Geri Dön

Thermotoga maritima Sel12A selülaz enziminin katalitik özelliklerinin protein mühendisliği yoluyla geliştirilmesi

Improving the catalytic properties of Thermotoga maritima Cel12A cellulase enzyme by using protein engineering

  1. Tez No: 371454
  2. Yazar: HANDAN ÜSTÜKARCI
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. SERAP EVRAN
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2014
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ege Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 100

Özet

Selülaz, dünya genelinde en yaygın kullanılan üçüncü endüstriyel enzimdir. Selülozun hidrolizi amacı ile kullanılan selülazların düşük kararlılığı ve yüksek üretim maliyeti, endüstriyel kullanımlarını kısıtlamakta ve selülozun istenilen verimlilikte kullanımını engellemektedir. Bu tez çalışmasında, hipertermofilik Thermotoga maritima kaynaklı selülaz 12A enziminde protein mühendisliği yöntemleri kullanılarak amino asit değişiklikleri gerçekleştirildi. Amino asit değişiklikleri sonucu, optimum pH ve pH kararlılığı özellikleri değiştirilmiş mutant enzimler elde edilmesi amaçlandı. Selülazı kodlayan gende error-prone PCR yoluyla rastgele mutasyonlar oluşturuldu ve gen kütüphanesi Escherichia coli'ye aktarıldı. Gen kütüphanesi karboksimetilselüloz agarda Kongo kırmızısı ile boyama yöntemi kullanılarak tarandı. Asidik ve bazik pH değerlerinde doğal enzime kıyasla daha kararlı olan mutant enzimler belirlendi ve bazı enzimatik özellikleri karakterize edildi.

Özet (Çeviri)

Cellulases are the world's third most widely used industrial enzymes. However, low stability and high production cost limit the utilization of these enzymes in hydrolysis of cellulose. In this thesis, amino acid exchanges were introduced onto cellulase 12A from Thermotoga maritima via protein engineering methods. The aim of introducing amino acid exchanges was to obtain mutant enzymes with altered optimum pH and pH stability profiles. A gene library was generated, and random mutations were introduced onto tmCel12A gene by using error-prone PCR. The resulting gene library was tansformed into Escherichia coli cells. The gene library was screened by observing zones after staining carboxymetyl cellulose agar plates with congo red. Mutants, which were more acid and alkali stable than wild-type enzyme were obtained. Then, some of the catalytic parameters were analyzed.

Benzer Tezler

  1. Biyoetanol üretimi için Thermotoga naphthophila'dan β-ksilanazın moleküler klonlanması, ekspresyonu ve karakterizasyonu

    Molecular cloning, expression and characterization of β-xylanase from Thermotoga Naphthophila for bioethanol production of bioethanol

    ÖZGENUR DİNÇER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2021

    BiyoteknolojiBartın Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AHMET KARADAĞ

    PROF. DR. KEMAL BÜYÜKGÜZEL

  2. Population dynamics in two-stage anaerobic digester treating solid wastes

    Katı atık arıtan iki kademeli havasız reaktör sistemindeki populasyon dinamikleri

    ARDA GÜLAY

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2010

    Biyoteknolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    PROF. DR. İZZET ÖZTÜRK

  3. Lignoselülozik içerikli biyokütle ile beslenen anaerobik çürütücülerde Clostridium thermocellum'un biyogaz üretimine etkisi

    Bioaugmentation with Clostridium thermocellum in the anaerobic digestion of lignocellulosic biomass

    BÜŞRA ECEM ÖNER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    Çevre Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Çevre Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ORHAN İNCE

  4. Treatability of aircraft deicing fluids (ADFs) by high-rate anaerobic systems: An investigation on biogas potential and energy recovery

    Havalimanlarında ortaya çıkan buz çözücü sıvıların yüksek-hızlı anaerobik sistemlerde arıtılabilirliği: Biyogaz potansiyeli ve enerji geri kazanımının araştırılması

    GİZEM ENGİZ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2018

    Çevre Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Çevre Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ÇİĞDEM GÖMEÇ