PC12 nöronal hücre hattında amiloid beta ile oluşturulan Alzheimer modelinde saponinlerin oksidatif makromolekül hasarı üzerine etkisinin incelenmesi
The effects of saponins on oxidative macromolecule damage in Alzheimer model generated by amyloid beta-induced PC12 neuronal cell line
- Tez No: 331296
- Danışmanlar: DOÇ. DR. PINAR AKAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Moleküler Tıp, Nöroloji, Biochemistry, Molecular Medicine, Neurology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2012
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Dokuz Eylül Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Tıp Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 103
Özet
Alzheimer Hastalığı (AH) progresif ilerleme gösteren, hafıza kaybı ile sonuçlanan geri dönüşümsüz nörodejeneratif bir hastalıktır.65 yaş üstü ölüm nedenleri arasında altıncı sırada yer almaktadır. Geleneksel Çin tıbbında kullanılan saponinlerin antioksidatif etkiye sahip olduğunu gösteren çalışmalar, oksidatif strese bağlı nöronal hücre ölümünde önleyici ya da destekleyici bir tedavi yöntemi olarak kullanımlarını düşündürmektedir.Amaç: AH tedavisine yönelik ilaç adayı olabilecek dört farklı saponin türü olan Astragalozit IV (Ast IV), Sikloastragenol (CG), Astragalozit VII (Ast VII) ve Makrofillosaponin B (Mac B)'nin PC12 hücrelerinde Aß toksisitesi ile oluşturulan Alzheimer modelinde hücre canlılığı ve oksidatif makromolekül hasarı üzerine etkilerini belirlemektir.Yöntem: PC12 hücrelerine 24 saat eş zamanlı ve ayrı ayrı Aß(25-35) ve saponinler uygulanarak doza bağlı değişen hücre canlılıkları MTT yöntemi ve mikroskobik inceleme ile değerlendirildi. Oksidatif hasarlardan lipit peroksidasyonu (malondialdehit) HPLC yöntemi, oksidatif DNA baz hasarı GC/MS yöntemi ve protein oksidasyonu (total tiyol düzeyi) Ellman's yöntemi ile saptandı.Bulgular: 20 µM Aß(25-35)'in 24 saat uygulanması hücre canlılığını ~%65 düzeyinde azaltmaktadır. 20 µM Aß(25-35) toksisitesine karşı 100 µM CG ve Ast IV'ün hücre canlılığını sırasıyla %27 (p=0.000) ve %6 (p=0.017) oranında arttırdığı saptandı. Ancak Aß(25-35) toksisitesine karşı 1 nM-100 µM Ast VII ve Mac B'nin hücre canlılığı üzerine anlamlı etkisi gözlenmedi. Aß uygulaması total tiyol ve FapyAde düzeylerini kontrol grubuna göre azaltırken (sırası ile p=0.011, p=0.021), MDA düzeyini istatistiksel olarak anlamlı olmamakla birlikte arttırdığı gözlendi. Aß ile birlikte Ast IV ve CG uygulanan grupların total tiyol, MDA ve FapyAde düzeylerinde Aß uygulanan gruba göre anlamlı fark gözlenmedi.Sonuç: Çalışmamızda Aß toksisitesine karşı dört farklı saponinin koruyucu etkisi incelendi ve sadece Ast IV ve CG'nin hücre canlılığını arttırdığı saptandı. Bu saponinlerin 24 saatlik uygulamasının PC12 hücrelerinde oksidatif makromolekül hasarı üzerine anlamlı bir etkisi saptanmadı. Bu moleküllerin koruyucu etkisinin daha kapsamlı in vitro ve in vivo çalışmalar ile ortaya konması, toplumumuz için önemli bir sosyo-ekonomik problem halini alan Alzheimer hastalığında bir tedavi seçeneği olma potansiyelini artırabilir.
Özet (Çeviri)
Alzheimer?s disease (AD) is a progressive, irreversible neurodegenerative disorder which results in memory impairment. Alzheimer?s disease is the sixth leading cause among all the death causes in individuals over 65 years of age. Studies show that saponins that are used in Traditional Chinese Medicine have antioxidative effects; therefore, these molecules may be of use as preventive or supportive therapy against oxidative damage mediated neuronal cell death.Objective: To determine the effects of four different saponins (as drug candidates against AH), Astragaloside IV (Ast IV), Cycloastragenol (CG), Astragaloside VII (Ast VII) and Macrophyllosaponin B (Mac B), on cell viability and oxidative macromolecules? damage in Aß-induced PC12 cells in the context of Alzheimer model.Method: Aß and saponins were exposed as tandem or separately in PC12 cells for 24 h, and dose dependent cell viabilities were evaluated by MTT assay and microscopic investigation. Among the oxidative damages, lipid peroxidation (malondialdehyde) was detected with the HPLC method, DNA oxidation with the GC/MS method and the protein oxidation (total thiol levels) with Ellman?s method.Results:Treatment with 20 ?M Aß(25-35)for 24 h reduced cell viability by ~65% as compared to
Benzer Tezler
- PC12 hücrelerinde amiloid beta'nın oluşturduğu kaspaz-8 aktivasyonuna eritropoetinin etkisi
The effect of erythropoietin on caspase-8 activation induced by amyloid beta in PC12 cells
SERVET KIZILDAĞ
- Aminoglutethimid'in nöronal hücre hatlarında Steroid Sentezi ve Amiloid βpeptit toksisitesi üzerine etkisi
The effect of Aminogluthetimide on Amyloid beta Toxicicity in neuronal cell lines
CUMHUR DOĞAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
BiyokimyaDokuz Eylül ÜniversitesiSinir Bilimi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. PINAR AKAN
- Nöronal hücre hatlarında Amiloid beta peptidin oluşturduğu hasarda nörosteroidlerin rolü
The role of neurosteroids on Amyloid beta toxcitiy in neuronal cell lines
ÖZLEM GÜRSOY ÇALAN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2010
BiyokimyaDokuz Eylül ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. PINAR AKAN
- Nöronal hücre içi kolesterol düzeylerinin amiloid beta toksisitesi ve nörosteroidlerin sentezi üzerine etkisi
The effect of different cholesterol levels in neuronal cells on amyloid beta toxicity and steroid synthesis
ÖZLEM GÜRSOY ÇALAN
- NGF uyarımlı nöronal farklılaşma modelinde shootin1 proteininin tanımlanması ve ilişkili hücre-içi sinyal iletim yolağının ortaya çıkarılması
Identification of shootin1 protein and determination of related intracellular signaling pathway in an NGF-stimulated neuronal differentiation model
VOLKAN ERGİN
Doktora
Türkçe
2014
BiyolojiGazi ÜniversitesiTıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMİNE SEVDA MENEVŞE