Geri Dön

Termofilik Geobacillus sp. DF20 suşundan esterazın saflaştırılması ve karakterizasyonu

Purification and characterization of esterase from a thermophilic bacterium, Geobacillus sp. DF20

PDF İndir

  1. Tez No: 294993
  2. Yazar: ESRA ÖZBEK
  3. Danışmanlar: PROF. DR. AHMET ÇOLAK
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2011
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Karadeniz Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 69

Özet

Bu çalışmada, Q-Sapharose iyon değişim kromotografisi ile termofilik Geobacilillus sp. DF20 suşundan esteraz saflaştırıldı ve karakterize edildi. Saflaştırılan enzim doğal PAGE' de çift bant halinde gözlendi ve substrat boyama ile bu bantların esteraz olduğu kanıtlandı. Enzim maksimum aktivitesini, substrat olarak p-nitrophenyl butirat (pNPB) kullanıldığında pH 7,0 ve 50 °C'de gösterdi. Km ve Vmaks değerleri sırasıyla 0,120 mM ve 54,6 U/mg protein olarak hesaplandı. Enzimin +4oC, 50oC ve 70oC sıcaklıklarında yapılan kararlılık denemelerinde 5.saat sonunda 70oC`de aktivitesini tamamen kaybettiğini 72 saat sonunda ise +4oC'de aktivitenin %100 korunurken 50oC'deki aktivitenin azaldığı görülmüştür. pH kararlılık denemelerinde +4oC sıcaklıkta pH 5 ve pH 7'de yapılan denemelerde 5 günlük inkübasyonda enzim aktivitesinin düştüğü fakat pH 5'deki aktivitenin daha yüksek olduğu görülmüştür; optimum sıcaklık olan 50oC'de pH 5 ve pH 7'de yapılan kararlılık denemelerinde 2.gün sonunda pH 5'de hiç aktivite kalmazken pH 7'de ise aktivitenin 3.gün sonuna kadar %100 korunduğu gözlenmiştir. Bazı metal iyonu ve kimyasalların enzim aktivitesi üzerine etkisi ayrıca incelenmiştir.Bu çalışmadan elde edilen veriler saflaştırılan esterazın bazı çözücüler varlığında aktivite göstermesi ve bunun yanında pH ve ısıl kararlı olması onu bazı endüstriyel uygulamalarda kullanışlı olabileceğini göstermektedir.

Özet (Çeviri)

The esterase from a thermophilic bacterium, Geobacillus sp. DF20, was purified using Q-Sepharose ion exchange column and characterized. Native polyacrilamid gel electrophoresis stained by p-naphtyl acetate and Fast Blue B indicated the presence of two active esterase. Enzyme show highest activity in presence of p-nitrophenyl butirate (p-NPB) as a substrate at pH 7.0 and 50 ? C. The Km and Vmax values of the enzyme were calculated as 0.120 mM and 54.6 U/mg protein, respectively. The stability experiments of enzyme were carried out at +4 ? C, 50 ? C and 70 ? C. At the end of 5th hour, the enzyme lost the activity at 70 ? C. By the end of 72 hours, while the activity was protecting 100%, the activity had decreased at 50 ? C.When the enzyme incubated in buffer solution pH 5.0 and 7.0 at 4 ? C, the enzyme retained its original activity 70% and 50% respectively after 3 days. At 50 ? C, the enzyme activity lost its activity at pH 5.0 after 2 days incubation and conserved 95% its activity after 3 days. The effects of metal ions and some chemicals on the activity were also investigated.These data support that the esterase from Geobacillus sp. DF20 has some advantages for industrial or biotechnological applications.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    285396

    Termofilik Geobacillus sp. TF17 suşundan esteraz saflaştırılması ve karakterizasyonu

    Purification and characterization of esterase from a thermophilic bacterium, Geobacillus sp. TF17

    ÇİĞDEM AYNA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    BiyokimyaKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AHMET ÇOLAK

  2. Tez No

    380450

    Termofilik Geobacillus sp. TF14'ten endüstriyel öneme sahip α-amilazın saflaştırılması, immobilizasyonu ve karakterizasyonu

    Purification, immobilisation and characterization of indutrially important α-amylase from a thermophilic bacteria Geobacillus sp. TF14

    ŞABAN KESKİN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyokimyaKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NAGİHAN SAĞLAM ERTUNGA

  3. Tez No

    389930

    Termofilik Geobacillus sp. TF16 suşundan fitaz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu ve doğal bir besin kaynağındaki fitatı parçalama etkinliğinin incelenmesi

    Purification and characterization of phytase from Geobacillus sp. TF16 and investigation hydrolysis of soymilk phytate

    EMRE DOKUZPARMAK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyokimyaKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NAGİHAN SAĞLAM ERTUNGA

  4. Tez No

    424421

    Termofilik geobacıllus Sp. TF16'dan ksilanazın klonlanması, ekspresyonu, immobilizasyonu, karakterizasyonu ve endüstriyel uygulamalarının incelenmesi

    Cloning, expression, immobilisation, characterization of xylanase from Thermophilic geobacillus Sp. TF16 and investigation of industrial applications

    ÜMMÜHAN ÇAKMAK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyokimyaKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NAGİHAN SAĞLAM ERTUNGA

  5. Tez No

    424446

    Termofilik Geobacillus sp. TF16 suşundan saflaştırılan fitazın farklı destek materyallerine immobilizasyonu, immobilize enzimlerin karakterizasyonu ve doğal bir besin kaynağındaki fitatı parçalama etkinliğinin incelenmesi

    Immobilization of phytase purified from a thermophilic Geobacillus sp. TF16 on the different carriyng materials, characterization of immobilized enzymes and investigation of phytate degredation effect of its from a natural nutritional source

    YAKUP ŞİRİN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    BiyokimyaKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NAGİHAN SAĞLAM ERTUNGA

Geri Dön