLDH gene contains 2 introns, 3 exons and the gene is 1353 base pair in lenght. The introns were removed by site-directed mutagenesis then, exons fragments were ligated by PCR which generated a protein coding region 966 bp in length.
Benzer Tezler
- Theileria annulata'nın tanısında serolojik (indirekt ELISA) ve moleküler (PZR, çoklu PZR ve lamp) yöntemlerin geliştirilmesi
Development of serological (indirect ELISA) and molecular (PCR, multiplex PCR and LAMP) techniques for the detection of Theileria annulata
HÜSEYİN BİLGİN BİLGİÇ
Doktora
Türkçe
2010
ParazitolojiAdnan Menderes ÜniversitesiParazitoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. TÜLİN KARAGENÇ
- Karadeniz bölgesinde koyun ve keçilerde Theileria ve Babesia türlerinin moleküler yöntemlerle belirlenmesi
Detection of Theileria and Babesia species in sheep and goats with molecular methods in the Black Sea Region
MEHMET FATİH AYDIN
- Kırıkkale yöresinde sığırlarda theileria annulata ve theileria buffeli/orientalis'in PCR-Reverse line blotting yöntemi ile araştırılması
Investigation of theileria annulata and theileria buffeli/orientalis in cattle in kirikkale province by PCR-Reverse line blotting method
SAMİ GÖKPINAR
Doktora
Türkçe
2013
ParazitolojiKırıkkale ÜniversitesiVeteriner Hekimliği Bölümü
PROF. DR. MERAL AYDENİZÖZ
- Erzurum yöresi koyunlarında piroplasmosisin mikroskobik ve moleküler yöntemlerle incelenmesi
Investigation of sheep piroplasmosis in Erzurum province by microscopic and molecular techniques
RIDVAN KİRMAN
Doktora
Türkçe
2021
Veteriner HekimliğiAtatürk ÜniversitesiParazitoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ESİN GÜVEN
- Doğu ve güney doğu anadolu bölgelerinde koyun ve keçi theileriosisinin mikroskopik ve moleküler yöntemlerle araştırılması
Survey of theileriosis in sheep and goats in east and southeast anatolia region by microscopical and molecular methods
KÜRŞAT ATAY
Doktora
Türkçe
2006
Veteriner HekimliğiFırat ÜniversitesiParazitoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. MÜNİR AKTAŞ