Eritrosit membranı proteinlerinin amonyum sülfat ile ayrılması
Separation of erytrocyte memrane proteins with ammonium sulfate
- Tez No: 44809
- Danışmanlar: PROF. DR. EDİP KEHA
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 1995
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Karadeniz Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 80
Özet
Bu çalışmada, eritrosit membran proteinleri amonyum sülfatla ayınlarak, sodyum dodesil sülfat poliakrilamid jel elektroforeziyle elektroforetik hareketlilikleri izlendi. Bu amaçla farklı yöntemler denendi. Birinci yöntem için 30, ikinci ve üçüncü yöntemler için 10'ar normal numune kullanıldı. %10, %20, %30, %40 ve %50'lik amonyum sülfat doygunlukları ve %10'luk akrilamid konsantrasyonda hazırlanmış jeli kullanan birinci yöntemde, tüm bantların en iyi gözlenebildiği doygunluk %10 oldu. %5, %10, %15, %20, %25, %30, %40, %50, %60, %70, %80 doygunluklarıyla yapılan ikinci yöntemde %15'lik doygunluk ve %5, %15, %25, %35, %45, %55, %65, %75 ve %85 doygunluklan ile yapılan üçüncü yöntemde yine %15'lik doygunluk tüm bantların en iyi gözlenebildiği amonyum sülfat doygunluklan olarak bulundu. İkinci ve üçüncü yöntem için %8'lik akrilamid konsantrasyonlu jeller kullanıldı. Her üç yöntemde de, hemen hemen tüm doygunluklarda spektrin dimerlerine rastlanmıştır. Ayrıca ankirin, protein 4.1, protein 4.2 ve protein 4.5'in alt birimlerde gözlenebilmiştir. Protein 4.2 birinci yöntemde ve özellikle % 10luk doygunlukta dimer halinde görülürken protein 4.5 bazı numunelerde dimer bazılarında ise trimer yapıda görülmüştür. Ayrıca EDTA'nın proteinlerin ayrışmasına etkisini belirlemek amacıyla EDTAlı ve EDTA'sız tank tamponu ile yapılan elektroforez neticesinde EDTA'lı tank tamponunun bantlarının iyi gözlenebilmesi açısından daha olumlu sonuç verdiği tespit edilmiştir.
Özet (Çeviri)
In the present study, erythrocyte membrane proteins were precipitated by ammonium sulfate and then their electrophoretic mobilities were analysed by sodium dodecyl sulfate- polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) using Laemmli slab gel discontinuous buffer system. For this reason, different methods were examined. 30, 10 and 10 normal samples were used for the first, second and third methods respectively. In the first method, ammonium sulfate saturation of 10%, 20%, 30%, 40% and 50%, and gel with 10% acrylamide concentration were used. The saturation of 10% was the best in which 95.5%, of the all bands were observed. For the second method, 5%, 10%, 15%, 20%, 35%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70% and 80% saturation, and for the third method, 5%, 15%, 25%, 35%, 45%, 55%, 65%, 75% and 85% saturation were used to obtain erythrocyte membrane polypeptides. Both of the later methods were analysed by gels with 8% acrylamid concentration and 15% saturations were the best for both. However, abundances of then- protein bands were different such that while 88.2% of all bands were observed with 15% saturation in second method, 92.7% of all bands were observed with again 15% saturation but in third method. In all of three methods, it was observed spectrin dimer in almost all saturations. Moreover, the subunits of ankirin, protein 4.1, 4.2, and 4.5 could be seen. Protein 4.2 was seen as dimer especially with 10% saturation in the first method. In addition, protein 4.5 was sometimes seen as trimer. To determine the effect of EDTA on protein separation, reservoir buffers with EDTA and without EDTA were used. In the result of electrophoresis, reservoir buffer with EDTA was better than the other due to the observations of bands.
Benzer Tezler
- Hemolitik anemili olgularda eritrosit zar proteinlerinin elektroforez yöntemi ile incelenmesi
The determination of erythnocyte membrane proteins with electrophoretic techniques in hemolytic anemia cases
SERAP YALIN (SERİN)
- Herediter sferositoz tanısı ile izlenen çocuklarda eritrosit membran proteinlerinin ELISA yöntemi ile saptanması
Determination of erythrocyte membrane proteins in children with the diagnosis of hereditary spherocytosis by ELISA
ŞEYMA TÜRKMEN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2018
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıAdnan Menderes ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ YUSUF ZİYA ARAL
- Tavşanlarda deneysel olarak oluşturulan ketozis olgularında eritrosit membran proteinlerinin incelenmesi
The Red blood cell membrane proteins in rabbits with experimental ketosis
SEFA ÇELİK
- Selenyumdan noksan rasyonla beslenen Akkaraman koyunlarda eritrosit membran proteinlerinin incelenmesi
Investigation of the erythrocyte membrane proteins in Akkaraman sheeps fed with selenium deficient food
NİL ÜNAL (BORAZANCI)
- Eritropoietik hücre farklılaşması süresince gözlenen membran abnormalitelerinin SDS_PAGE yöntemi kullanılarak belirlenmesi
Determination of the membrane abnormalities occured during the differentation of erythropoietic cell by SDS-Page method
CENNET ÇAM
Yüksek Lisans
Türkçe
1998
Tıbbi BiyolojiAkdeniz ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HÜSEYİN BAĞCI