Optimization of the production of trichoderma reesei endoglucanase I in pichia pastoris
Pichia pastoris'te trichoderma reesei endoglukanaz I üretiminin optimizasyonu
- Tez No: 309373
- Danışmanlar: DOÇ. DR. O. UĞUR SEZERMAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biyomühendislik, Biyoteknoloji, Biology, Bioengineering, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2010
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Sabancı Üniversitesi
- Enstitü: Mühendislik ve Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Bilimleri ve Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 76
Özet
Bu çalışmanın amacı Trichoderma reesei endoglukanaz I'inin Pichia pastoris organizmasında üretilmesidir. Pichia pastoris, yabancı proteinleri yüksek düzeyde üretebilmesi, sıkı regüle edilebilen bir promotöre (alkol oksidaz I) sahip olması dolayısıyla üretim için seçilen organizmadır.Heterolog endoglukanaz I üreten Pichia hücreleri farklı stratejiler uygulanarak fermentörde üretilmiştir. EG I üretiminde sıcaklık ve metanol konsantrasyonunun etkileri anlaşılmaya çalışılmıştır. Özellikle, promotörün indüksiyonu metanol gerektirdiğinden, fermentör içerisindeki metanol miktarının etkisi incelenmiştir. Kesikli ve kesikli beslemeli fermentasyonlar yapılarak örneklerin analizleri yapılmıştır. Kesikli beslemeli fermentasyonlarda, hücrelerin protein üretimi sırasında büyümelerine yardımcı olmak amacıyla metanole ek substrat olarak sorbitol kullanılmıştır. Protein konsantrasyonları, EG I'in aktivite analizleri, SDS-PAGE ve büyüme hızı sonuçları karşılaştırılarak endoglukanaz I'in Pichia pastoris'te yüksek üretimi optimize edilmeye çalışılmıştır. Endoglukanaz I'in Pichia pastoris'te üretilmesi için en iyi koşulların düşük metanol seviyesi ve düşük sıcaklık olduğu tespit edilmiştir. Bu çalışmada elde edilen sonuçlar özellikle deterjan ve kağıt endüstrisinde kullanılabilir.
Özet (Çeviri)
The aim of this study is to produce Trichoderma reesei endoglucanase I in Pichia pastoris. Pichia pastoris is the host of the production since it has many advantages like high level production of foreign proteins and possession of a tightly regulated promoter, alcohol oxidase I.Pichia cells expressing heterologous endoglucanase I was grown in fermenter with different strategies. The effects of temperature and methanol concentration on EG I production were tried to be understood. Especially the effect of methanol level in fermenter was investigated since the induction of the promoter needs methanol. Batch and fed-batch fermentations were performed and analyses of the samples were done. Sorbitol was used as a co-substrate to methanol to keep cells growing during production. Protein concentrations, activity analysis of EG I, SDS-PAGE and growth rate results were compared and high level production of endoglucanase I in Pichia pastoris was tried to be optimized. For the production of EG I in Pichia pastoris, less methanol level and low fermentation temperature were found to be best conditions. Results obtained in this study can be used for further studies and applications especially in detergent, pulp and paper industry.
Benzer Tezler
- Protein engineering and covalent modification of Trichoderma reesei cellulases in Pichia pastoris for textile biofinishing
Trichoderma reesei selülazlarının Pichia pastoris'te tekstil terbiyesi için protein mühendisliği ve kovalent modifikasyonu
GÜNSELİ BAYRAM AKÇAPINAR
Doktora
İngilizce
2011
BiyomühendislikSabancı ÜniversitesiBiyoloji Bilimleri ve Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. OSMAN UĞUR SEZERMAN
- Selülaz enziminin immobilizasyonu, karakterizasyonu ve uygulamaları
Immobilization, characteristics and applications of cellulase enzyme
DUYGU BAKIR
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
BiyokimyaManisa Celal Bayar ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. TÜLİN AYDEMİR
- Trichoderma reesei kültürlerinde pektinaz enziminin optimizasyonu
Optimization of enzyme pectinase on Trichoderma reesei cultures
BARLAS ESKİZENGİN
- Selüloz enzimi üretimi
Başlık çevirisi yok
GÖNÜL NİLÜFER
Yüksek Lisans
Türkçe
1994
Gıda MühendisliğiEge ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SUHA SUKAN
- Önişlem görmüş ayçiçeği ve tütün saplarından enzimatik yöntemle ksiloz üretimi
Enzymatic xylose release from pretreated sunflower and tobacco stalks
FATMAGÜL HALICI
Yüksek Lisans
Türkçe
2013
Gıda MühendisliğiGaziosmanpaşa ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. ÖZLEM AKPINAR