Geri Dön

Tavşanlarda limbal eksplanttan çıkan limbal kök hücrelere farklı büyüme ortamlarının ve eksplantın ekildiği farklı yüzey materyallerinin etkisi

The effects of different cell growth media and surface materials on rabbit limbal stem cells during limbal explant culture

  1. Tez No: 386520
  2. Yazar: MEHMET GÜRDAL
  3. Danışmanlar: PROF. DR. KEMAL BAYSAL, PROF. DR. İSMET DURAK
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biyomühendislik, Göz Hastalıkları, Biochemistry, Bioengineering, Eye Diseases
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2014
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Dokuz Eylül Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 134

Özet

Gözümüzün ön yüzeyini oluşturan kornea, görebilmemizi sağlayan bir dokudur. Kornea epitelinin sürekli yenilenerek işlevsel olmasını limbusta yer alan kök hücreler sağlamaktadır Herhangi bir nedenle kök hücrelerin fonksiyon gösterememesi, korneanın tamamen opaklaşarak ciddi görme kaybına neden olmaktadır. Limbal kök hücre yetmezliği olarak tanımlanan bu patoloji için günümüzde en geçerli tedavi yaklaşımı limbal epitelyal eksplant kültürü ile çoğaltılan limbal kök hücre naklidir ve klinik başarı nakledilen limbal kök hücrelerin yüksek sayıda olmasına bağlıdır. Eksplanttan çıkan limbal kök hücrelerinin oranının artırılması, maksimal kök hücre çoğalmasını sağlayan hücre kültür ortamının ve eksplantın yerleştirildiği yüzey materyalinin optimizasyonu ile sağlanabilir, bu konuda kapsamlı yayınlar yoktur. Bu çalışmada biz, farklı büyüme ortamlarının ve farklı yüzey materyallerinin Yeni Zelanda tavşan limbal epitelyal eksplant kültüründen çoğaltılan hücre popülasyonu içerisindeki kök hücre oranı üzerine etkisini araştırdık. Çalışmada hücre büyüme ortamı olarak, DMEM-F12 kontrol grubunu oluşturmak üzere karşılaştırma amacıyla pluripotin, otolog serum, Epilife, KSFM, D-KSFM ve hücre büyüme ortamları olarak seçilmiştir. Yüzey materyali olarak, insan amniyotik membranı kontrol grubunu oluşturmak üzere karşılaştırmak amacıyla kollajen I ve poröz PET membran seçilmiştir. Kültür sonrası elde dilen hücrelerin protein ekspresyonu immünfloresan metod ile ve gen ekspresyonu real time PZR ile belirlenip farklı koşullar karşılaştırılmıştır. Büyüme ortamları içerisinde en yüksek hücre sayısı elde edilen ve protein ekspresyonu düzeyinde sitokeratinler bakımından yüksek limbal kök hücre oranı sağlayan KSFM'dir. Farklılaşmış hücre işaretleyicilerinin protein ekspresyonları, Epilife dışında diğer büyüme ortamlarında anlamlı olarak düşmektedir. Bir yüzey materyali olarak PET, iAM ile benzer kök hücre oranı sağlarken, Kollajen I Jel limbal epitelyal eksplant kültüründe limbal kök hücrelerinin çoğalmasını desteklememektedir.

Özet (Çeviri)

Decreased limbal stem cell function results in decreased vision. Currently the treatment for limbal stem cell deficiency is growing limbal stem cells in explant culture followed by their transplantation. The clinical success depends on the number of transplanted stem cells. The effect of different cell culture media and the nature of surface material on which the explants are maintained on the number of stem cells obtained from an explant have not been investigated in detail. In this study, we have used limbal explants from New Zealand White rabbits and have aimed to investigate the effect of different cell culture media and the nature of surface material on which the explants are maintained on the number of stem cells obtained from an explant. We used DMEM-F12-media as a control and compared Pluripotin, autologous serum Epilife, KSFM, D-KSFM. As surface materials, we used hAM as a control group and compared type I collagen, PET membrane. We analyzed the effect of different media and surfaces on cells from explants through quantifying protein expression and gene expression. Comparing the effect of media, KSFM provided the highest number of total cells and higher ratio of limbal stem cells based on cytokeratin protein expression. Differentiated cell protein marker expressions were significantly decreased in all media tested except Epilife. As a surface material, PET was shown to provide similar ratio of limbal stem cells from explant culture relative to hAM. Collagen I gel does not support the growth of limbal stem cells from limbal explants in culture.

Benzer Tezler

  1. Tavşanlarda deneysel kornea alkali yanıklarının sağaltımında kornea-konjunktival transpozisyon ile limbal kök hücre transplantasyon tekniklerinin karşılaştırılması

    Comparison of the healing effects of corneoconjunctival transplantation and limbal stem cell transplantation on alkaline burned corneas of rabbits.

    İREM GÜL SANCAK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2009

    Veteriner HekimliğiAnkara Üniversitesi

    Cerrahi (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ZEKİ ALKAN

  2. Tavşanlarda uygulanan glokom filtran cerrahisinde everolimus uygulamasının skar oluşumu üzerine etkisinin mitomisin-c ile karşılaştırmalı olarak incelenmesi

    Anti̇-proli̇ferati̇on effects of everoli̇mus and comparati̇on wi̇th mi̇tomyci̇n-c i̇n rabbi̇t glaucoma fi̇ltrati̇on surgery

    RUKEN ÇİNİK

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    Göz HastalıklarıKocaeli Üniversitesi

    Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NURŞEN YÜKSEL

  3. Erkek tavşanlarda (Oryctolagus cuniculus) genital organlar ve eklenti bezlerinin postnatal morfolojik gelişimi üzerine araştırmalar

    Investigations on the postnatal morphological development of genital organs and accessory glands in the male rabbits

    ALİ AYDIN

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    1998

    Veteriner HekimliğiFırat Üniversitesi

    Anatomi (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. SADIK YILMAZ

  4. Yeni zelanda tavşanında medulla spinalis'in pars lumbalis'inin morfometrik ve stereolojik olarak incelenmesi

    The stereological and morfometrical investigation of pars lumbalis of spinal cord in new zealand rabbit

    BERNA DUMAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2020

    AnatomiBurdur Mehmet Akif Ersoy Üniversitesi

    Anatomi (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ İFTAR GÜRBÜZ