Boronat afinite kromatografisi için monolitik HPLC kolonları
Preparation of monolithic HPLC columns for boronate affinity chromatography
- Tez No: 305937
- Danışmanlar: PROF. DR. ADİL DENİZLİ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Kimya, Biochemistry, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2011
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 76
Özet
Bu çalışmanın amacı, boronat afinite kromatografisi ile immunoglobulin G (IgG) ayrılması için monolitik HPLC kolonları hazırlamaktır.İlk aşamada, 4-vinil fenil boronik asit (VPBA) monomeri 2-hidroksietil metakrilat (HEMA) ile polimerleştirilmiştir. Yığın polimerizasyon sonucu elde edilen polimer, bilyalı değirmen kullanılarak öğütülmüş ve fenil boronik asit içeren partiküller elde edilmiştir. Daha sonra bu partiküller, poli(2-hidroksietil metakrilat) (PHEMA) kriyojellerin içine gömülerek monolitik kompozit HPLC kolonları hazırlanmıştır. Ayrıca sadece PHEMA bazlı kriyojel de sentezlenerek polimerler arasındaki farklar ortaya konulmuştur.Hazırlanan kompozit HPLC kolonları yüzey alanı ölçümleri (BET), taramalı elektron mikroskobu (SEM), Fourier Transform İnfrared spektroskopisi (FTIR), elementel analiz, şişme testleri ve akış hızı-geri basınç ilişkisi ile karakterize edilmiştir.Karakterizasyon basamaklarından sonra monolitik kompozit kriyojeller, HPLC sistemine bağlanmış ve IgG ayırma performansları belirlenmiştir. Bu aşamada pH, derişim, sıcaklık, akış hızı ve iyonik şiddet gibi parametreler incelenmiştir.Çalışmanın son aşamasında, belirlenen optimum koşullarda plazmadan protein ayrılması gerçekleştirilmiş ve kolonların immunoglobulin G (IgG)'ye olan seçiciliğini ortaya koymak amacıyla insan serum albumini (HSA) ile seçicilik deneyleri yapılmıştır.ANAHTAR KELİMELER: Boronat Afinite Kromatografi, Monolit Kompozit Kriyojel, HPLC, İmmunoglobulin G
Özet (Çeviri)
The aim of this study is the preparation of monolithic HPLC columns for ımmunoglobulin G separation by boronate affinity chromatography.In first step, 4-vinyl phenyl boronic acid (VPBA) monomer was polymerized with 2-hydroxyethyl methacrylate (HEMA). The polymer prepared by bulk polymerization was crushed by using ball-milling and by this way, the particles were including phenyl boronic acid groups, obtained. Then, these particles were embedded into poly(2-hydroxyethyl methacrylate) (PHEMA) based cryogels to obtain monolithic composite HPLC column. In addition, the PHEMA-based cryogel was also synthesized to evaluate the differences between cryogels. The prepared monolithic composite HPLC columns were characterized by surface area measurements (BET), scanning electron microscopy (SEM), Fourier Transform Infrared (FTIR), elemental analysis, swelling tests and flow rate-back pressure relation.After the characterization, the monolithic composite columns were connected to the HPLC system. The performance of IgG separation of composite columns were determined. At this stage, the parameters such as pH, concentration, temperature, flow rate and ionic strength were investigated.In final stage of the study, the IgG separation from human plasma was performed at the determined optimum conditions and selectivity experiment was also performed with human serum albumin (HSA) to present the selectivity of columns to immunoglobulin G (IgG) .KEY WORDS: Boronate Affinity Chromatography, Monolith Composite Cryogel, HPLC, Immunoglobulin G.
Benzer Tezler
- Nükleozidlerin zwitteriyonik monolitik kolonlar ile kapiler elektrokromatografi sisteminde ayrımı
Separation of nucleosides by zwitterionic monolithic columns in capillary electrochromtography systems
SİSEM EKTİRİCİ
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
KimyaHacettepe ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ADİL DENİZLİ
DOÇ. DR. FATMA YILMAZ
- E. coli hücrelerinden polimerik mikrokriyojeller ile RNA saflaştırılması
RNA purification by polimeric microcryogels from E.coli cells
MELEK ÖZSEVGİÇ
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
BiyomühendislikHacettepe ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ADİL DENİZLİ
- Oligomerik siloksan bazlı affinite monolitlerin sentezi, sıvı kromatografisi ve borat affinite kromatografisinde kullanımı
Synthesis of oligomeric siloxane based affinity monoliths and their usage in li̇qui̇d chromatography and boronate affinity chromatography
GJULTEN NEDJIP
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Kimya MühendisliğiHacettepe ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SÜLEYMAN ALİ TUNCEL
- Reaktif formda, hidrofobik monodispers-gözenekli partiküllerin sentezi ve boronat afinite kromatografisi için destek materyali olarak kullanımı
Synthesis of reactive, hydrophobic monodisperse-macroporous particles and their use as stationary medium in boronate affinity chromatography
ÖZLEM ÖZKUL
Yüksek Lisans
Türkçe
2011
Kimya MühendisliğiHacettepe ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SÜLEYMAN ALİ TUNCEL
- A novel potentiometric borate selective biosensor for real time detection of glucose, glycated albumin and glycated hemoglobin levels
Glikoz, glikolize hemoglobin ve glikolize albüminin gerçek zamanlı ölçümlerinin sağlanması amacıyla potansiyometrik yeni bir borat seçici biyosensörün geliştirilmesi
YİĞİT TANYERİ
Yüksek Lisans
İngilizce
2019
BiyomühendislikYıldız Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İBRAHİM IŞILDAK