Kestane (Castanea sativa) tohumundan lipaz enziminin saflaştırılması ve kinetik özelliklerinin incelenmesi
Kestane (Castanea sativa) tohumundan li̇paz enzi̇mi̇ni̇n saflaştirilmasi ve ki̇neti̇k özelli̇kleri̇ni̇n i̇ncelenmesi̇
- Tez No: 415496
- Danışmanlar: DOÇ. DR. BAHAR SÖKMEN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Kestane (Castanea sativa) Tohumu, Lipaz, Saflaştırma, Karakterizasyon, Chestnut (Castanea Sativa) Seed, Lipase, Purification, Characterization
- Yıl: 2016
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Giresun Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 115
Özet
Bu çalışmada, ülkemizde Giresun İli ve çevresinde bol miktarda yetişen kestane (Castanea sativa) tohumlarından lipaz enzimi ilk defa saflaştırıldı ve kinetik özellikleri incelendi. Petrol eteri ile yağı uzaklaştırılmış kestane tohumları 0.06 M sodyum fosfat tamponu (pH=7.0) ile homojenize edildi. Lipaz esteraz aktivitesi gösteren homojenizatın %90'lık (NH4)2SO4 kesiti elde edildi. Dializden sonra bu kesit sırasıyla hidroksiapatit ve DEAE-selüloz kolonlara uygulanarak lipaz enzimi 186.87 kez saflaştırıldı. Saflaştırma işlemlerinde protein miktarı Lowry ve E280/E260 Warburg yöntemlerine göre, lipaz esteraz aktivitesi ise Erlanson yöntemine göre tayin edildi. Saflaştırılan enzimin SDS-PAGE elektroforezi sonucunda molekül ağırlığının 30 kDa olduğu bulundu. Optimum pH ve sıcaklık değerleri, pH ve sıcaklık stabiliteleri, optimum reaksiyon süresinin tayini, uygun enzim ve substrat konsantrasyonu belirlendi. Kestane tohumlarından saflaştırılan lipazın optimum pH'sının 9.0, optimum sıcaklığının 30°C olduğu bulundu. Enzimin çeşitli substratlara karşı ilgisi incelendiğinde, lipazın ilgisinin en çok p-nitrofenil miristada olduğu ve bu substrata karşı Km ve Vmax değerlerinin sırasıyla 1.017 mM ve 163.874 Ünite olduğu saptandı.
Özet (Çeviri)
In this study, lipase was firstly purified from chestnut (Castanea sativa) seeds, being abundant in Giresun (Turkey) and surroundings and the kinetic properties of the enzyme were investigated. Chestnut seeds, being fat-free with petroleum ether extraction, were homogenized with 0.06 M sodium phosphate buffer (pH=7.0) 90% of (NH4)2SO4 fraction of lipase esterase activity homogenate was obtained. After dialysis, this fraction was applied respectively to hydroxyapatite and DEAE-cellulose columns, and lipase was purified 186.87 times. In the purification process, the protein content was determined by using Lowry and E280/E260 Warburg methods, and lipase esterase activtiy was assayed with Erlanson's method. The purified enzyme, which showed SDS-PAGE, had a molecular weight of 30 kDa. The optimum pH and temperature values, pH and temperature stabilities, optimum reaction time, appropriate concentrations of the enzyme and substrate were investigated. It was also found that the lipase purified from chestnut seeds had an optimum pH value of 9.0 and an optimum temperature of 30C. When high affinity for various substrates of the enzyme is analyzed, it was found that most of the lipase of interest in myristate and 1.017, respectively p-nitrophenyl is the Km and Vmax values against the substrate unit is mm and 163.874.
Benzer Tezler
- Kestaneden (Castanea sativa) saflaştırılan lipaz enziminin çeşitli taşıyıcılara immobilizasyonu
Lipase purification from the seeds of chestnut (Castanea sativa) and its immobization on various supports
ESRA AYAR
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
BiyokimyaGiresun ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. BAHAR BİLGİN SÖKMEN
- Isparta'da son on yılda yapılan ağaçlandırma çalışmalarının değerlendirilmesi
Evaluation of forestation activities in Isparta region in the last decade
RAMAZAN ÇETİN
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
Ormancılık ve Orman MühendisliğiSüleyman Demirel ÜniversitesiOrman Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SÜLEYMAN GÜLCÜ
- Kestane (Castanea sativa Mill.) ormanlarında farklı silvikültürel müdahalelerin sürgün gelişimi üzerine etkileri
Effects on shoot development of different silvicultural treatments in a chestnut forest (Castanea sativa Mill.)
FAHRETTİN ATAR
Doktora
Türkçe
2019
Ormancılık ve Orman MühendisliğiKaradeniz Teknik ÜniversitesiOrman Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İBRAHİM TURNA
- Kestane ağacı meyvelerinde zarar yapan böcek türlerinin genetik belirteç ile belirlenmesi ve bunların filogeni ve populasyon genetikleri: Bir pilot barkod çalışması
Identification of insect species damaging chestnut fruit by genetic markers and their phylogeny and population genetics: A pilot barcoding study
ELİF ASLAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
BiyolojiOndokuz Mayıs ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. NEVRAN EYLEM AKMAN GÜNDÜZ
- Impact of chestnut (Castanea sativa Mill.) leaf powder and quercetin on production performance and some physiological traits of broilers
Kestane (Castanea sativa Mill.) yaprağı tozu ve kuersetinin etlik piliçlerde üretim performansı ve bazı fizyolojik özelliklere etkisi
MUSAAB HASEEB ARIF ARIF
Yüksek Lisans
İngilizce
2023
ZiraatÇankırı Karatekin ÜniversitesiTarım ve Yaşam Bilimleri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ALPASLAN KUŞVURAN
PROF. DR. AHMET TAİES TAHA