Kardiyomiyositlerde ksantin/ksantin oksidaz ile indüklenen strese karşı, fenolik bitkisel bileşiklerin antioksidatif, anti-inflamatuvar ve sitoprotektif etkilerinin in vitro yöntemlerle araştırılması
Research on antioxidative and cytoprotective effects of phenolic antioxidants against xhantine/xhanthine oxidase-induced cellular stress and toxicity in cardiomyocyte cultures in vitro
- Tez No: 399100
- Danışmanlar: PROF. DR. ÇİMEN KARASU
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Pharmacy and Pharmacology
- Anahtar Kelimeler: Antioksidanlar, Bitki özütü, Ksantin oksidaz, Kuersetin, Polifenol, Yapraklar, Zeytin, Zeytin ağacı, Antioxidants, Plant extract, Xanthine oxidase, Quercetin, Polyphenol, Leafs, Olive, Olive tree
- Yıl: 2015
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Gazi Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Tıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Hipoksi-yeniden oksijenlenme sürecinde kalpte ksantin oksidaz enziminin aktive olması sebebiyle güçlü oksidan süperoksit anyonu üretimininin arttığı gösterilmiştir. Süperoksit anyonu oluşturucu“ksantin/ksantin oksidaz ”sistemlerin kardiyomiyosit ölümünü tetiklediği ve iskemik kalp hastalıklarına zemin oluşturduğu bilinmektedir. X/XO'ın kardiyak etkilerini ve polifenolik bileşiklerin koruyucu özelliklerinin mekanizmalarını daha iyi anlayabilmek için, bu tezde X/XO ile indüklenen oksidatif stres modelinde, iki farklı zeytin yaprağı kuru ekstresinin ve zeytin yaprağı polifenolik bileşiklerinin (oleuropein, kersetin ve hidroksitirozol) hücre canlılığı, reaktif oksijen türevi (ROS) oluşumu ve sağkalım-ölüm süreçlerinde rol oynayan hücre içi sinyal proteinleri düzeyindeki etkilerini H9c2 kardiyomiyositlerde araştırdık. H9c2 hücrelerinin X/XO ile uyarılması ROS oluşumunu arttırdı (DCFDA deneyi) ve hücre canlılığını (MTT deneyi) inhibe etti. Her bir ekstrenin ve polifenolik bileşiklerin farklı konsantrasyonları ile ön inkübasyon, X/XO aracılı ROS oluşumunu ve hücre canlılığını anlamlı olarak inhibe etti. Western blot analizleri, MAPKAPK-2 ve p44/42-MAPK'ın fosforile formlarının ve cl-caspase-3 düzeylerinin X/XO muamelesi ile arttığını ve fosforile c-jun ve Hsp27'in düzeylerinin ise azaldığını gösterdi. Estreler, kersetin ve hidroksitirozol X/XO ile indüklenen p-MAPKAPK-2 ve cl-caspase-3 düzeylerini iyileştirdi. Oleuropein, X/XO ile indüklenen p-MAPKAPK-2 düzeylerini inhibe ederken, cl-caspase-3 düzeylerini anlamlı olarak etkilemedi. Hidroksitirozol p-c-Jun düzeylerinde X/XO ile oluşan azalmayı arttırırken, Hsp27 ve p44/42-MAPK (ERK1/2)'nin fosforile formlarının indüksiyonuna neden oldu. Bu çalışma sonuç olarak oleuropein, hidroksitirazol ve kersetin içeriği yüksek polifenolik zeytin yaprağı ekstrelerinin, X/XO ile indüklenen oksidatif strese karşı hücre canlılığını iyileştirerek, ROS oluşumunu önleyerek ve sağkalım-ölüm süreçlerinde rol oynayan özgün proteinlerin fosforile formlarının ifadelenme düzeylerini değiştirerek kardiyomiyosit hücrelerini koruduğunu göstermiştir.
