Granulocyte-colony stimulating factor analog production by recombinant Escherichia coli
Rekombinant Escherichia coli ile granülosit-koloni uyarıcı faktör analogu üretimi
- Tez No: 474878
- Danışmanlar: PROF. DR. PINAR ÇALIK, PROF. DR. HASAN ONGUN ONARAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2017
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 108
Özet
Granülosit koloni uyarıcı faktör (G-CSF) önemli bir biyolojik famasötik üründür. G-CSF, Endüstride ağırlıklı olarak Escherichia coli'de rekombinant olarak üretilmektedir. Bu çalışmada bir E. coli ekspresyon suşu doğal bir insan proteinine göre bir amino asit değişikliği olan His-etiketli mutant G-CSF'yi heterolog olarak ifade etmek üzere genetik olarak tasarlanmıştır. Bu suş 7.0 L biyoreaktörde litre başına 58 gram kuru hücre ağırlığına yoğunlaştırılmıştır. Biyoreaktör kültürünün rekombinant protein konsantrasyonu litre başına 4.9 grama ulaşmıştır. G-CSF C17A, hücre kültüründen ayrıştırılıp ve saflaştırılmış, in vitro olarak ticari ürünle karşılaştırılabilir biyoaktiviteye sahip olduğu gösterilmiştir. Saflaştırılmış G-CSF C17A, gelişmiş özelliklere sahip bir biyo-ürün elde etmek üzere PEGile edilmiştir. PEGilasyon reaksiyonunda % 37 dönüşüm sağlanmıştır.
Özet (Çeviri)
Granulocyte-colony stimulating factor (G-CSF) is a significant pharmaceutical biologic. It is predominantly produced using Escherichia coli in the industry. In this study, an E. coli expression strain was genetically engineered to heterologously express a His-tagged mutant G-CSF with one amino acid substitution with respect to native human protein. A fed-batch strategy for this strain was developed. Biomass concentration in 7.0 L bioreactor reached a density of 58 grams of dry cell weight per liter. Recombinant protein concentration of bioreactor culture reached 4.9 grams per liter. G-CSF C17A was purified from cell culture, and was shown to have comparable bioactivity to innovator product, in vitro. Purified G-CSF C17A was PEGylated to achieve a bioproduct with enhanced properties. A 37% conversion of G-CSF C17A to PEG-G-CSF 17A was achieved in PEGylation reaction.
Benzer Tezler
- Filgrastim'in parenteral uygulaması için mikroemülsiyon formülasyonu geliştirilmesi ve değerlendirilmesi
Microemulsion formulation development and evaluation for parenteral administration of filgrastim
MELİKE ÖZDER
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
BiyoteknolojiEge ÜniversitesiFarmasötik Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AYŞE GÜLTEN KANTARCI
- Granülosit-koloni stimüle edici faktöre bağlı kemik ağrısı gelişen hastalarda masajın etkisi
The effects of massage intervention on the patients have granulocyte-colony stimulating factor related bone pain
ZEYNEP IŞIK
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
HemşirelikHacettepe Üniversitesiİç Hastalıkları Hemşireliği Bilim Dalı
DOÇ. DR. LEYLA ÖZDEMİR
- Granülosit koloni uyarıcı faktörün hücre mobilizasyonundaki rolünü, lipolitik etkisini aydınlatmak için kemik iliğinde metabolom ve aday bir enzim olarak fosfolipaz ,C beta 2 değerlendirmesi
Evaluation of metabolome and phospholipase C beta 2 as a candidate enzyme in the bone marrow to elucidate the role of granulocyte colony stimulating factor in cell mobilization and its lipolytic effect
NİHAN ORAL
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2024
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıHacettepe ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. TEKİN AKSU
- Sağlıklı kemik iliği donörlerinde granülosit koloni stimüle edici faktörün mezenkimal kök hücre kaynaklı immün modülatör sitokinlere etkisi
The effect of granulocyte colony-stimulating factor on immune modulatory cytokines by mesenchymal stem cell in the healthy bone marow donors
İKBAL OK BOZKAYA
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2012
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıSağlık BakanlığıÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. DUYGU UÇKAN ÇETİNKAYA
DOÇ. DR. FATİH MEHMET AZIK
- Otolog ve allojenik hematopoetik kök hücre transplantasyonunda G-CSF reseptörü missense tek nükleotid polimorfizmlerinin CD34+ kök hücre zenginleştirilmesi üzerine etkisi
The G-CSF receptor missense single nucleotide polymorphisms effect of CD34+ stem cell enrichment in autologous and allogeneic hematopoietic stem cell transplantation
BAHAR ZEHRA ÇAMURDANOĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2010
OnkolojiHacettepe ÜniversitesiTemel İmmünoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMİN KANSU