Mikrobiyal hyaluronik asit üretimi ve saflaştırılması
Microbial production and purification of hyaluronic acid
- Tez No: 414080
- Danışmanlar: PROF. DR. NURAY YAZIHAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2015
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ankara Üniversitesi
- Enstitü: Biyoteknoloji Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Temel Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 90
Özet
Hyaluronik asit (HA) yüksek molekül ağırlıklı bir glikozaminoglikan polimeridir, molekül ağırlığı onun fizyolojik rolünü, reolojik özelliklerini ve bunlara bağlı olarak uygulama alanlarını belirlemektedir. HA, rutin olarak hem Grup A hem de Grup C Streptococcus türlerinin fermantasyonu ile üretilmektedir. Günümüz biyoteknoloji alanı içerisinde hyaluronik asit oldukça önemli bir yere sahiptir. HA' nın farklı formulasyonları ve moleküler ağırlıkları; oftalmoloji, ortopedik cerrahiler, rejenerasyon sürecinin hızlandırılması ve desteklenmesi gibi alanlar başta olmak üzere tıpta ve günümüzde oldukça yüksek bir pazar payına sahip olan kozmetik sektöründe yaygın bir şekilde kullanılmaktadır. Bu tez çalışması kapsamında, Streptococcus equi (S.equi) (9682) mikroorganizması kullanılarak HA üretimi, saflaştırılması, immünojenite ve toksikolojik analizlerin yapılması amaçlanmıştır. Mikrobiyal üretimde optimum koşulların belirlenebilmesi amacıyla, farklı çalkalama hızları, pH değerleri, inkübasyon sıcaklıkları, inokulum ve sukroz konsantrasyonları denenmiştir. Ardından kültür sıvısından ekstraksiyon yöntemi ile HA elde edilmiştir. Elde edilen HA çözeltisine farklı moleküler boyutlardaki diyaliz membranları uygulanarak, saflaştırma işlemi gerçekleştirilmiştir. Elde edilen ve ticari olarak satılan farklı moleküler ağırlıklardaki HA' nın fare deri fibroblast (L929, ATCC) hücre dizisi kullanılarak in vitro hücre canlılık değerlendirmesi (MTT testi) yapılmış ve biyouyumluluk değerlendirmesi için insan monositik hücre dizisi (THP-1, ATCC) makrofaja, phorbol-12-miristat-13-asetat (PMA) uygulaması ile farklılaştırılarak elde edilen HA makrofaj hücrelerine uygulanmış ve immünolojik yanıt oluşturup oluşturmadığı proinflamatuar sitokinlerden tümör nekroze edici faktör (TNF-α), interlökin-8 (IL-8) ve anti-inflamatuar sitokin interlökin-10 (IL-10) sekresyon düzeyleri belirlenerek değerlendirilmiştir. Çalışma kapsamında, üretilen HA' nın, ticari olarak alınan HA ile aynı immünolojik yanıtı vermiş olduğu gözlenmiştir.
Özet (Çeviri)
Hyaluronic acid (HA) is a linear high molecular weight glycosaminoglycan polymer with its molecular weight determining its physiological role, rheological properties and applications. HA is routinely produced through fermentation of both Group A and C streptococci. Today, HA has a very important place in the biotechnology field. HA is used due to its different formulations and molecular weights in ophthalmology, orthopedic surgery, accelerating the process of regeneration and support, especially in commercial medicine and in cosmetic industry in which is widely used and has a very big market today. In this thesis, Streptococcus equi (S.equi) (9682) was used for the microbial production process and then, purification, immunological and toxicological processes were applied to it which was obtained by S.equi. To obtain the optimum conditions of microbial production, different shaking rates, pH values, temperatures, inoculum and sucrose concentrations were applied to culture process. Next, HA was extracted from fermentation culture. And then, HA was purified with using dialysis membranes which have different molecular weight cut-off (MWCO). Mouse fibroblast cells (L929, ATCC) were used for toxicity test (MTT) to evaluate in vitro cell viability of the obtained and purchased HA and human monocytes (THP-1) cell line which were differentiated to macrophage cells by phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA), were used for biocompatibility tests to evaluate tumor necrosis factor (TNF-α), interleukin-8 (IL-8) and interleukin-10 (IL-10) cytokines secretion of them for immunological respond. And, the produced and commercial HA gave the same immunological results on these tests.
Benzer Tezler
- Yara enfeksiyonlarından korunma ve iyileştirmeye yönelik 'akıllı' kumaş geliştirilmesi ve medikal aplikasyonu
Development of 'intelligent' fabric for the curingand prevention from microbial infections of openwounds and medicinal application of the 'intelligent' fabric
NOUHAN DOUMBOUYA
- Electrofiltration of biopolymers - Spatially distributed process analysis
Biyopolimerlerin elektrofiltrasyonu - Uzamsal proses analizi
GÖZDE GÖZKE AÇIKALIN
Doktora
Türkçe
2012
BiyomühendislikKarlsruher Institut für TechnologieBiyosüreç Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. CLEMENS POSTEN
- Development and optimization of purification processes for hyaluronic acid
Hyaluronik asit için saflaştırma süreçlerinin geliştirilmesi ve optimizasyonu
ÖZGE BULDAĞ
Yüksek Lisans
İngilizce
2020
BiyomühendislikMarmara ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. DİLEK KAZAN
PROF. DR. BARRY WHITE
- Streptococcus zooepidemicus ile hyaluronik asit üretiminde optimum koşulların belirlenmesi
Optimization of culture conditions in hyaluronic acid production using Streptococcus zooepidemicus
HİLAL GİRGİN
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
BiyomühendislikBursa Teknik ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HAMDİ ÖĞÜT
- Mikrobiyal hyaluronik asit üretimi ve tarımsal atıkların hyaluronik asit üretiminde değerlendirilebilirliğinin araştırılması
Microbial hyaluronic acid production and investigation of the evaluability of agricultural waste in hyaluronic acid production
YASEMİN KARASU
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
BiyolojiEskişehir Teknik ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MERİH KIVANÇ