Geri Dön

Termofilik Geobacillus sp. TF16 suşundan fitaz enziminin saflaştırılması, karakterizasyonu ve doğal bir besin kaynağındaki fitatı parçalama etkinliğinin incelenmesi

Purification and characterization of phytase from Geobacillus sp. TF16 and investigation hydrolysis of soymilk phytate

PDF İndir

  1. Tez No: 389930
  2. Yazar: EMRE DOKUZPARMAK
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. NAGİHAN SAĞLAM ERTUNGA
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biyoteknoloji, Kimya, Biochemistry, Biotechnology, Chemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2015
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Karadeniz Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 83

Özet

Bu çalışmada endüstriyel önemi olan fitaz enzimi yeni tanımlanmış bir termofilik bakteri türü olan Geobacillus sp. TF16'dan amonyum sülfat çöktürmesi, iyon değişim kromatografisi teknikleri ile 4,93 kat saflaştırıldı. Saflaştırılan enzim SDS-PAGE ile analiz edildiğinde 106,04 kDa molekül ağırlığına sahip tek bir protein bandı tespit edildi. Saflaştırılan enzim sodyum fitat substratı varlığında 85 °C'de pH 4,0'de optimum sıcaklık ve pH'ya sahip olduğu ve optimum pH değerinde enzim 4, 37 ve 85 oC'de 24 saat sonunda aktivitesini yaklaşık olarak %80'nin üzerinde koruduğu tespit edildi. Fitaz enziminin ısıl kararlılığı incelendiğinde, 4 oC'de 24 saat sonunda ve 37 oC ve 85 oC'de 4 saat sonunda aktivitenin büyük oranda korunduğu tespit edildi. Sodyum fitat substratı için enzimin kinetik parametreleri olan Vmaks ve Km değerlerinin sırasıyla 526,28 U/mg ve 1,31 mM olduğu hesaplandı. Metal iyonlarının varlığında enzim aktivitesinin büyük oranda korunduğu, Cu2+ mevcudiyetinde aktivitenin 5 kat arttığı, EDTA mevcudiyetinde ise kısmen azaldığı tespit edildi. Proteaz enzimleri varlığında Geobacillus sp. TF16 fitazının %62 oranında aktivitesini koruduğu saptanmıştır. Geobacillus sp. TF16 fitazının soya sütü fitatını parçalama etkinliği incelenerek 4 saat sonunda fitaz enzimi yaklaşık %20 oranında hidrolizleme yeteneğine sahip olduğu tespit edildi.

Özet (Çeviri)

In this study, phytase was purified from Geobacillus sp. TF16 by using ammonium sulfate precipitation and DEAE ion exchange chromatography. Phytase enzyme was purified 4.93 fold by chromatography techniques. The purified enzyme was determined as a single band 106.04 kDa on SDS-PAGE. Temperature and pH optimums of purified enzyme were found to be 85 oC and 4.0, respectively. The enzyme activity is preseved approximately %80 after 24 hours incubation at 4 oC, 37 oC and 85 oC. In the study of thermal stability, enzyme activity was conserved approximately %60-80 at 4 oC after 24 hours and at 85 ° C and 37 °C after 4 hours. Sodium phytate as a substrate Vmax and Km values were calculated as 526.28 U/mg and 1.31 mM, respectively. Additionally, it was detected that some metal ions affect the enzyme activity at different ratios. In the presence of EDTA, enzyme activity was inhibited slihtly. In the presence of proteases, it is conserved the activity approximately %62 at 37 oC after 1 hour incubation. The enzyme hydrolized approximately %20 of soymilk phtate at 85 oC after 4 hours.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    424446

    Termofilik Geobacillus sp. TF16 suşundan saflaştırılan fitazın farklı destek materyallerine immobilizasyonu, immobilize enzimlerin karakterizasyonu ve doğal bir besin kaynağındaki fitatı parçalama etkinliğinin incelenmesi

    Immobilization of phytase purified from a thermophilic Geobacillus sp. TF16 on the different carriyng materials, characterization of immobilized enzymes and investigation of phytate degredation effect of its from a natural nutritional source

    YAKUP ŞİRİN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    BiyokimyaKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NAGİHAN SAĞLAM ERTUNGA

  2. Tez No

    424421

    Termofilik geobacıllus Sp. TF16'dan ksilanazın klonlanması, ekspresyonu, immobilizasyonu, karakterizasyonu ve endüstriyel uygulamalarının incelenmesi

    Cloning, expression, immobilisation, characterization of xylanase from Thermophilic geobacillus Sp. TF16 and investigation of industrial applications

    ÜMMÜHAN ÇAKMAK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyokimyaKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NAGİHAN SAĞLAM ERTUNGA

  3. Tez No

    285396

    Termofilik Geobacillus sp. TF17 suşundan esteraz saflaştırılması ve karakterizasyonu

    Purification and characterization of esterase from a thermophilic bacterium, Geobacillus sp. TF17

    ÇİĞDEM AYNA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    BiyokimyaKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AHMET ÇOLAK

  4. Tez No

    380450

    Termofilik Geobacillus sp. TF14'ten endüstriyel öneme sahip α-amilazın saflaştırılması, immobilizasyonu ve karakterizasyonu

    Purification, immobilisation and characterization of indutrially important α-amylase from a thermophilic bacteria Geobacillus sp. TF14

    ŞABAN KESKİN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyokimyaKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NAGİHAN SAĞLAM ERTUNGA

  5. Tez No

    294993

    Termofilik Geobacillus sp. DF20 suşundan esterazın saflaştırılması ve karakterizasyonu

    Purification and characterization of esterase from a thermophilic bacterium, Geobacillus sp. DF20

    ESRA ÖZBEK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    BiyokimyaKaradeniz Teknik Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AHMET ÇOLAK

Geri Dön