Özet (Çeviri)
The superoxide anion generating xanthine/xanthine oxidase (X/XO) system has been shown to induce cardiomyocyte death, which is a hallmark of ischemic heart disease. To better understand the exact mechanism of the action of X/XO and the effects of polyphenols, in this thesis we investigated the molecular action mechanism (s) and involved signaling pathways in the treatment of X/XO-induced oxidative stress with two different olive leaf extract mixtures and olive leaf polyphenolic compounds, oleuropein, quercetin and hydroxytyrosol in cardiomyocyte cell line. The stimulation of H9c2 cells with X/XO evoked ROS generation and inhibited the viability of cells. The preincubation with each extract, oleuropein, quercetin or hydroxytyrosol partially improved the viability and completely inhibited the generation of intracellular ROS in X/XO exposed cells. Western blot analysis showed that X/XO led to an increase in p-MAPKAPK-2, phospho-p44/42-MAPK and cl-caspase-3, but a decrease in the phosphorilation of p-c-Jun and p-Hsp27. Preincubation with each extract, quercetin or hydroxytyrosol partially ameliorated p-MAPKAPK-2 and inhibited cl-caspase-3 induced by X/XO. Oleuropein while inhibited p-MAPKAPK-2, had no effect on cl-caspase-3 in X/XO exposed cells. Hydroxytyrosol also increased down regulation of a transcriptional target p-c-Jun and led to overexpression in a protective stress-sensitive protein phospho-p44/42-MAPK (ERK1/2) and p-Hsp27 in X/XO exposed cells. We concluded from the results of our experiments that olive leaf extracts including high polyphenol content with oleuropein, hydroxytyrosol and quercetin provide cardiomyocyte cell protection activity against X/XO-induced oxidative challenge through recovery and good maintenance of cell viability, inhibiting ROS production and modulation of signaling proteins related with cell survival and death.
Benzer Tezler
- Selenyum ve E vitamini eksikliği: Papiller kasın elektrofizyolojik ve mekaniksel fonksiyonları
Deficiency of selenium and vitamin E: The Electrophysiological and mechanical functions of the papiller muscle
MESUT KILIÇ
- Hücre dışı adenozin trifosfat uygulamasının izole kardiyak miyositlerdeki etkilerinin tüm-hücre Patch Clamp yöntemi ile incelenmesi
Investigation of the extracellular adenosine triphosphate effects on isolated cardiac myocytes using whole-cell Patch Clamp technique
MEHMET UĞUR
- Embriyonel sıçan kalbinde atriyal natriüretik peptid (ANP), desmin, vimentin, laminin ve fibronektin dağılımları ve kalp gelişimi ile fonksiyonel ilişkileri: İmmunohistokimyasal çalışma
The distrubitions of atrial natriuretic peptide (ANP), desmin, vimentin, laminin and fibronectin in embryonal rat heart and their functional relationships with heart development: An immunohistochemical study
SEVİL ÇAYLI (SEYFELİ)
Yüksek Lisans
Türkçe
2001
MorfolojiAkdeniz ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. İSMAİL ÜSTÜNEL
- Elektif perkütan koroner revaskülarizasyonda trimetazidinin kardiyoprotektif etkisinin değerlendirilmesi
Assessment of the cardioprotective effect of trimetazidine during elective percutaneous coronary revascularization
AYTEN SAYIN YAZLAR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2002
KardiyolojiDokuz Eylül ÜniversitesiKardiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF.DR. ÖZHAN GÖLDELİ
- Çeşitli kalıtsal kardiyak aritmi formlarında etkin olan genler ve bu genlerdeki mutasyonların saptanması
Molecular analysis of inherited forms of cardiac arrhythmia
ECE SELEN ŞAHİN
Yüksek Lisans
Türkçe
2003
Tıbbi Biyolojiİstanbul ÜniversitesiGenetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEMNUNE YÜKSEL APAK