HPLC analizinde çakışan pik veren bileşiklerin DAD, on-line FRAP ve peroksinitritle reaksiyon kullanılarak ayırt edilmesi
In HPLC analysis, seperated of compounds, given overlapped peaks using DAD, on-line FRAP and peroxynitrite reaction
- Tez No: 309815
- Danışmanlar: PROF. DR. MURAT KÜÇÜK
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2012
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Karadeniz Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 105
Özet
Bu çalışmada, 16 fenolik asit standardı (rosmarinik asit, benzoik asit, p-OH benzoik asit, protokatekuik asit, protokatekualdehit, syringik asit, sinapik asit, p-kumarik asit, ferulik asit, kafeik asit, gentisik asit, vanilik asit, vanilin, gallik asit, syringaldehit, klorogenik asit) 25 °C'de, çözücü gradienti ve süre faktörleri değiştirilerek çakıştırıldılar. DAD ile çakışan bileşen analizleri yapıldıktan sonra fenolik asitlerin yerleri belirlendi. Aynı yerde pik veren fenolik asitlerin spektrum farklılıklarından ayırt edilmesi sağlandı. Çakışan pikler için farklı dalga boylarındaki absorbans oranlarına karşılık gelen yüzde bileşim grafikleri oluşturularak karışımdaki bileşimler bulundu. Fenolik asitlerin çakışma durumunda ayırdedilebilecekleri dalga boyları belirlendi ve standartların çakışmayacağı karışımlar hazırlandı, on-line FRAP'la 10 farklı konsantrasyonda antioksidan aktiviteler belirlendi. Klorogenik asit ? p-OH benzoik asit ve vanilik asit ? kafeik asit ikililerinin kalitatif ayrımı sadece klorogenik asit ve kafeik asitin aktif olması sayesinde 595 nm'de gerçekleşti. Vanilin ? p-kumarik asit ikilisinin herikisinin de aktivitesinin olmamasından dolayı bu yöntemle ayrımı gerçekleştirilemedi. Gentisik asit ? protokatekualdehit ve ferulik asit ? sinapik asit ikililerinde ise her iki bileşen de aktif olduğundan, 280 nm ve 595 nm'deki pik alanları oranlarından çizilen grafikler yardımıyla karışımdaki yüzde molar bileşimleri hesaplandı. Ayrıca standartlar, laboratuvarda sentezlenen peroksinitritle tek tek, off-line olarak hem pH 7.4'te hem de peroksinitritin 1 M HCl ile reaktivitesi durdurularak muamele edilip HPLC' de yürütüldüler ve fenolik asit pik kaybolması veya dönüşüme uğramasıyla da fenolik asitler ayırt edildiler.
Özet (Çeviri)
In this study, 16 phenolic acids (rosmarinic acid, benzoic acid, p-OH benzoic acid, protocatecuic acid, protocatecualdehyde, syringic acid, synapic acid, p-cumaric acid, ferulic acid, caffeic acid, gentisic acid, vanillic acid, vanilline, gallic acid, syringaldehyde, chlorogenic acid) were overlapped by changing solvent gradient and time at 25 °C. After the analysis of the overlapping peaks with DAD, the retention times of the phenolic acids were determined. The phenolic acids having overlapping peaks were resolved by spectral differences. For the overlapping phenolic acids, compositions were determined from the graphs of percentage composition versus absorbance ratios at selected wavelengths. The wavelengths at which resolution could be attained were determined, the standard mixtures with non-overlapping composition were prepared, and on-line FRAP activities of phenolic acids at ten different concentrations were determined. Qualitative seperation of chlorogenic acid ? p-OH benzoic acid and vanilic acid ? caffeic acid pairs was realised from the peaks at 595 nm as only one was active, i.e. chlorogenic and caffeic acids. Vanillin ? p-cumaric acid pair could not be resolved as both were inactive. Because both components of gentisic acid ? protocatecualdehyde and ferulic acid ? synapic acid pairs were active, %molar compositions of these pairs were calculated from the graphs of ratios of peak areas at 280 and 595 nm versus component percentage. Additionally, standards were reacted with peroxynitrite separately at pH 7.4 and after inactivating peroxynitrite by premixing with 1 M HCl and then injected to HPLC system, and peaks were resolved based on reactivities towards peroxynitrite with peak disappearings and peak transitions.
Benzer Tezler
- Mısır tanesinde bulunan yağ ve tokoferol içeriklerinin farklı analiz yöntemlerinin karşılaştırılması
Comparison of different analysis methods of oil and tocopherol contents in corn grain
AYŞE NUR GÖKÇE
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
BiyoteknolojiÇanakkale Onsekiz Mart ÜniversitesiTarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. CEM ÖMER EGESEL
- Türk toplumunda beta talaseminin hızlı, ucuz, etkin ve güvenilir yöntemle taranması amacıyla tarama testi geliştirilmesi
Development of a rapid, cheap, effective and reliable screening method for detecting ß-thalassemia mutations in Turkish population
DERYA KARAER
Doktora
Türkçe
2012
BiyoteknolojiAnkara ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMRİYE FERDA PERÇİN
PROF. DR. HATİCE ILGIN RUHİ
- Sulfonamidlerin amino kolonlarla HPLC analizi
The HPLC analysis of sulfonamides with amino columns
LALE MEYANCI ÖZER
- Ağır metallerin tutuklanması için yeni bir katı faz geliştirilmesi
Development of a new solid phase material for the uptake of heavy metals
ÖZGEN ERCAN
- Çukurova bölgesinde hemoglobinopatilerin HPLC yöntemleriyle incelenmesi
The Investigation of hemoglobinopaties by HPLC prodeures in Cukurova region
GÜLEN ATTİLA